植物基因组DNA 快速提取（50 次）实验步骤

植物基因组DNA 快速提取（50 次）
概述：
本方法可用于植物细胞DNA 的快速提取，可提取107 细胞，其质量能够满足各种分子生物学要求。

组成：
1．溶液A 1.2ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2．溶液B 60ml
3．溶液C 180ml
4．溶液D 3ml Resin 用时充分混匀
5. 溶液E 50ml 洗液(用前加入75ml 无水/酒精,充分混匀)
6．溶液F 25ml TE buffer

步骤：
1. 组织≤0.1g，液氮研磨，加入0.3ml 溶液B，反复混匀，室温5min。
2. 加入0.8ml 溶液C，溶液A 20μl，充分混匀，室温放置20min。
3. ≥8000rpm 离心3min。
4. 取上清，加入50ul 溶液D，室温放置5min，≥8000rpm 离心1min，弃上清。
5. 加入800μl 溶液C，混匀，≥8000rpm 离心1min，弃上清。
6. 加入1ml 溶液E，混匀，≥8000rpm 离心30-60s，弃上清。
7. 重复步骤6。
8. ≥12000rpm,离心30-60s，吸干上清，室温敞开盖晾干约5-10min。
9. 取溶液F 200-300μl，混匀，40-50℃水浴3-5min。
10. ≥12000rpm 离心30-60s，取上清，即为DNA。

注：
1. 组织若多，可适当加大溶液B 和溶液D 的用量，其它成份不变。
2. 混匀一定要温和，否则DNA 大分子将被打断，而部分降解。
3. 适用新鲜组织、嫩组织，尽可能去除叶脉、叶柄。
4. 液氮研磨一定要保证组织在研磨过程中形如干粉状。
5. 用户可依实验需要，适当调整溶液F 加入量，溶液F 越少，DNA 浓度越高，但产量略有损失，若想最大限度提高产量，可重复步骤9、10。两次所得DNA 可合在一处。