高效液相色谱是一个需要多个步骤的复杂过程,所有这些步骤都需要无缝地协同工作才能从样品中获得准确且可重复的结果。分析实验室使用同一台仪器设备在一定有限的时间内处理大批量样品和处理不同性质的样品,样品类型或样品制备方法和使用的材料之间的细微差别会影响最终的结果。想要确保过滤装置中的材料与溶剂之间的相容性可以最大限度地减少问题,这就需要一致的过滤。选择具有合适孔径和截留特性的过滤装置有助于确保有效去除微粒,而选择合适尺寸和设计的过滤装置有助于最大限度地减少样品损失。良好的过滤还有助于保护色谱柱,并可能延长进样器和色谱柱的使用寿命。
一、为什么要为HPLC预过滤样品:
处于对仪器性能和数据质量的担忧,通常使用的预防措施之一是将样品预过滤,在将样品加载到仪器之前对其进行过滤,通常使用注射器过滤以确保它不含任何可能损坏进样器或弄脏进样器的颗粒物质柱子。因为颗粒污染会导致悬浮颗粒堵塞色谱柱筛板从而导致压力增加和数据质量下降,这一般可以直接通过更换色谱柱来解决。当然,更换色谱柱需要考虑到成本和维护仪器时的停机时间。
二、过滤可保护泵:
从泵的角度来看,理想的溶剂绝对不含颗粒物质的。颗粒会干扰止回阀球和阀座之间的密封界面使得其泄漏或完全失效,从而导致泵流量不一致或无流量。微粒还会加速泵活塞和密封件的磨损导致泄漏和流量不准确。这些问题通常表现为嘈杂或不规则的基线、泵的操作压力的意外波动以及保留时间的变化。
三、过滤可保护色谱柱:
在HPLC中通常使用的填充柱颗粒之间的间隙大小是颗粒本身直径的一小部分,所以液相色谱分析柱的填充床本身也可以充当有效的过滤器起过滤作用。色谱柱末端的筛板有两个作用:它们将颗粒保留在色谱柱内防止流动相携带的颗粒进入并部分阻塞流经颗粒床。颗粒在色谱柱入口侧的玻璃料上的积聚也会导致玻璃料堵塞。
四、过滤可延长HPLC仪器组件的使用寿命:
考虑到尽管是极低水平的样品污染也会给仪器带来一些问题,所以在加载之前预过滤样品是一个简单、快速且成本低廉的步骤,可以大大改善HPLC的分析检测结果。样品预过滤延长了昂贵且对质量至关重要的仪器组件(包括泵、进样器和色谱柱)的使用寿命。
过滤器的选择是成功的关键。使用错误的滤膜可能会导致样品污染或其他损坏,从而对结果产生负面影响。不同的流动相需要不同的过滤膜,以确保不需要的物质不会从膜中浸出并进入样品中。不同的样品还需要不同的膜,以确保分析物不会被膜束缚,并在进样前从样品中去除或减少。
今天恒谱生分享的知识先到这啦,希望对您的工作有所帮助!
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