液相色谱柱高端国产化——恒谱生盛装亮相BCEIA9月6日—9月8日，第二十届北京分析测试学术报告会暨展览会在北京中国国际展览中心举行。北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2023）作为中国分析与生化技术交流与展示的“峰会”，广受国内外众多专家、学者、仪器制造商、代理商等人员的关注。恒谱生深耕色谱耗材领域多年，作为BCEIA的“老朋友”，恒谱生将携色谱柱、超高压空柱管总成、超高压保护柱、超高压在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、定量环、管路接头等色谱耗材盛装亮相北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2023）。新品专区一：2.1#直连保护柱2.1#直连在线过滤器2.1#超高压在线过滤器3.0#直连保护柱3.0#直连在线过滤器10#半制备保护柱恒谱生空柱管●耐高压，耐腐蚀●精度高，密封好●管内壁光滑[光洁: 0.1μ]●柱效高，死体积小，重复性好●pH耐受范围为1-14●使用寿命长，是国外同类型柱管的理想替代品恒谱生一直致力于解决国内色谱仪器厂家在配套色谱耗材生产过程中面临的突出难题、卡脖子问题，以更好地解决仪器厂家的供应链困扰，助力仪器厂家不断地提高产品竞争力、进行有效的进口替代。如果您想与我们交流行业经验，如果你对色谱耗材感兴趣，那就相约第二十届北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2023）！

一、要确定样品中某种成分的浓度，应遵循以下步骤：（1）标准溶液的制备：要确定样品中某组分的浓度，必须制备已知该组分浓度的标准溶液。标准溶液在组成和使用的溶剂方面应与样品相似。必须准备多种不同浓度的标准溶液以创建校准曲线。（2）校准曲线创建：下一步是通过绘制每个标准溶液的峰面积与其浓度的关系来创建校准曲线。校准曲线是峰面积与浓度之间的线性关系，曲线的斜率代表组分的响应因子。响应因子是峰面积与组分浓度的比值。（3）从峰面积计算浓度：创建校准曲线后，可以通过测量样品中组分的峰面积并使用校准曲线将峰面积转换为浓度来确定样品中组分的浓度。某组分浓度的计算公式为：浓度 =样品中组分的峰面积/组分的响应因子。       通过测量色谱图中的峰面积来确定各组分的浓度。峰面积与样品中组分的浓度成正比。组分的浓度越大，峰面积越大。然而其他因素，如色谱柱效率、仪器流速和色谱柱温度都会影响峰面积，因此在确定组分浓度时必须考虑这些因素。要确定一种成分的浓度，必须制备一种已知该成分浓度的标准溶液，并且必须通过绘制每种标准溶液的峰面积与其浓度的关系图来创建校准曲线。 二、要在HPLC中实现准确的浓度测定，应遵循以下步骤：（1）色谱柱和仪器的校准：为了最大限度地减少错误并获得准确的结果，必须正确校准色谱柱和仪器。色谱柱应定期维护，同时色谱仪器应使用适当的标准和溶剂进行校准。（2）合适的标准品和溶剂：必须使用与样品相似的合适标准品和溶剂。使用与样品不相似的标准品和溶剂会影响结果的准确性。（3）样品制备：必须正确制备样品以确保准确的结果。应将样品均质化并过滤，以去除任何影响结果的杂质。样品也应正确进样到色谱柱中，以免柱子过载或影响结果的准确性三、解决常见问题：  在 HPLC 中可能会出现一些影响结果准确性的常见问题。一些最常见的问题包括：（1）色谱柱退化：随着时间的推移，色谱柱会退化并影响结果的准确性。定期维护色谱柱并使用适当的溶剂和标准品可以最大程度地减少此问题。（2）仪器漂移：仪器会随时间漂移，导致组分的保留时间和峰面积发生变化。定期校准仪器可以最大限度地减少这个问题。（3）样品污染：样品污染会影响结果的准确性。适当的样品制备和过滤可以最大限度地减少这个问题。      今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！ 

       2023年4月13-15日，2023重庆国际分析生化及实验室展览会将在重庆国际博览中心举办。作为中西部最大的分析生化之一，本届展会预计将吸引来自全球超过500家企业参加，同时深圳市恒谱生科学仪器有限公司将携新款产品盛装亮相。       恒谱生高度重视此次分析生化展，将携色谱柱、超高压空柱管总成、超高压保护柱、超高压在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、定量环、管路接头等色谱耗材精彩亮相，展位号N1馆G27，期待您的莅临！       恒谱生作为特别受邀品牌方，致力于解决国内色谱仪器厂家在配套色谱耗材生产过程中面临的突出难题、卡脖子问题，以更好地解决仪器厂家的供应链困扰，助力仪器厂家不断地提高产品竞争力、进行有效的进口替代。值得一提的是，除了分析生化展外，主办方还召开“2023分析生化行业高层论坛”等多场技术论坛，邀请国内外专家与参会代表前来互动交流，探讨行业发展趋势，分享各自取得的经验成果。届时，恒谱生热忱欢迎新老客户、各界朋友莅临指导、洽谈合作！ 2023重庆国际分析生化及实验室展览会时间：2023年4月13-15日展位号：N1馆G27地址：重庆国际博览中心（重庆市渝北区悦来大道66号）

   据悉，2023第10届国际生物发酵产品与技术装备展览会于2023年3月30-4月1日在山东国际会展中心召开，展会将围绕，生物工程、发酵工程、细胞工程、蛋白工程、生物医药、生物饲料、生物肥料、生物化工、发酵产品等产业化中的新产品、新技术、新装备、新工艺为主要展示内容。             深圳市恒谱生科学仪器有限公司技术力量雄厚，管理规范，拥有大批具备多年制作经验的员工队伍和高级机械工程师，同时引进了国内外先进的生产设备和生产技术，在产品开发、产销规模、产品质量以及诚信服务等诸多方面均代表了同行业的先进水平。       恒谱生一直致力于解决国内色谱仪器厂家在配套色谱耗材生产过程中面临的突出难题 、卡脖子问题，以更好地解决仪器厂家的供应链困扰，助力仪器厂家不断地提高产品竞争力、进行有效的进口替代。       值得一提的是，本届生物发酵展以“发挥引擎作用，实现高质量发展”为主题，为生物产业创新发展助力，这与同样以精益求精缔造质量“神话”为目标的恒谱生不谋而合。           恒谱生将携色谱柱、超高压空柱管总成、超高压保护柱、超高压在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、定量环、管路接头等色谱耗材盛装亮相2023济南国际生物发酵展，展位号4号馆C06，欢迎新老客户及友商们前来交流学习！ 2023第10届国际生物发酵产品与技术装备展览会（济南）时间：2023年3月30-4月1日地址：山东国际会展中心（济南市槐荫区日照路1号）恒谱生展位号：4号馆C06号

   据悉，2023第10届国际生物发酵产品与技术装备展览会于2023年3月30-4月1日在山东国际会展中心召开，展会将围绕，生物工程、发酵工程、细胞工程、蛋白工程、生物医药、生物饲料、生物肥料、生物化工、发酵产品等产业化中的新产品、新技术、新装备、新工艺为主要展示内容。             深圳市恒谱生科学仪器有限公司技术力量雄厚，管理规范，拥有大批具备多年制作经验的员工队伍和高级机械工程师，同时引进了国内外先进的生产设备和生产技术，在产品开发、产销规模、产品质量以及诚信服务等诸多方面均代表了同行业的先进水平。       恒谱生一直致力于解决国内色谱仪器厂家在配套色谱耗材生产过程中面临的突出难题 、卡脖子问题，以更好地解决仪器厂家的供应链困扰，助力仪器厂家不断地提高产品竞争力、进行有效的进口替代。       值得一提的是，本届生物发酵展以“发挥引擎作用，实现高质量发展”为主题，为生物产业创新发展助力，这与同样以精益求精缔造质量“神话”为目标的恒谱生不谋而合。           恒谱生将携色谱柱、超高压空柱管总成、超高压保护柱、超高压在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、定量环、管路接头等色谱耗材盛装亮相2023济南国际生物发酵展，展位号4号馆C06，欢迎新老客户及友商们前来交流学习！ 2023第10届国际生物发酵产品与技术装备展览会（济南）时间：2023年3月30-4月1日地址：山东国际会展中心（济南市槐荫区日照路1号）恒谱生展位号：4号馆C06号

在液相色谱上遇到的问题有很多，例如HPLC 色谱柱的一些常见问题时有出现，可能会令很多实验员感到非常沮丧。那么今天，恒谱生带您了解这些是什么以及如何解决它们可以让您避免数小时的挫败感。 一、无峰值：       可能有多种因素会导致 HPLC 输出中不出现峰或出现非常小的峰。正常读数应该又大又细的峰值，高度也是会有不一样的。小峰或没峰可能代表检测器灯已关闭，没有流动相流量和样品丢失或变质，或者检测器、积分器、进样器阀或记录器这些有问题存在。     其实先要确保探测器是打开状态，然后检查所有连接情况。确保自动进样器样品瓶中有足够的液体和样品中无气泡情况出现，并使用新的标液重新进行系统的检查。 二、无流量：       如果没有出峰，很有可能是HPLC 色谱柱中没有流量；也可能意味着泵已关闭或流量因某种原因中断或受阻；同时泵头中也可能存在泄漏或空气滞留。       如果泵关闭，需要启动泵并检查储液器中的流动相液位和整个系统的流量情况。检查样品环是否有其他障碍物或气塞，并确保流动相组分可混溶且流动相是否能够进行正常脱气。继续检查系统松动情况，检查泵是否有泄漏等其他问题。三、压力问题：      要是压力低于平常或无压力这有可能是系统某处发生泄漏或空气滞留；要是系统压力过高，那么泵、进样器、在线过滤器、保护柱、分析柱或管路都可能有问题。      如果是检查发现是低压，那就要检查整个色谱系统是否存在泄漏、泵密封件故障或阀门损坏的情况等。如果是高压的话，先从移除保护柱和分析柱，并用接头替换，将进样器重新连接到检测器。以 2-5 mL/min 的速度运行泵，并开始查找原因，。如果问题是出现在分析柱上，请在分析柱与检测器断开连接时反转，并冲洗色谱分析柱；在必要的时候更换入口滤芯或更换柱子。 四、裂峰：       如果发现峰出现在中间下降形成M形，那么可能是分析柱入口可能存在一些污染；也可能在色谱柱入口处有筛板被堵塞了或存在了不均匀的空隙；还有可能是样品溶剂与流动相不相容。       如果是入口处有污染，请反转并冲洗色谱柱，并在需要时更换筛板。还可以用具有相同键合相功能的薄膜颗粒重新填充色谱柱顶部，并继续以反向流动方向使用色谱柱；如果是问题出在样品上，请调整流动相中的样品，因为样品和流动相中的 pH 值差异会导致分峰。 五、尾峰和前峰：       发现峰不是直线上升和下降，而是开始在前面或后面就形成轻微的倾斜，则称为前端或尾部。这通常可能是保护柱或分析柱受损或是色谱柱过载。如果有拖尾峰，请先移除保护柱并尝试分析，必要时就需要更换。如果需要恢复或更换分析柱。一定要检查流动相的组成和色谱柱的性能。有前峰的话，请尝试注入更小的体积或稀释样品；如果溶剂有问题请调整溶剂，并使用 50 柱体积的 HPLC 级乙酸乙酯以标准流速的两倍或三倍冲洗极性键合相柱，然后在开始分析之前使用中等极性溶剂。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

    有网友问“液相色谱柱安装步骤”，下面就来科普一下。液相色谱柱由柱管、压帽、卡套、筛板、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。        液相色谱柱安装第一步：打开包装，确认型号，尺寸，出厂日期和柱子内存的溶剂填料；        第二步：拧下柱子两端的密封堵头放回包装盒供备用，安装柱子标明的流动相，把色谱柱端口通过连接管和进样阀相互连接，如果有条件，配套使用恒谱生保护柱，用来收集、阻断来自进样器的机械和化学杂质，以保护和延长分析柱的使用寿命。        第三步：柱子出口和检测器连接，连接的两端有空心螺纹钉和密封用压环。在接管的时候需要降低柱管的死体积。连接管通过空心螺钉后要插到底。然后拧紧空心螺钉。可以借助扳手拧紧，注意不要用力过大或者拧滑丝了。        以上就是液相色谱柱安装步骤。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！后期如有关于c18填料,c18色谱柱,色谱柱填料,制备色谱柱,液相色谱柱,反相色谱柱请联系客服。

近日，据国家相关产业扶持政策就加强基础研究进行第三次集体学习，提出要打好科技仪器设备、操作系统和基础软件国产化攻坚战，鼓励科研机构、高校同企业开展联合攻关，提升国产化替代水平和应用规模，争取早日实现用我国自主的研究平台、仪器设备来解决重大基础研究问题。据了解，我国分析仪器行业起步较晚，而海外龙头通过并购和研发多重优势抢占全球科学仪器主要份额，因此目前我国科学仪器仍主要依赖海外品牌。据《科研仪器国产替代发展策略研究》，我国大型科研仪器七成以上为进口产品，国产化率较低。近年来，科学仪器的研发制造和自主化愈发受到重视。据“十四五”规划纲要，我国将适度超前布局国家重大科技基础设施，加强科研仪器设备研发制造。政策推动叠加本土化需求，国产科学仪器企业产品研发进度超预期。据业内相关人士指出，目前uHPLCs恒谱生、聚光科技、雪迪龙、禾信仪器、力合科技等国内企业已在液相色谱柱、筛板、质谱、光谱仪产品等实现了部分国产化，初步突破仪器技术门槛，完成产品线的初步布局。据《实验室分析仪器国产化替代战略思考》，全球实验室分析仪器中，光谱、色谱、质谱仪占37%，为分析仪器主要的产品。资料显示，色谱、筛板、光谱、质谱仪为主要的分析仪器产品，可用于环保、生命科学、材料分析、食品科学等领域。随着政策推动国产科学仪器龙头研发进度超预期，科学仪器有望获得价值重估的机会，国内TOP企业业绩有望爆发。据相关数据显示，国内布局科学仪器的企业主要包括：公司相关业务恒谱生致力于高品质色谱耗材配件的研发制造OEM为一体的生产企业，专业研发色谱柱、空柱管总成、保护柱、在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、管路接头等。必创科技子公可卓立汉光的光谱类科学仪器产品以分子光谱方向为主；公可贴息项目订单已开始执行。皖仪科技公司的三重四极杆液质联用仪由公司白主开发，在研发测试阶段。力合科技具备有机质谱、无机质谱、临床质谱、液相色谱等系列在内的多种实验室整体解决方案。天瑞仪器公司的气质联用仪、液质联用仪、电感耦合等离子体发射光谱仪、原子吸收光谱仪等产品可应用在高校、医疗和科研等领域。东方中科覆盖国产仪器相关业务，包括仪器代理、系统集成和计量检测等。

 在 HPLC 中，流动相是纯溶剂或混合溶剂以及带有固体改性剂的溶剂。色谱工作者可以针对 HPLC 的不同应用在数百种溶剂中进行选择。特定的选择通常受溶剂特性的影响，例如粘度、折射率、非腐蚀性、毒性、混溶性、透明度等。以合理的价格以足够的纯度商业供应也是重要因素。流动相中的溶剂强度或有机溶剂百分比控制分析物的保留时间。 一、什么是流动相？      流动相是使分析物通过色谱柱的溶剂。分析物存在于适当的溶剂中，在样品制备后注入色谱系统。该溶剂不被视为新基质，因为它不会干扰分析。可以在样品制备过程中选择分析物的载体（溶剂）的性质，以满足特定要求，例如挥发性和与 HPLC 中流动相的混溶性。在反相色谱柱中，流动相比固定相更具极性。一般来说极性流动相是首选，因为分离表现出更好的重现性。       分析物在流动相中的溶解度在色谱柱选择中也起着重要作用。对于溶于水或部分水性溶剂的化合物，选择反相 HPLC 不是问题，但对于不溶于极性溶剂的化合物，通常需要使用正相色谱柱。样品极性、固定相极性和流动相极性的评估对于色谱柱的选择也很重要。 二、流动相的一般选择要求： 1.纯度：所有溶剂都应具有最高的纯度和质量。HPLC 级溶剂经过预过滤和纯化，在紫外线下具有最小的吸光度。因此，它们不含会在色谱图基线中产生假峰的杂质。缓冲液制备中使用的水具有最高纯度。去离子水通常含有痕量有机化合物，因此不推荐用于HPLC。2.粘度：为了保持可接受的压降 (HPLC色谱柱的流速，流动相粘度应尽可能低。较低粘度的流动相产生较窄的色谱峰。例如乙腈通常是反相 HPLC 的首选溶剂，因为它不仅粘度低于甲醇或异丙醇，而且具有良好的保留特性。 3.沸点：如果涉及样品回收，沸点很重要，低沸点溶剂更容易从样品中去除。 4.无腐蚀性：溶剂必须对 HPLC 系统组件无腐蚀性。5.毒性：现在每个人都关心与实验室化学品相关的健康和安全风险。四氢呋喃可用作不稳定或稳定的流动相。不稳定的版本如果完全蒸发可能有爆炸危险，并且在不储存在氮气下时容易分解。稳定版本在用于检测的典型紫外线波长下具有高紫外线吸收率。6.混溶性：并非所有HPLC溶剂都可混溶。如果混合了不混溶的溶剂可能会导致一些问题，例如不稳定的基线、波动的压力、高压等。异丙醇可与大多数常见的 HPLC 溶剂混溶。因此，在不确定最后使用的溶剂系统的情况下，它可以用来冲洗 HPLC 的流路。 透明度（UV 截止）：流动相（无样品）必须在用于检测的波长下充分传输。一项研究表明，流动相吸光度在检测波长处通常应小于0.5。           三、流动相制备：      预混：流动相预混合是通过分别测量每种溶剂的体积并将它们合并到溶剂容器中来完成的。当有机溶剂与水混合时，会出现负混合体积。例如，准备1升的甲醇/水 (50:50)，在量筒中分别量取 500 毫升的甲醇和水，然后将它们混合在一起。由于溶剂在混合时会收缩，因此不宜将500毫升甲醇倒入1升容量瓶中并用水定容，因为需要超过 500 毫升的水。      缓冲：含有酸性或碱性分析物的样品需要在流动相中加入缓冲液。pH 调节应单独在水性缓冲液中进行，即在将其与任何有机溶剂混合之前进行。应采取预防措施以防止缓冲沉淀的任何可能性。甲醇可与大多数缓冲液混溶。当磷酸盐缓冲液与乙腈 混合时，上限应为60-80% ACN，磷酸盐缓冲液的浓度应小于 15mM 以防止沉淀。2.5至3的酸性pH值是大多数制药应用的良好起点。这是由于大多数酸性分析物的电离受到抑制以及碱性分析物与硅胶基色谱柱上表面硅醇的相互作用最小。用于流动相制备的常见酸有磷酸、甲酸和乙酸。在整个梯度运行过程中，缓冲添加剂的浓度必须保持恒定。通常建议在流动相的水相和有机相中使用相同浓度的 TFA 或其他酸（吸收紫外线）以抑制梯度运行期间任何类型的基线偏移。       另外，选择合适的流动相吸滤头（又称溶剂进样口过滤器)可有效滤除流动相中的固体颗粒杂质，但未经过滤的溶剂或溶剂瓶中生长的微生物都会降低溶剂入口过滤头的寿命和泵的性能，因此，需要定期清洗或更换溶剂进样口过滤器。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

        相信很多色谱分析员都知道，改变色谱柱内径将对许多变量产生直接影响，包括峰高、信噪比、平均柱效、样品载量、对强注射溶剂的敏感性、压力、分析物保留次、溶剂用量和/或液体废物的产生等多方面问题。市面上的液相色谱柱的内径有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多种选择，那么，为什么会有这么多内径规格呢，下面恒谱生带您了解。一：内径对柱色谱有什么影响？       在柱色谱法中，样品物质在流动相的帮助下穿过柱子。它们根据与固定相的相互作用进行分离，从而产生不同的保留时间。换句话说，可以根据流动相和固定相之间相互作用的类型以及它们通过色谱柱所需的时间来分离和检测分子。那么，柱径如何符合方程式的呢？可以想象，更大的直径使流动相更容易通过。相反，较窄的列意味着这样做需要更长的时间。可以理解为这对敏感性有连锁反应，花在色谱柱上的时间越少意味着灵敏度越低，而时间越长则灵敏度越高。因此，较宽的直径通常会导致较低的灵敏度，而较窄的直径则与较高的灵敏度相关。其实样本量也会有影响，较宽的色谱柱需要更大的样品和更多的溶剂才能进行分析，而窄的色谱柱可以使用较小的样品和较少的溶剂作为流动相。       当然，选择色谱柱并不是只有内径这一种因素，色谱柱的长度和它们能够承受的压力也可能不同。从长度开始，这可以产生与直径类似的效果。较短的色谱柱可缩短分析时间从而降低灵敏度。而较长的色谱柱会增加分析时间并改善结果。基于以上所述，很显然长而窄的色谱柱会提供更加优越的结果，因为它会增加分析时间、提高灵敏度并且不需要更大的样品。但是，推动流动相通过色谱柱需要更大的压力。色谱柱只能承受一定程度的压力，而泵需要能够提供足够的压力，因此在选择时也需要考虑这一点。在泵的出口和进样阀之间可以安装在线过滤器，是能够用来过滤流动相中的杂质和固体颗粒，保护液相系统的正常运行的一种过滤型色谱耗材。在液相色谱系统中，恒谱生在线过滤器可以很大程度上地减少泵、混合器和管路在流动相中输送过程中所产生的堵塞、损坏仪器等情况出现。二：为什么要使用不同直径的色谱柱？       有两个主要优势：第一个是减少流动相消耗，第二个是减少峰体积。如果将流速调整为恒定线速度，如HPLC柱径改变时保留时间应相同，因此样品运行时间将保持不变。如果运行时间相同且流速降低，则将使用较少的流动相。峰体积（以体积表示的峰宽）随着色谱柱横截面积的减小或直径变化的平方而下降。这转化为成比例的更高的峰，假设相同质量的样品可以加载到色谱柱上，这可能是正确的，也可能不是正确的。因此，假设注入相同质量的样品，从 4.6 毫米内径的色谱柱换成 2.1 毫米的色谱柱应该会将峰宽减少五倍，并将峰高增加相同的量。       当柱直径发生变化时，对流速进行必要的改变以保持恒定的线速度是相当简单的。减小柱径有助于节省溶剂和提高检测限。但是对于较小直径的色谱柱，可能会观察到系统性能的下降。从故障排除的角度来看，很容易将系统性能不佳归咎于色谱柱本身，而真正的罪魁祸首可能是 LC 系统的柱外体积。对柱外效应的相对不敏感是填充直径 5 µm 颗粒的4.6 mm × 150mm 色谱分析柱可能在未来许多年内仍然是常规 LC 工作的主力色谱柱的原因之一。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       食品防腐剂是能防止由微生物引起的腐败变质，能够延长食品保质期的一种添加剂，它的主要作用是抑制食品中微生物的繁殖。今天恒谱生就以橄榄的防腐剂为例子给大家讲讲。 一、橄榄果的简介：　　橄榄果以两种形式使用，分别是食用橄榄和油。橄榄果实可以在从成熟开始的任何阶段采摘，当它是绿色的时候，直到它变成黑色并完全成熟，在着色前成熟期间获得的正常大小的果实称为“绿橄榄”。天然绿橄榄可以直接浸入盐水中而无需任何 NaOH 处理或用碱液处理，由于橄榄表面和加工厂环境中存在的微生物群的活性或添加发酵剂的发酵而发生自发发酵，盐水的酸性条件导致橄榄苦苷的扩散或化学水解。 二、橄榄果中的苯甲酸和山梨酸：　　苯甲酸和山梨酸都是常见的食品防腐剂，人体内大量摄入苯甲酸和山梨酸，会导致中毒、大脑萎缩、新陈代谢失调。在我国，食用橄榄生产中会加入食品添加剂，使橄榄的外观和风味达到消费者所需的状态，并防止橄榄变质延长保质期。食品添加剂是一种天然或人工合成的化学物质，用于改善食品的感官特性（颜色、气味、味道）以延长保质期并减少营养和质量损失，涉及生产、加工、包装和/或储存而不是主要成分。防腐剂的有效性取决于介质的 pH 值、缓冲特性、介质的组成和水分活度值、抗菌物质的活性谱、活性的量和持续时间以及存在于介质中的微生物的数量和特性。媒介。 三、高效液相色谱分析：　　其实测定防腐剂的方法有很多，例如薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相气谱法等，但很多实验室分析都会选择高效液相色谱进行分析实验。高效液相色谱法是在经典液相色谱法基础上发展起来的，是一种更高分离、更高灵敏的新型技术，具有测定范围广、分离效率高、分析速度快和自动化程度强等特点，已成为现阶段各大分析科研实验室最常用的分析手段。HPLC用于分离、鉴定和量化混合物中的每种成分。它依靠泵将含有样品混合物的加压液体溶剂通过填充有固体吸附材料的柱子。样品中的每种成分与吸附材料的相互作用略有不同，导致不同成分的流速不同，并导致成分在流出色谱柱时分离。　　恒谱生是致力于高品质色谱耗材配件的研发制造OEM为一体的生产企业，专业研发色谱柱、空柱管总成、保护柱、在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、管路接头等。在液相色谱方面已经成为众多国产色谱仪器厂家和国内外色谱耗材供应商的战略合作伙伴。 　　今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       相信很多开发HPLC方法的实验研发人员都开发出了无法分离混合物重要成分的方法，其方法可以是调整流动相、固定相或柱温,另一种有效的方法是改变色谱柱粒径。粒径较小的液相色谱柱产生较高的塔板数以获得更尖锐的峰，并且能够分离紧密洗脱的峰。一些高分子量化合物在小孔径填料上可能无法分离，但在用大孔径填料填充的色谱柱上很容易分离。       通常解决紧密或共洗脱峰的有效的方法是改变流动相组成或柱填料颗粒的键合相功能 。众所周知的分辨率方程清楚地确定了影响峰分辨率的三个主要因素：其中Rs是两个靠近洗脱峰的分辨率（间距）；k是代表保留的容量因子；α 是靠近洗脱峰的容量因子的比率；N为代表柱效的柱塔板数。反相 HPLC 是一种非常强大的方法，通常可以毫不费力地实现分离，有时甚至只需要初始操作条件。然而，重叠和叠加的峰通常会产生，因此需要改变操作条件。有几种方法可以提高重叠峰的分辨率或带间距，或者解耦叠加的峰。一、相对保留的调整：      有时可以通过调整容量因子k（保留）值来对分离不严重重叠的峰进行微小改进降低流动相的强度。二、通过提高柱效提高分离度：      适度重叠的峰通常可以通过提高柱效来解决，通过增加柱塔板数来锐化峰（减少峰体积）。一种有效的方法是使用颗粒较小的色谱柱，因为这会增加塔板数并提高柱效。三、通过改变流动相有机改性剂增加谱带间距：      在反相 HPLC 中改善谱带间距的有效方法是改变流动相成分以增加 α 值。如果在初始分离中观察到严重重叠或叠加的峰，则此方法更适合。改变有机改性剂是产生峰间距变化的有效途径。例如，如果初始分离使用乙腈作为有机改性剂并显示出此问题，建议的方法是更换改性剂：先换成甲醇或再换成四氢呋喃。      根据实际情况，有时可以通过增加柱塔板数、使用更小的颗粒或增加柱长来改善分离。但这些方法的缺点是较高的操作压力和较长柱的分离时间增加。其中有效的方法是改变流动相有机改性剂或色谱柱功能，在这种情况下分离时间不会增加，有时可以缩短以实现更快的分离。对于肽和蛋白质等大分子，使用孔径较大的色谱柱颗粒很重要。      今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       举个例子问您一个问题，您有没有试过在滤纸条上放一小点黑色墨水，然后浸在溶剂溶液中的测试？您没看到墨水是如何开始在纸条上移动并溶解成不同颜色的吗？其实您完成了这个小实验，您就已经记住了什么是色谱。      如果您从事化学工作或研发类实验分析等相关领域，您可能遇到过液相色谱。液相色谱法是一种分析技术，可将液体或混合物样品分离成单独的纯组分。液相色谱技术是准确的，并且由于样品通过设备暴露于一组物理或化学反应而发生，样品经过流动相和固定相以达到最终结果。一、液相色谱过程涉及哪些步骤，是如何完成的：液相色谱法的分离原理基于既定的方法。这是一个简单的总结：1.将作为吸附剂固体的固定相置于其预期的液相色谱柱中。2.含溶剂的流动相开始慢慢通过固定相柱。这个过程根据重力或通过泵发生。3.待分离混合物样品的注入从色谱柱的顶部开始。4.是分离阶段；由于每个元素与吸收材料的不同相互作用，开始将混合物分离成其组分。这导致每个元素的吞吐量都比另一个元素高。这意味着每个组件的移动速度与其他组件的移动速度不同。5.分离出的组分从柱子底多次出机。6.是元器件识别阶段，这些成分被转移到检测器以确定它们的性质。        一旦样品的所有成分离开色谱分析柱，检测器将指示每个成分是什么。这通常以图形形式显示，称为色谱图。该图由表示组分保留或保留时间的水平轴和表示信号强度（即信号浓度程度）的垂直轴组成。色谱图中的每个峰都表明样品中存在一种化学物质，其类型由其保留时间决定。大多数已知化学品都有基于国际标准的典型保留时间，在图表上定义为峰值保留时间。通过图表，可以估计样品中物质的体积和浓度。解离物质的峰高表示其浓度，即已知具有高而宽曲线的物质含有高浓度。 二、液相色谱的应用 ：     工业和应用经常使用液相色谱。包括：医学领域：液相色谱法在医学上用于使用血液样本帮助识别新生儿的遗传疾病。药物制剂：液相色谱法用于药物开发过程中鉴定药物成分。它还经常用于分离用于药物的最纯净形式的化学品。化学领域：液相色谱用于在完成后确定制造的化学产品与预期结果的相容性。环境领域：液相色谱法用于被有害物质污染的环境中，以确定主要污染物质的类型。食品领域：液相色谱法在食品工业中有多种应用。这包括质量控制和确定不同食物的维生素和矿物质含量。教育领域：液相色谱法常用于大学和学校，以教授学生基本的色谱法原理并帮助他们进行重要的科学研究。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

     柱色谱法是一种常用于分离复杂混合物中分子的方法。与平面色谱不同，在柱色谱中固定相或树脂被填充到色谱柱中。然后流动相通过填充的固定相以实现分离。这种分离的目的可以是分析性的或制备性的。柱层析在玻璃、塑料或金属柱内的填充三维固定相上进行，可用于制备和分析目的。柱层析技术包含基于不同固相和液相化学和柱配置的广泛应用，能够实现精确分析以及分离难以或不可能通过其他方法分离的复杂混合物。       有许多系统可用于液相色谱，系统的选择取决于所需分离的复杂性。流动相可以通过重力流、使用离心力或使用基于泵的自动系统通过固定相。基于泵的系统范围从由蠕动泵和馏分收集器组成的更简单的低压色谱系统到复杂的中压色谱系统和包括多波长检测器和缓冲液混合功能的高压液相色谱系统。因此，柱色谱根据所用流体流动系统的类型进行分类：重力色谱、低压层析、中压色谱（包括快速蛋白液相色谱）、高压/高效液相色谱(HPLC)。其中，重力色谱通常用于小规模的制备色谱。低压和中压色谱系统通常用于中等规模的制备应用。中压系统用途更广可用于分析和制备目的。高压系统允许对蛋白质或小分子进行高分辨率分离，最常用于分析目的。一、重力色谱：       重力色谱利用重力使样品和缓冲液通过分析柱的树脂。尽管预装重力柱在市场上有售，但实验室自己装柱填充的情况并不少见。重力色谱法是一种低成本、简单的制备色谱法，但它不能提供高分辨率。重力色谱可应用于核酸、肽和蛋白质的小规模、快速制备层析等方面。 二、低压层析：       低压层析系统在低于 50 psi (0.35 MPa) 的压力下运行。这些系统需要一个样品泵并且通常配备馏分收集器、梯度能力和检测器来监测柱洗脱。低压系统与预装柱兼容，并提供比重力色谱更大的灵活性和更高的分辨率。尽管如此，低压层析并不是一种适用于复杂蛋白质纯化的高分辨率层析方法。低压层析应用于天然或重组蛋白质的中等规模制备层析。 三、中压色谱：      中压色谱，也称为快速蛋白液相色谱，更适用于复杂的纯化，也可用于分析目的。中压色谱法是在实际上相当高的操作压力下进行的，最高可达 3500 psi (24 MPa)。中压色谱系统通常包括附加功能，例如柱切换阀、高级梯度功能和多波长检测器。这些系统与各种预装柱和树脂兼容，中压色谱可应用于简单的重组蛋白纯化以及从非挥发性有机物到核酸、肽和蛋白质的分析目的。 四、高压液相色谱：       高压液相色谱法 (HPLC)也称为高效液相色谱法，是在高达 5,000 psi (34 MPa)的压力下进行的。HPLC 是一种强大的分析工具，具有高分辨率和灵敏度，能够检测低至万亿分之一的浓度，同时具有非常小的样品需求。由于 HPLC 系统可以在更高的压力下运行，因此可以减小树脂的粒径，从而提高树脂的分辨率。     使用 HPLC 分析的化合物种类很多，所以HPLC 系统通常具有多种类型的检测器。一种常见的组合是紫外吸光度检测器与蒸发光散射检测器 (ELSD) 和/或质谱仪 (MS) 的组合。HPLC 和质谱法的结合产生 HPLC-MS，通常缩写为 LC- MS，一种非常强大的分析工具，用于环境采样、药物发现和蛋白质组学研究等应用。      今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       近年来随着高效液相色谱仪的检测器灵敏度和色谱柱峰容量的提高，可以在极低浓度下进行检测，但鬼峰问题却成为了人们关注的焦点。恒谱生今天就跟大家聊聊鬼峰产生原因和解决措施吧!一、什么是鬼峰：       如果化合物出现的时间少于预期的保留时间,则称为鬼峰”。这将显示为与注入同一色谱图的化合物具有不同保留时间的峰。色谱中的鬼峰是在小于预期保留时间的间隔内出现的不需要的峰。这些峰通常是由其他化合物或代谢物与溶剂和固定相的相互作用引|起的,这会导致分离度降低，使评估分离质量变得困难。 二、鬼峰的来源：      鬼峰的来源通常分为三类：目标物质以外的杂质、LC仪器的内部污染和流动相中的杂质。(1) 仪器中的杂质      仪器中产生鬼峰的最常见原因是进样器造成的残留。当将针头浸入小瓶中吸取样品时，样品中的物质会成为残留物的来源，因为它们可以吸附到针头的内外表面。那些即使在针头冲洗后也没有被去除的物质被带到下一个分析中，并以鬼峰的形式出现。由于即使在多次空白分析（仅注入流动相的分析）后也会出现表现出特别强吸附的物质，因此可能很难将自动进样器识别为鬼峰的来源。(2) 样品中的杂质      当样品中存在与目标化合物吸收波长相同的杂质时，就会产生鬼峰。由于来自样品的鬼峰不会出现在空白注射中，因此确定来源相对容易。(3) 流动相中的杂质     ①流动相中因长时间使用而产生有机物或空气中的有机物溶解在流动相中     ②由于长期用新流动相补足现有流动相而不是每天或为每组样品准备新瓶而导致流动相被污染     ③使用受污染的有机溶剂和/或水制备流动相     ④使用受污染的流动相试剂 三、出现“鬼峰”怎么办：       如果早期峰是由于样品引起的，那么它实际上不是鬼峰，而是分析中需要考虑的真实样品峰。光散射是表征这些大聚集峰的一个很好的工具，因为即使没有可用于确定摩尔质量的浓度信号，仍然可以确定大小（RMS 半径）和数密度。如果样品中大颗粒的峰渗入其他样品峰，您可以调整目标样品峰的基线以排除较大颗粒的贡献。如果空白注入也能看到鬼峰，那是真正的鬼峰了。       要消除或防止这些鬼峰：在加载和注入步骤中使用压力变化最小的 HPLC 系统。请注意，加载期间的压力仅显示在前面板上，通常不是 HPLC 数据文件中记录的数据的一部分。如果鬼峰或系统峰在多次空白注射中可重现，您可以使用 ASTRA 的基线减法程序从样品注射中减去空白注射的光散射基线。选择脱落最少的液相色谱柱。逐渐改变流速（不超过 0.1 mL/min2）以防止大的压力变化冲击色谱柱。       恒谱生的鬼峰捕集去除柱（又称鬼峰捕集小柱）可以有效吸附流动相中的杂质，从而缩短了方法验证和杂质分析的时间。鬼峰捕集去除柱主要的特点是能够去除溶剂包括有机溶剂中的杂质。反相色谱梯度分析时，将鬼峰捕集小柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

   在高效液相色谱应用的初期，人们认为它会成为气相色谱的补充方法，然而今天HPLC在药物分析中几乎完全取代了气相色谱。与其他方法相比，在色谱过程中可能会改变流动极性的液体流动相的应用以及根据所测试物质的特性对流动相进行的所有其他修改，在分离过程中具有很大的优势。       任何药物的高效液相色谱 (HPLC) 分析的目的是确认药物的特性并提供定量结果，以及监测疾病治疗的进展。还可以用于通过药物注册前调查期间的生物医学和治疗研究，进一步了解人体的正常和疾病过程。生物体液（尤其是血浆、血清或尿液）中药物和代谢物的分析是高效液相色谱最苛刻但最常见的用途之一。血液、血浆或血清含有十种浓度远高于分析物浓度的大量内源性化合物。分析物浓度通常很低，对于药物而言，内源性化合物有时在结构上与待测药物非常相似。药物与血浆蛋白的结合也可能发生，这会减少所测量的游离化合物的量。       液相色谱技术对于研究小分子和大分子之间的相互作用非常方便，特别是研究药物-蛋白质结合。部分研发人员已经使用固定化人血清白蛋白相来研究苯二氮卓类药物、华法林、布洛芬等药物的相互作用。使用这个阶段作为体内发生的相互作用的模型可以更进一步。通过在流动相中添加药物，可以研究一种药物与人血清白蛋白的相互作用如何受到另一种药物的影响。       液相色谱还广泛用于对药物制剂进行的药物溶出度研究，以评估进入胃时制剂中药物物质的可用性。将制剂搅拌，溶解浴通常含有旨在模拟胃中条件的水性缓冲液，然后在设定的时间段内对水性缓冲液取样并分析药物浓度。药物稳定性研究至关重要，因为需要避免潜在的有毒降解产物。在此类研究中，有必要证明制剂的药物含量没有随时间变化。此外，如果确实发生降解，则有必要识别和量化降解产物。现阶段在很多国家的药典中都是使用高效液相色谱法代替化学和许多仪器方法来控制药物。      深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于高品质色谱耗材配件的研发制造OEM为一体的生产企业，专业研发色谱柱、空柱管总成、保护柱、在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、管路接头等。 我们不断地提高研发制备能力、优化管理体系,以严苛的制程管控、优质的产品服务，为各色谱仪器厂家和耗材供应商提供更优质的产品及更有力的服务支持，与大家携手共创美好未来!  今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       每个实验室的色谱分析工作者都很清楚，HPLC 分析使用液体作为载体，它将注入的样品溶液输送到色谱柱然后输送到检测器。这种载体可以是缓冲液与有机溶剂的水-有机混合物、有机-有机混合物。HPLC 系统的管道和阀门通道非常狭窄，使用未经适当过滤的溶液可能会导致堵塞。通过液相色谱仪运行清洁、无颗粒的 HPLC 级溶剂是一项基本维护方案。 一、对HPLC 系统的影响：       使用过滤流动相以去除颗粒物质能够防止导致色谱柱堵塞，色谱柱不仅很昂贵而且被颗粒物堵塞会导致背压增加或保留时间发生变化；还能最大限度地减少由于 LCMS、UPLC 和 HPLC 等灵敏度高的仪器设备中的精密阀门和管路堵塞而导致的系统停机时间。高级色谱溶剂/超纯水通常通过 0.2 微米过滤器进行预过滤，以满足其在色谱系统中使用的等级。但是，有时您也使用这些溶剂（含或不含化学试剂和添加剂）制备（混合）自己的流动相。当您使用这些试剂级化学品或添加剂制备流动相时，还应该在使用前通过 0.2 微米玻璃或钢过滤器过滤最终混合物，这可以确保您的流动相储液瓶在使用过程中是没有污垢和灰尘等杂质。  二、溶剂过滤器的重要性：       过滤和过滤器（又称溶剂吸滤头、流动相吸滤头等）在 LC 系统中是非常重要的，因为流动相流路中如果存在微粒，LC 系统中的许多组件都容易过早失效。例如，从溶剂瓶中抽出的流动相中的灰尘或其他微粒会导致泵止回阀部分失效或完全失效（泵根本不产生流量）。所以在选择流动相溶剂进行任何分析之前检查流动相溶剂的完全混溶性很重要，同样重要的是检查它们在混合时不会相互反应。否则悬浮颗粒物会导致柱内积聚并产生背压，从而影响流速和损坏泵的组件。最坏的情况还可以是接头处可能会出现流动相泄漏并伴随着分析运行停止的情况发生。还有最明显的故障模式涉及进样样品或仪器组件中的微粒积聚在色谱柱入口处，从而导致色谱柱堵塞。 三、选择溶剂过滤器的选择：       选择合适的过滤器需要了解过滤器/溶剂相容性以及过滤器的化学/物理特性。这些特性包括孔径、孔分布、过滤器厚度、可提取物、疏水/亲水特性、结合特性、热原性、气体和液体流速、爆破强度、高压灭菌性、孔径和标称颗粒保留。选择不正确的过滤器可能会导致可提取材料危及分析结果。对于色谱分析，可萃取材料产生的情况包括样品吸收、共流出和外来峰。在液相色谱的应用中通常选择孔径为 0.45μm的在线过滤器，而对于细菌去除或超高液相色谱应用中则适宜选择 0.2μm 的在线过滤器。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       高效液相色谱是一个需要多个步骤的复杂过程，所有这些步骤都需要无缝地协同工作才能从样品中获得准确且可重复的结果。分析实验室使用同一台仪器设备在一定有限的时间内处理大批量样品和处理不同性质的样品，样品类型或样品制备方法和使用的材料之间的细微差别会影响最终的结果。想要确保过滤装置中的材料与溶剂之间的相容性可以最大限度地减少问题，这就需要一致的过滤。选择具有合适孔径和截留特性的过滤装置有助于确保有效去除微粒，而选择合适尺寸和设计的过滤装置有助于最大限度地减少样品损失。良好的过滤还有助于保护色谱柱，并可能延长进样器和色谱柱的使用寿命。 一、为什么要为HPLC预过滤样品：       处于对仪器性能和数据质量的担忧，通常使用的预防措施之一是将样品预过滤，在将样品加载到仪器之前对其进行过滤，通常使用注射器过滤以确保它不含任何可能损坏进样器或弄脏进样器的颗粒物质柱子。因为颗粒污染会导致悬浮颗粒堵塞色谱柱筛板从而导致压力增加和数据质量下降，这一般可以直接通过更换色谱柱来解决。当然，更换色谱柱需要考虑到成本和维护仪器时的停机时间。二、过滤可保护泵：       从泵的角度来看，理想的溶剂绝对不含颗粒物质的。颗粒会干扰止回阀球和阀座之间的密封界面使得其泄漏或完全失效，从而导致泵流量不一致或无流量。微粒还会加速泵活塞和密封件的磨损导致泄漏和流量不准确。这些问题通常表现为嘈杂或不规则的基线、泵的操作压力的意外波动以及保留时间的变化。 三、过滤可保护色谱柱：       在HPLC中通常使用的填充柱颗粒之间的间隙大小是颗粒本身直径的一小部分，所以液相色谱分析柱的填充床本身也可以充当有效的过滤器起过滤作用。色谱柱末端的筛板有两个作用：它们将颗粒保留在色谱柱内防止流动相携带的颗粒进入并部分阻塞流经颗粒床。颗粒在色谱柱入口侧的玻璃料上的积聚也会导致玻璃料堵塞。四、过滤可延长HPLC仪器组件的使用寿命：       考虑到尽管是极低水平的样品污染也会给仪器带来一些问题，所以在加载之前预过滤样品是一个简单、快速且成本低廉的步骤，可以大大改善HPLC的分析检测结果。样品预过滤延长了昂贵且对质量至关重要的仪器组件（包括泵、进样器和色谱柱）的使用寿命。        过滤器的选择是成功的关键。使用错误的滤膜可能会导致样品污染或其他损坏，从而对结果产生负面影响。不同的流动相需要不同的过滤膜，以确保不需要的物质不会从膜中浸出并进入样品中。不同的样品还需要不同的膜，以确保分析物不会被膜束缚，并在进样前从样品中去除或减少。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

一、色谱柱的堵塞：       任何来自流动相或样品的颗粒物质都会污染色谱柱滤网，一些颗粒还可能迁移到柱子填料中，这将导致柱子背压的增加。这给泵带来了更大的压力，并可能导致柱子沉降，产生空隙从而导致峰的分裂。高效液相色谱柱在使用过程中会遇到许多不同的物质，如缓冲液中的盐或流动相和样品中的杂质，这些物质可能比被分离的分析物有更少或更多的保留。这些不希望出现的干扰，如果被检测器观察到，就会表现为鬼峰、斑点、基线颠倒甚至是负峰。吸收的杂质可能对保留机制产生负面影响（缩短保留）或开始作为新的固定相（增加保留）。       HPLC 色谱柱是 HPLC 系统的关键部件，需要小心处理和保护。HPLC 系统的高效运行取决于流动相和样品是否不含化学杂质或固体悬浮液。频繁更换色谱柱的成本很高，因此您的目标应该是最大限度地延长色谱柱的使用寿命，以便每次都能获得所需的准确度和一致性结果。  二、延长色谱柱寿命的最可靠的解决措施是什么？       当然是使用保护柱! 保护柱会过滤所有的颗粒，积累非特异性的吸附物质，也会延长在微碱性pH值下使用的分析柱的寿命。但需要注意的是，保护柱的颗粒最好与分析柱的颗粒大小相同、材料类型相同、压力规格也应与主柱相匹配。还有就是，什么时候更换保护柱比较好呢？一般建议是当样品的性质发生变化时，当背压增加约10%-15%时，或按计划/时间更换保护柱（例如，每200-500次注射–取决于注射量和样品的纯度）。保护柱对于任何从事色谱工作的分析员来说都很熟悉，保护柱是一种典型的色谱耗材，它安装在主柱前面，通过收集和捕获颗粒或不可逆结合物质来保护主柱免受来自样品、基质或洗脱液的杂质的影响。它延长了更昂贵的主柱的生命周期并且作为更便宜的组件，更换更频繁。  三、液相保护柱的注意事项：1.注意每次操作时都要按照标注方向来使用。2.不使用保护柱会使分析柱或制备柱直接受到污染，从而缩短其实际使用寿命。3.选择保护柱体积可按照色谱柱体积的5~10%即可。4.选择保护柱柱芯的填料最好和色谱柱内的填料相同。       恒谱生保护柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了液相色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间的增加，高效液相色谱柱分离效能下降，柱压增高，其原因主要是由于色谱柱进口段的少量色谱硅胶填料被污染引起的，而色谱柱整个柱床并未被破坏，使用色谱柱保护柱，相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料，起到了保护整个色谱柱的作用。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

 番茄果实的糖分和有机酸含量高度依赖于发育阶段和成熟度。在成熟过程中，糖的总量可以增加到大约4%，其中葡萄糖主要存在于未成熟的绿色水果中，而完全成熟的红色水果通常含有比葡萄糖略多的果糖。随着成熟后的成熟度的逐渐增加，糖含量会有所下降。有机酸的含量也受到发育控制，在番茄的所有阶段中，柠檬酸是主要的有机酸，但未成熟的绿色西红柿可能含有大量的苹果酸，而其在成熟果实中的含量是相对比较低的。　一般上讲，糖是通过还原铜或银离子的能力进行检测分析的。但是这些方法都比较费时费力并且只能粗略区分还原糖和非还原糖中的糖。目前主要采用色谱法、电泳法和酶法 ，也有NMR、FTIR和NIR。而色谱法却是最常使用的糖分析方法：在氨基 (NH2) 柱上用乙腈混合物作为洗脱液进行分离，并使用折射率检测器进行检测。分离基于固定相的NH2基团与糖的羟基的相互作用，糖的羟基越多，它与固定相的相互作用越强，洗脱得越晚。由此，首先需要洗脱的是单糖，然后是二糖和三糖。除了数量之外，分子上羟基的位置对于保留也很重要，可以分离不同的单糖、二糖和三糖。这种方法的优点是样品可以直接上样，不需要衍生步骤，而且氨基柱相对便宜。但是，样品中存在的有机酸和其他化合物可能会与色谱柱牢固甚至不可逆地结合，这可能会影响糖的保留和分离并缩短色谱柱寿命。         恒谱生保护柱可以截留那些导致色谱柱筛板堵塞、柱头塌陷和柱效下降的化学物质和微颗粒物。样品和流动相的过滤可以维护保护柱对化学污染物的吸附容量，能够更长时间的维护柱效，为液相色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。恒谱生保护柱系统简单易用且兼容性极佳，可同时用于HPLC和UHPLC并通过减少更换色谱柱频率来节省金钱和时间，同时大限度地减少系统故障风险和停机时间。        有机酸经常通过反相色谱、离子排阻色谱、酶分析和NMR 光谱法等方法。羧基是一种弱发色团，可以使用紫外检测水果中的主要酸，但紫外检测器不是很敏感而且选择性极低。      使用液相色谱法进行检测分析，通过氨基柱和RI检测对糖进行定量，与SPE柱结合的有机酸用磷酸洗脱，使用C18柱通过高效液相色谱进行分析同时通过210nm处的紫外吸收进行检测。加入SPE柱可显着提高选择性，因为SPE色谱柱仅保留酸性化合物，而酚类等许多UV吸收化合物可被有效去除。也可以用三氟乙酸洗脱有机酸。在样品中添加乳糖作为糖的内标物和作为有机酸的三烯丙酸的内标物。这两种化合物通常不存在于番茄和其他水果中。内标的使用补偿了样品制备和检测器漂移期间的损失，并且除了移液样品之外不需要精确的体积控制，使方法简单且重现性好。           恒谱生色谱柱柱管由不锈钢制成，不锈钢柱内壁多经过抛光，减小管壁效应，提高柱效，柱中填充键合硅胶或聚合物填料。液相色谱柱基于高纯硅胶，采用独特键合技术，具有优异的峰形，灵敏性好。基质金属含量低，对所有类型的分析物均表现完好峰形。机械强度高，稳定性好，质控严格，确保色谱柱性能和色谱柱的使用寿命。有多种尺寸规格可供选择以适应色谱工作者及其使用的不同需求。我们有专业的技术工程师团队为您的需求提供解决方案。        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

液相色谱法是一种广泛应用于制药行业的分析分离技术，制药行业现在几乎完全将 HPLC 用作色谱技术。因为它可以进行高效分离分析，提供所需的精确结果，可用于在生产过程中定量和定性分析成品药及其成分。这是通过混合物中成分的分离、量化和鉴定来实现的，可用于揭示药物的特性并监测疾病治疗的进展。        该技术的工作原理是混合物中的成分被不同程度地吸引到固定相的吸附剂表面，这取决于它们各自的极性和独特的结构特征；对固定相具有更高亲和力的组分将比对流动相具有更高亲和力的组分更慢地沿色谱柱向下迁移。         HPLC的主要优点之一是它能够阐明结构并确定药物制剂中杂质的数量。HPLC特别适用于不易挥发、热不稳定和高分子量的化合物。因此，它可以量化药物的纯度和剂型。制药工业中使用的其他形式的HPLC包括反相、变性和固定化酶反应器 (IMER) HPLC。但是HPLC的缺点之一就是必须先进行校准测试，这会增加成本。高效液相色谱法简单、特异、快速、精密和准确，可成功有效地用于散装和药物剂型的常规质量控制分析。它也可以与其他分析方法结合使用，以进一步阐明混合物的成分。        HPLC-UV使用UV作为一种检测形式。它的好处是不需要通过与传统色谱方法相关的复杂处理和程序，使其更省时且经济。对于成分的检测，二极管阵列和快速扫描检测器可用于峰识别和峰纯度监测。相反，荧光和电化学检测器对合适的分析物更敏感，对许多化合物的选择性也比紫外检测器更高。HPLC检测最灵敏的方法是还原电化学检测，在某些类别的药物研究中也是获得了很好的效果。           在液相色谱分离过种程中，特别是在梯度洗脱过程中容易产生莫名其妙的色谱峰，我们俗称鬼峰，鬼峰的来源有很多，其中主要来源于流动相和管路，如：有机相中污染物，水相中污染物，缓冲盐，流动相瓶和混合过程产生等等。鬼峰捕集小柱主要的特点是能够去除溶剂包括有机溶剂中的杂质。反相色谱梯度分析时，将小柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。         HPLC可以结合的另一种技术是质谱法 (HPLC/MS)。色谱仪通过接口连接到质谱仪，这种分析形式可以检测范围较广泛的样品，包括热不稳定、高极性或具有高分子量的成分。从色谱柱洗脱的组分被引入到专用接口上的质谱仪。用于 HPLC/MS 的两个最常见的接口是电喷雾电离和大气压化学电离接口。         液相色谱法是一种高效有用的分析手段，可用于确定药物配方的成分，使研究人员能够量化配方并发现产品中是否存在任何杂质。HPLC 可以与其他技术相结合，能够进一步提高功能，使其成为制药公司确保药物高质量的理想分析技术。         深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于高品质色谱耗材配件的研发制造OEM为一体的生产企业，专业研发色谱空柱管总成、保护柱、在线过滤器、筛板、溶剂过滤器、管路接头等。我们不断地提高研发制备能力、优化管理体系,以严苛的制程管控、优质的产品服务，为各色谱仪器厂家和耗材供应商提供更优质的产品及更有力的服务支持！        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

 我国的环境问题越来越突出，如何更好地爱护环境和解决环境问题成为社会各界广泛关注的热点。而很多实验室对环境分析使用最多的方法是色谱法，色谱法在监测环境中的污染物以进行鉴定和定量方面发挥着重要作用。环境分析需要稳健、快速、经济高效的分离分析技术，实验室可以采用许多不同的色谱方法进行环境分析和监测，色谱方法可以是平面的或基于柱的，不同的色谱技术适用于不同的研究和分析目的。  一、液相色谱：        HPLC的分离原理是基于分析物在流动相(洗脱液)和固定相(色谱柱的填充材料)之间的分布，液相色谱法使用液体流动相通过柱内的固体固定相。在高效液相色谱法中，流动相使用高压通过色谱柱，混合物的成分在从色谱柱中洗脱时由检测器识别。样品中的分子和填料之间的特定分子间相互作用决定了它们的分析柱上的时间。因此，样品的不同成分会在不同的时间被洗脱从而实现样品成分的分离纯化。检测器在离开色谱柱后识别分析物，信号由数据管理系统转换和记录，然后显示在色谱图中。在通过检测器单元后，流动相可以经过额外的检测器单元、馏分收集单元或废液处理。              一般来说，HPLC系统包含以下模块:溶剂罐、泵、进样阀、色谱柱、检测器单元和数据处理单元。溶剂(洗脱液)由泵以高压和恒速输送通过系统，为了使检测器信号的漂移和噪声尽可能低，来自泵的恒定且无脉冲的流量至关重要。同时杂质会存在于在溶剂中，随着管路流向色谱柱，从而影响最终的实验结果。为了降低杂质对色谱柱的影响，可以在溶剂瓶里安装溶剂吸滤头。在泵的低压进样口侧使用的HPLC溶剂进样口过滤器有助于保护止回阀、进样器和色谱柱免受有害颗粒污染物的破坏。由于圆柱形筛板的表面积较大，因此几乎没有背压或形成空化。过滤器很容易通过反向冲洗或超声进行清洗。    二、对环境监测的干扰：        在分离污染物并量化土壤和地下水中的水平时，环境监测的干扰是一个主要问题。由于样品基质的复杂性和样品的异质性，土壤样品中存在许多干扰。在分离组分时，土壤类型和粒径会产生显着影响。因此，色谱样品制备步骤中的净化过程是方法开发阶段的一个非常重要的方面。可以通过改变分离阶段来优化组分的分离。例如，将固定相改为硅胶可以分离受污染部位的高极性成分，另一个干扰是污染物的混合以及准确隔离它们的能力。              为了延长分析柱和制备柱的寿命和性能，保护它们免受样品和溶剂碎片的污染以及样品基质的干扰。捕获这些不需要的系统组件的最经济高效的方法是使用过滤器或包装好的防护装置。通过在HPLC系统中添加保护罩或过滤器单元，不会影响色谱柱性能。溶剂过滤器是化学实验室常用的装置，主要应用于高效液相色谱流动相过滤、粒子物质分析和微生物污染检测等，是化学实验室常备器材。恒谱生流动相过滤头可以防止溶液中的微小颗粒进入HPLC系统，过滤头由高品质316L不锈钢制成，适用于大部分溶剂。         今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

  液相色谱对于实验室分析员来说是容易上手的仪器了，但就算是经验丰富的分析员都会经常出现错误的操作导致液相色谱仪器发生故障。而这个时候分析员一般就会选择把色谱柱进行反冲这个方法，但恒谱生在这里建议分析员在一般情况下还是不要反冲色谱柱，除非色谱柱有特别说明是可以反冲的。        那么，哪些柱子不能反向冲洗呢？其实有两种，一种是两端柱筛板不一样是不适合的，因为入口的那一端柱筛板的孔径比较大会导致固体颗粒物质的堵塞，所以一旦进行反冲就有可能出现造成填料的流失从而导致分析柱的柱效下降的情况；另一种就是色谱分析柱柱头塌陷或变型是不宜反冲是，因为柱头塌陷或变型了会在柱头上留下缝隙，从而在反冲的时候会导致柱床移动和填料松动。        虽然液相色谱柱不应该随便进行反冲，但如果明确知道来自颗粒物堵塞筛板或柱头污染时，反冲色谱柱是最有效补救措施。但反冲前确认柱子是否能够进行反冲，反冲的时候要注意以下几点：1、在把堵塞在入口那一段端的筛板上的污染物冲出来的同时，柱头的填料可能也会被冲出来造成柱效的降低，甚至色谱柱的报废。2、如果色谱柱出入口筛板孔径不一致的话，反冲色谱柱就有可能造成填料漏出，柱效降低等3、根据自己用的柱子情况分析到底是什么原因堵塞，可以用易溶于污染物的溶剂来清洗。目前较多的是缓冲盐盐析造成，可以用大量的水来冲洗。4、反冲后要把柱子正过来使用，尽量避免长期反复正反使用。        除了反冲，想要延长色谱柱的使用寿命，可以在分析柱前连接液相保护柱。保护柱安装在HPLC系统的进样阀和色谱柱之间，目的用于保护色谱柱和延长色谱柱使用寿命。恒谱生液相制备保护柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护，延长了液相色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。随着使用时间的增加，高效液相色谱柱分离效能下降，柱压增高，其原因主要是由于色谱柱进口段的少量填料被污染引起的，而色谱柱整个柱床并未被破坏，使用色谱柱保护柱，相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料，起到了保护整个UPLC色谱柱的作用。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       溶剂混合时气泡的形成会导致液相色谱分析中的许多问题，这些问题可以通过对流动相进行脱气来避免。当溶剂混合时，空气的溶解度低于同比例的纯溶剂，过量的空气会从溶液中析出/冒泡。脱气是用来描述溶解气体从溶液中出来的术语。这种现象也可能发生在 HPLC 系统中，其中粗糙的表面会产生气泡形成的成核位点。由于产生死体积，气泡还可以改变流动相通过色谱柱的流量。在 HPLC 分析中，通过对流动相脱气，可以在很大程度上避免因气泡形成而产生的问题。 一、HPLC 系统中的除气1.低压混合：低压混合系统更容易形成气泡。用于流动相的溶剂在泵前混合。因此，混合流动相在到达泵之前处于过饱和状态。如果系统经历任何轻微的压力下降或遇到成核位点，则会促进脱气。如果泵送速率存在波动，则可能会发生压降；成核位点可以包括管端和其他非光滑表面。如果流动相脱气并形成气泡，则会导致泵送问题，从而导致泵故障。2.高压混合：在高压混合中，每种溶剂都有自己的泵，并且在泵之后进行混合。因为溶剂是在大气压力下泵送的，所以泵上不可能发生脱气。混合在高压下进行，任何溶解的气体都将保留在溶液中，直到压力下降,这发生在流动相离开色谱分析柱之后。因此，任何脱气都发生在色谱柱之后，但在流动相进入检测器之前。在这种情况下，脱气会导致检测错误，并且色谱图上会显示假峰。 二、流动相脱气       解决除气问题的方法是在使用流动相溶剂之前将其脱气。只需要去除一部分溶解的空气，使其低于流动相中的过饱和水平。两种最广泛使用的流动相脱气方法是：1.氦气吹扫：氦气吹扫可去除高达 80% 的溶解空气。对于有机-水相流动相，用等体积的氦气吹扫就足够了。一段时间后可以降低氦气的供应速率，因为过度吹扫会导致更多挥发性流动相组分的损失。2.真空脱气：将溶剂抽真空，减压除去60%以上的溶解空气。3.超声处理：超声波浴作为一种独立的技术,只能去除高达 30% 的溶解空气。建议将超声处理与其他技术之一结合使用。出于实际目的，建议在低压和高压混合系统中对流动相进行脱气。       煮沸是完全去除溶解空气的最有效技术，但从来不建议这样做，因为挥发性成分会随气体一起损失，而且需要很长时间才能将流动相平衡到所需的环境温度条件。       今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

高效液相色谱系统(HPLC)是指分析化学中的一种技术,用于识别、分离和量化混合物中的每种成分。C8和C18均指色谱柱键合面的烷基链，都用于高效液相色谱系统。一、什么是 C18：       C18柱、C8柱和 C4 柱都是直链烷基硅烷相。C18 是辛基癸基硅烷，含有 18 个与二氧化硅结合的碳。因此C18比 C8（8 个碳）或 C4（4 个碳）具有更多的碳和更长的碳链。由于额外的碳，C18 具有更大的表面积，流动相必须穿过。这在键合相和洗脱物之间提供了更多的相互作用时间。因此，样品洗脱得更慢，分离度更高。C18 色谱柱是反相 HPLC 中最常见的色谱柱形式， 更适合分离长链脂肪酸等化合物。C18色谱柱广泛用于环境科学、制药工业、放射分析实验室和化学分析。它们用于分析化学混合物或放射性标记。C18色谱分析柱因为其键合方式不同、粒径不同和长度不同等多方面，最终体现出不同是选择性。这样，在色谱柱的市场上就出现了数百种具备不同分离选择特性的C18色谱柱。      恒谱生 C18色谱柱采用了粒径高度均一的高纯硅胶基球，具备精准控制的粒径和孔道结构，同时先进成熟的表面键合和完全封端工艺使硅羟基活性降到最低，能够适用于分离具有不同疏水性的分析物，是用途广泛的通用型硅胶色谱柱。具有色谱性能优异、选择性好、重现性佳和应用范围广等特性。  二、什么是 C8：      C8色谱柱是反相HPLC中使用的色谱柱之一，键合硅胶上的烷烃是八个碳。它含有与硅胶共价键合的烷基，形成疏水硅胶固定相，在极性较弱的一侧。C8具有辛基链（也称为辛基），它的保留时间更短，峰更尖锐，C8色谱柱类型更适合小型有机化合物。  三、HPLC中C8和C18色谱柱的主要区别  ：1.C18有18个碳原子，而C8只有8个碳原。2.C18的碳链较长，含有更长的十八烷基碳链,而C8的碳链较短。3.C18具有较高的保留时间，而C8具有较短的保留时间。4.C18具有较高的疏水性,但C8具有较低的疏水性。5.C8柱是以辛基 碳链键合的硅胶作为固定相，C18分析柱是以十八烷基碳链(C18)键合的硅胶。  四、HPLC中C8和C18色谱柱的相似之处： 1.HPLC中的C8和C18柱是两种类型的直链烷基，用于在HPLC的反相色谱中对二氧化硅进行表面改性。  2.反相色谱的流动相是水性和中等极性的。  3.C18色谱柱和C8色谱柱的孔径 相似和两列都是封端的。    今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

一、HPLC色谱柱的安装：      首先检查色谱柱与仪器的连接和管道是否匹配。使用色谱柱测试程序中建议的过滤和脱气流动相冲洗您的 HPLC 泵和管路。确保系统中没有气泡。将流速设置为0.1mL/min 并连接到色谱柱入口，确保流速沿色谱柱上箭头指示的方向。拧紧进入色谱柱的末端接头，将流速增加到 1mL/min（仅适用于4.6mm ID 色谱柱）持续5分钟。在连接到流通池之前，停止流动并擦拭色谱柱的出口端以去除其他任何的颗粒。将色谱柱出口连接到流通池，以1 mL/min 的速度将大约10个色谱柱体积通过系统（仅适用于 4.6 mm ID 色谱柱），同时观察背压。稳定的背压表明流量恒定，而出现波动可能表明系统中有空气，大幅波动可能会冲击和损坏色谱柱。当压力稳定在规定的范围内时，色谱柱就可以使用了。       同时在更换溶剂时重新平衡系统时，切勿将一种溶剂换成另一种不混溶的溶剂，无需通过与两者混溶的中间溶剂，否则会损坏色谱分析柱的性能。如果缓冲液/盐不溶于第二种溶剂，切勿换成（或换出）缓冲液/盐溶液。这也是会损坏色谱柱的性能的。对于更复杂的样品和延长液相色谱柱的使用寿命，建议在色谱柱前安装保护柱。 二、多久检查一次色谱柱的性能或质量：       对于需要多久检查一次色谱柱的性能，没有一般的经验法则，这取决于使用情况和应用。建议在新色谱柱上运行测试样品并将其作为参考。随着时间的推移，将您自己的测试色谱图与此原始色谱图进行比较可以帮助您评估色谱柱是否失去了柱效，或者是否有其他影响性能的变化。可以通过定量分析效率、选择性、分离度和压力等参数了解色谱柱的比较性能。 三、色谱柱日常使用维护保养: 1.选择合适的液相保护柱，免受非挥发性材料的损坏和污染，保护柱填料的粒径应尽可能与色谱柱填料的粒径相同。2.留意色谱柱的pH范围。3.避免猛烈撞击或掉落色谱柱，因为物理冲击会在色谱柱中产生空隙和通道，从而导致峰拖尾和柱效损失。4.确保色谱柱末端接头、管螺母和套圈兼容。连接不兼容的接头会导致泄漏、增加死体积和损坏色谱柱螺纹。5.如果色谱柱上刻有箭头，请安装色谱柱，使流向与箭头一致。大多数色谱柱都有一个优选的流动方向，旨在避免色谱柱出现问题和故障。    今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       相信大家在使用液相色谱的时候，都有对液相色谱仪中的保护柱和在线过滤器都产生过疑问，因为二者在外型上大同小异不好区分，在想会不会是同一种东西呢？它们到底有什么区别呢？恒谱生今天跟大家简单聊聊。        液相保护柱和在线过滤器都是安装在色谱系统中的前端位置，用于去除色谱系统中杂质和微粒，从而延长分析色谱柱的寿命。虽然保护柱和在线过滤器都可以起到防止固体颗粒物质堵塞色谱柱筛板的作用，但是两者还是有不同的。一、在线过滤器：       在线过滤器安装在泵的出口和进样阀之间，是用来过滤流动相中的杂质和固体颗粒，保护液相系统的正常运行的一种过滤型色谱耗材。在液相色谱系统中使用在线过滤器可以很大程度上地减少泵、混合器和管路在流动相中输送过程中所产生的堵塞、损坏仪器等情况出现。 在线过滤器的注意事项：1.需要选择合适的孔径，因为孔径过大或过小都对分离过程起到一定的影响。2.选择合适材料的过滤器。3. 滤膜（又称过滤片或筛板）可以清洗重复使用，建议每年更换一次。 二、保护柱：       保护柱是液相色谱分析中一种重要的色谱耗材，位于进样器与分析柱之间的位置。在液相色谱系统中使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度。液相保护柱有两种最主要的种类，分别是直连式和一体式。直连式保护柱构造是能够立即安裝在分析色谱柱上，使用起来很方便；一体式保护柱是必须根据连接头和连接管道，这种保护柱的死体积较小。 保护柱的注意事项：1.选择保护柱柱芯的填料最好和色谱柱内的填料相同。2.选择保护柱体积可按照色谱柱体积的5~10%即可。3.使用时间久了及时更换保护柱。4.注意每次操作时都要按照标注方向来使用。 三、保护柱和在线过滤器的区别和使用：       在线过滤器里面有一个筛板，能够过滤掉流动相中的杂质和颗粒。需要定期清洗的时候，扭开卡套取下筛板，然后分别用水和甲醇各超声清洗筛板十分钟左右即可。       保护柱的卡套中的柱芯含有填料，一般情况只需更换柱芯就可以继续正常使用了不需要更换整个保护柱。这些填料的存在可以拦截样品中的一些强保留、强酸性和强碱性物质，防止它们对色谱柱内填料的污染和损坏。      当色谱分析柱价格比较昂贵时，这就能大大体现保护柱的价值；当分析柱的价格相对便宜，推荐使用在线过滤器会比较适合。保护柱和在线过滤器的安装都是为了延长分析色谱柱的寿命和降低仪器维护的成本。所以当色谱系统出现压力过大、鬼峰、分离纯化等问题时，建议直接更换保护柱或者在线过滤器的筛板。      今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

       色谱法是一种分离混合物中成分的分析技术，色谱柱是色谱中仪器系统中一个重要组成部分。使用色谱柱的五种色谱方法有：气相色谱(GC)、液相色谱(LC)、离子交换色谱 (IEC)、尺寸排阻色谱 (SEC) 和手性色谱。 一、气相色谱柱：       气相色谱（GC）是一种高效的分析检测技术，用于分离和测定样品混合物的化学成分，这些化学成分通常是有机分子或气体。气相色谱主要检测一些具有挥发性且具有热稳定性的样品。GC是一种在大多数行业中广泛使用的技术，包括生物医药、环境监测、食品分析和化学等领域。在气相色谱中，流动相是气体。气相色谱柱的长度通常在几十到几百米之间，高效液相的进样器为尖头进样针。气液色谱法 (GLC)：液体固定相键合或吸附在开放管状柱的表面，或柱内填充的固体载体上。固定相的厚度介于 0.1 和 8 µm 之间。层越厚，分析物的挥发性越高。 二、液相色谱柱：       高效液相色谱（HPLC）是液相色谱的一种液体流动相，液相色谱柱通常为几十到几百毫米，高效液相的进样器为平头进样针，气相色谱法的基本原理同样适用于液相色谱法。液相色谱柱有三种基本类型：液-液、液-固和离子交换。液-液色谱柱将液体固定相键合或吸附在色谱分析柱表面或填充材料上。液-液色谱柱的稳定性有限且使用不便，流动相和固定相的两种不同液体之间发生分配。在液固色谱柱中，固定相是固体，分析物吸附到固定相上，从而分离混合物的成分。         如果分析样品的批量比较多会使杂质容易残留并堵塞在色谱分析柱影响最终分析结果，为了防止这种情况，样品需要经过过滤器过滤后再注入色谱柱。但是过滤器有时不能完全的过滤有害物质，如果要完全除去有害成分的话过程会比较繁琐。所以，即使样品经过过滤器过滤后再注入色谱柱，也有可能会因残留的有害成分而导致色谱柱损坏。因此，可以在色谱柱之前安装一个保护柱以延长色谱柱的寿命，保证分析结果的重现性。恒谱生高效液相色谱保护柱耐腐蚀，耐低温，保护柱经设计优化，在各种分离条件下对色谱的影响都很低。其低死体积设计可大幅降低峰扩散和峰拖尾，从而保持分离度和分析效率。高效液相色谱保护柱对色谱柱具有保护作用，能有效的保护和延长分析柱的使用寿命。  三、液相色谱的常见问题：       对于极性更强的分析物，尤其是痕量分析物，玻璃衬管和色谱柱上的溶液杂质以及系统中的污垢堆积会导致拖鬼峰、尾峰、不可逆吸附或催化分解。那么，什么是鬼峰呢？鬼峰就是如果化合物出现的保留时间少于预期的保留时间,特别是在梯度洗脱过程中容易产生莫名其妙的色谱峰，则称为“鬼峰”。恒谱生鬼峰捕集去除柱可以有效吸附流动相中的杂质，可以有效捕集流动相中的杂质，清除鬼峰，从而大大缩短了方法验证和微量、痕量物质分析的时间。出现最多问题的地方就是进样口，因为样品从注入、蒸发并转移到  色谱柱中是要从进样口开始的。所以想要维持仪器无故障并长期正常使用，定期对进样口进行清洗维护是非常重要的。         今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！

  液相色谱是世界各地实验室使用的流行纯化技术。如果系统设置和操作正确，它可以立即从混合物中分离出所需的化合物。学习如何使用和制备缓冲液和溶剂是能提高系统性能的重要技巧之一。准确制备和正确选择缓冲液对于在液相色谱中获得可重复的结果至关重要。  一、了解您的化合物  如果您正在寻找混合物中的特定化合物，您应该使用最能将您的分析物与其他分析物分开的缓冲液/溶剂组合。例如，了解极性和溶解度（极性或非极性）、电离、您正在寻找的紫外吸光度将有助于指导您使用特定的色谱柱和溶剂组。   二、纯度  使用较低等级且成本较低的试剂来制作缓冲液以节省一些钱是很诱人的，但从长远来看，它最终会变得更加昂贵。与含有稀少或不含杂质的 HPLC 级试剂相比，纯度较低的试剂会导致不需要的峰和嘈杂的基线。它们还会对您的系统造成严重破坏，造成阻塞，从而导致系统故障和更昂贵的维护费用。所有试剂和溶剂，包括您使用的水，都应该是高质量的 HPLC 级，以减少缓冲液中不需要的微粒。高级试剂的成本可能比低级试剂略高，但纯度的差异是值得的。HPLC 级试剂还有助于获得更一致的结果并保持系统平稳运行。  即使是使用高纯度实验级别的溶剂，也需要在进入色谱系统前进行过滤，采用恒谱生溶剂过滤器可以有效过滤化学污染等杂质进入系统，通用于流动相或输液泵，配套用于外径1/8英寸或1/16英寸的管子，放置于流动相溶剂瓶中，过滤杂质。过滤后，溶剂应储存在有盖的容器中，以防止被灰尘或其他不需要的材料污染。   四、避免气泡  在与您的系统一起使用之前对缓冲液进行脱气或真空过滤可以大限度地减少流动相中的空气和微粒。如果液相色谱系统中发生流动相脱气，主要会影响泵和检测器。为了解决这个问题，在将新制备的流动相泵入 HPLC 系统之前进行脱气，连同在线脱气器，应彻底脱气以去除所有溶解的气体。最有效的脱气形式是用氦气或其他低溶解度气体鼓泡。如果该方法可用，建议在整个分析过程中以非常低的水平持续对流动相进行脱气。  五、定期检查  细菌几乎可以在任何溶液中适应和生长，甚至是有机溶剂，具体取决于浓度。为防止细菌生长堵塞色谱柱筛板，每次制备新的缓冲液批次时更换缓冲液容器，检查缓冲液瓶/袋是否有细菌生长迹象。摇晃或搅拌时出现浑浊的溶液应丢弃。使用抑菌剂（例如 0.02% 叠氮化钠）处理会延长溶液的储存时间，尽管这些试剂可能会影响您的色谱图。  六、新鲜配置  恒谱生建议稀释缓冲液的有效期为一周。这种做法可确保缓冲液的 pH 值不受长期储存的影响，并且不会出现微生物生长。pH 值变化和微生物生长都会影响您的色谱运行并导致运行之间的不一致。虽然您可以添加稳定剂，例如焦亚硫酸钠，但这些试剂会影响光学和色谱结果。  液相色谱法可能是一项具有挑战性的技术。遵循上述关于如何准备和使用缓冲液进行纯化的提示，将有助于使每次运行的一致性和可重复性。

        质谱 (MS) 使研究人员能够研究许多特性，例如样品的分子量、结构、特性、数量和纯度。当与液相色谱技术相结合能成为一种强大的分析工具，能够从复杂的生物混合物（如牛奶、血清和全脂）中提取有关一系列化合物的有意义的数据，包括药物代谢物、肽和蛋白质-细胞裂解物。        一、液相色谱与质谱        在将样品引入 MS 仪器之前，通常通过过滤掉颗粒物、浓缩分析物、脱盐和通常分离出可能导致背景离子或抑制电离的化合物来制备样品。大多数情况下，许多或所有这些步骤都是由 HPLC、UPLC 系统完成的。样品制备需要对样品进行预处理。比如流动相进系统前，通过恒谱生溶剂过滤器过滤颗粒污染物。         HPLC、UPLC 这些系统可以在高压/低流速下运行，并且允许用户通过直接连接、在线、与MS 通过电离装置。如果是超高压液相色谱系统，系统内部压力非常高，对于色谱耗材也需要uhplc专用。2.1#超高压UPLC保护柱预柱捕获样品中增加背压和影响基线噪音的污染物，延长色谱柱的使用寿命。          电离装置的早期化身要求样品在真空下电离，严重限制了可以分析的化合物的选择。较新的技术，如电喷雾电离 (ESI)，现在可以在大气压下进行电离，从而大大扩展了曲目。一旦离子化，分析物（主要由水或质子或电子的添加或损失产生的离子）将与中性（不带电的）分子进行机械和静电分离。根据仪器的配置，允许所有或选定的子集通过检测器，该检测器绘制离子相对于信号强度（表示丰度）的 m/z 图表。        二、串联质谱        从单级 MS 获得的 m/z 信息非常有价值，有时可用于识别小分子。但对于更大、更复杂的分子，通常需要互补的结构信息。通过 LC/MS 分析复杂的蛋白质混合物通常从胰蛋白酶消化过夜以产生肽开始，然后通过收集串联 MS 数据在肽水平鉴定蛋白质。         在串联 MS 中，样品依次通过仪器的不同阶段，每个阶段都会对其进行选择或破碎等过程。例如，在三重四极杆 MS 中，第yi阶段选择特定的 m/z 范围，丢弃其余部分。然后，这些剩余的离子通过在第二阶段与中性分子碰撞而碎裂。新破碎的离子然后进入第三阶段，根据实验，扫描产物离子的光谱或选择性地监测一些离子。然后将这些光谱与实际或理论光谱数据库进行比较，以确定它们的身份，使研究人员能够将它们来自的母分子拼凑在一起。        三、LC/MS 的其他用途        LC/MS 的强大功能也经常用于识别蛋白质修饰，例如磷酸化和二硫键桥接。在 LC 提供的分离和串联 MS 丢弃非分析物离子的能力之间，LC/MS 是许多不同应用的选择。