要回答这个问题,首先来了解一下什么叫流动相。简而言之,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。流动相可以是缓冲液与有机溶剂结合的水-有机混合物,也可以是有机-有机混合物。
开始使用流动相溶剂进 行色谱分析前,一定要检查溶剂是否完全混溶,这是非常重要的,其次是要关注它们在混合时是否会相互反应,如果发生化学反应,会影响流动相的使用和色谱的正确分析。
有些色谱工作者可能会说,那我采用HPLC级溶剂可以直接使用吗?恒谱生建议,即使是HPLC级溶剂也要在使用前进行过滤!为什么呢?主要是有些悬浮颗粒或杂质是细微米的,人的肉眼是无法观测到的,我们不能判断一个清澈的溶剂就一定“完全干净”。就好比我们使用自来水,也看着很干净是不是?但是其实里面包含很多其它的不溶物质等。如果你在进行色谱分析时不将悬浮颗粒和杂质去除,会影响HPLC系统的性能。不仅如此,因为色谱柱是多孔结构,颗粒物很可能将色谱柱堵塞,背压升高,影响流速甚至损坏泵,因为一时的图方便而造成了色谱柱损坏就得不偿失了。
说完了过滤,现在又来说脱气。我们都知道液相色谱系统里是超高压运作的,若流动相中所含的空气不除去,则流动相通过色谱柱时其中的气泡受到压力而压缩,流出柱子进入检测器时因常压而将气泡释放出来,会造成检测器噪声增大,使基线不稳,最终导致仪器不能正常工作,特别是梯度洗脱时特别明显。
如何很大程度地减少此类情况的发生呢?恒谱生建议您:
流动相使用前一定要用过滤器过滤,这是很重要的!恒谱生溶剂入口过滤头可有效滤除流动相中的固体颗粒杂质;未经过滤的溶剂或溶剂瓶中生长的微生物都会降低溶剂入口过滤头的寿命和泵的性能,因此,需要定期清洗或更换溶剂入口滤头。溶剂入口过滤头由高品质316L不锈钢制成,耐腐蚀,适用于大部分溶剂。滤头顶端阶梯式连接出口可分别于1.5mm,2.2mm,3.5mm内径的管路连接。款式型号多种,可供选择。
使用前新鲜准备流动相。应每次分析前新调配流动相,不要让流动相过夜或者长时间存放。这样很容易滋养微生物等。
在色谱柱前添加使用保护柱进行过滤,避免色谱柱堵塞。恒谱生液相色谱保护柱能将那些强保留的、不可吸附的化合物截留下来。样品和流动相的过滤可以维护保护柱对化学污染物的吸附容量,能够更长时间的维护柱效,保护色谱柱免受污染物的危害,在额定背压值内和在高流速中仍保持稳定、无渗漏。
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