如何恢复HPLC色谱柱性能？

恒谱生

2022/02/26 17:54

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大家都知道HPLC色谱柱的寿命是有限的，在使用过程中随着时间的推移，其性能开始下降。你可以通过峰形和峰形之间的分离，柱背压的不规律增加以及重影峰的出现来判断HPLC色谱柱的性能出现了下降。色谱柱是昂贵的色谱耗材，平常使用完毕后需要保养。如果色谱柱真的发生了性能下降，有什么方法可以恢复呢?

首先，如果色谱柱由于过载或使用不兼容的流动相而结垢，是可以恢复的，但已经损坏的色谱柱或已经过使用寿命的色谱柱无法恢复，需要更换。

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色谱柱还原程序如下，供大家参考：

反相柱

反相分离是大多数HPLC分离中使用的主要操作模式。填料主要由C18，C4，CN，NH2和苯基固定相组成。建议以水-乙腈-异丙醇-庚烷-异丙醇-乙腈-流动相的顺序用10至20倍体积的溶剂洗脱

正相柱（氨基，二醇，硝基，氨基固定相）

用20倍体积的溶剂冲洗，按照庚烷-异丙醇-乙腈-

水-异丙醇-庚烷的顺序。

GPC / GFC色谱柱

用5倍体积且PH值为3的0.1%磷酸盐缓冲液冲洗。如果使用了保留力强的蛋白质，则使用从水到乙腈再到水的60分钟梯度液冲洗。

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色谱柱在使用前都要对其性能进行考察，使用期间或放置一段时间后也要重新检查，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。柱性能指标包括在一定实验条件下（样品、流动相、流速、温度）下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性，或分离度。进行柱效比较时，还要注意柱外效应是否有变化。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是颇佳条件），只有这样，测得的结果才有可比性。

恒谱生色谱柱柱管由不锈钢制成，不锈钢柱内壁多经过抛光，减小管壁效应，提高柱效，柱中填充键合硅胶或聚合物填料。色谱柱基于高纯硅胶，采用独特键合技术，具有优异的峰形，灵敏性好。基质金属含量低，对所有类型的分析物均表现完好峰形。机械强度高，稳定性好，质控严格，确保色谱柱性能和色谱柱的使用寿命。有多种尺寸规格可供选择以适应色谱工作者及其使用的不同需求。我们有专业的技术工程师团队为您的需求提供解决方案，欢迎前来咨询了解！

液相色谱柱-DSC_7740