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Unchained Labs:Stunner准确获取腺病毒滴度及相关表征

2023-03-06 22:51

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资料摘要:

腺病毒载体 (AdV) 的功能极其多样——能够用于病毒疫苗接种、递送治疗基因,并以溶瘤载体的形式直接抗击癌症。由于AdV滴度测量方法可能耗时数小时甚至数日,而且在纯化过程中常见空衣壳等杂质,因此快速获取衣壳滴度和AdV空壳率至关重要。 Stunner是一款独特的分析系统,它整合了高效UV/Vis分光光谱法与静态和动态光散射 (SLS和DLS) 来测定低至1E9 cp/mL的滴度、获取空心率以及粒径和聚集情况。无需进行任何的样品准备、稀释、标准曲线、标记或染色处理,Stunner即可读取样品信息。此设备不具有血清特异性,只需要使用2 μL的样品就可在1小时内读取最多96份样品。为获得更高通量,该系统全自动化运行并可配备21 CFR Part 11软件工具。
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Unchained Labs Stunner 高通量浓度粒度分析仪

型号: Stunner

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品牌: Unchained Labs

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脂质纳米颗粒(LNP)正在改变医学的面貌——从对传染病的快速响应,到体内基因编辑和靶向蛋白替代疗法,LNP正在引领潮流。尽管LNP在临床上已经取得了成功,但其开发却仍然面临诸多挑战,其中一个挑战是发现阶段生产制备的样品必须与商业化生产阶段所制备的产品保持一致。

每个处理过脂质纳米颗粒 (LNP) 的人都曾使用荧光染料法来定确定其配方和生产过程中RNA的含量和包封效率 (EE%)。而且几乎每个人都对这些检测感到厌倦;昂贵的试剂、两组不同的校准曲线以及每个孔中要添加的许多试剂,使这些检测既耗时又繁琐。

增强膜蛋白的稳定性可以极大地帮助处理这些样品,但仅仅表征它们的稳定性就是一个重大挑战。现有的方法,如差示扫描量热法和核磁共振 (NMR),通常需要大量的蛋白质,并且难以实现更高的通量。由于难以纯化大量稳定的膜蛋白,这些检测方法难以进行。检测某些膜蛋白 (如G蛋白偶联受体,GPCRs) 在其去污剂溶解状态下的生物活性也非常具有挑战性。这些方法中的每一种都只提供单一的视角,导致对膜蛋白稳定性的理解不完整。 Uncle是原创的蛋白质稳定性一体化平台,使用三种检测方法:全光谱荧光、静态光散射 (SLS) 和动态光散射 (DLS),从9 µL的样品中全面分析蛋白质稳定性。

VSVG是假型化慢病毒 (LV) 最常用的包膜蛋白,因为它具有广泛的细胞靶向性和高转染效率。虽然非常适用于选定细胞的离体修饰,但这些特性使得VSVG假型化LV非常容易导致脱靶效应,而不适合在体治疗。 通过用一种更加特异性细胞靶向的包膜蛋白替代VSVG来对LV进行假型化修饰,可以提高LV的递送效率,减少脱靶效应。因此,针对疾病特异性细胞,人们对制造非VSVG假型化LV的兴趣越来越大。研发人员进行LV假型化改造时面临着较多的挑战,其中之一便是无法轻松地检查正确的包膜蛋白在整个LV生产中以及不同批次中是否能始终表达。

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