TG1感受态细胞

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产品描述：

产品名称：TG1感受态细胞

描述: TG1菌株来源于大肠杆菌K-12，主要用于噬菌体展示（Phage Display），也可进行M13噬菌体相关的实验，也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变，提取的质粒中核酸酶含量较高，需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。
基因型：
supE thi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F′ traD36 proAB lacIqZ _M15]
菌株抗性：
对氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、博莱霉素、庆大霉素、氯霉素和四环素敏感。

使用方法: 质粒转化步骤：（以氨苄青霉素抗性的 pUC19 质粒为例） 1、将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入 1-5μl 含有 1-100ng 的质粒 DNA 到细胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀。 2、冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动。 3、42℃热击 60 秒钟，不要晃动。 4、冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动。 5、加入 500μl 的室温的 SOC 或 LB 培养基。 6、置于 37℃摇床中，150-200rpm，复苏培养 60 分钟。 7、取 50-100μl 菌液涂布在含有氨苄青霉素抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板 37℃培养 12-24 小时。 平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块， 取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。

储存/保存方法: -70℃保存，避免反复冻融

注意事项: 1、化冻的感受态细胞不能长时间放置，影响转化效率；
2、感受态细胞避免反复冻融；
3、操作过程要轻柔，避免用移液枪反复吹打；
4、整个转化过程应注意无菌操作，避免污染。

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