XL Site-directed Mutagenesis Kit

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产品描述：

产品名称：XL Site-directed Mutagenesis Kit

描述: 本试剂盒采用反向PCR（Inverse PCR）技术，对含有目标基因的双链环状质粒进行扩增，直接导入突变序列，从而实现单个或多个邻近碱基的突变（mutation）、缺失（deletion）、或插入（insertion）。该技术的原理如图所示。首先以甲基化的质粒DNA为模板，使用人工合成含有目的突变碱基的引物进行扩增反应，然后用DpnI限制性内切酶消化不含突变的质粒模板，再进行转化和筛选。
    本试剂盒采用保真性能和扩增效率俱佳的 XL Enzyme，能快速扩增15 kb以下的质粒DNA（15-30 s/kb），最大限度地保持扩增质粒的保真性，大大缩短反应时间，是Site-directed Mutagenesis Kit（abs60097）的升级产品。该方法操作简单快捷，突变阳性率高，严格按说明书操作，6个以下连续碱基的突变率可达90%以上，最多可实现21个连续碱基的插入或删除。
    对于非甲基化的质粒（例如从大肠杆菌JM110或SCS110菌株中提取的质粒），可通过转化dam＋ 的大肠杆菌菌株（如DH5α、TOP10、JM109、XL1-Blue等），再抽提获得甲基化的质粒作为PCR反应模板。
    本试剂盒提供一个4.5 kb、含有突变的lacZ基因的对照质粒（Control Plasmid）。质粒转化大肠杆菌后在含Amp、IPTG和X-gal的琼脂平板上呈白色菌落；采用试剂盒提供的Control Primers成功进行突变反应后，菌落呈现蓝色，可据此检测突变效率。
产品特点：
1、高效快速：采用极高保真性能和极高扩增效率的DNA聚合酶，10 kb质粒突变反应最多只需2.5小时。2、操作简单：采用一步PCR法，不需要磷酸化引物，不需要连接反应，不需要特殊菌株。
3、阳性率高：6个以下连续碱基的突变率可达90%以上。
4、质控对照：提供Control Plasmid和Control Primers，通过X-gal琼脂平板呈色变化监控反应各组分的性能。
5、提供针对高GC模板的High-GC Additive
产品信息：

储存/保存方法: -20℃恒温保存，保质期12个月。

产品用途: 15 kb以下质粒的单个或多个邻近碱基的置换(substitution)、缺失(deletion)、或插入(insertion)

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