BJ5183-AD-1感受态细胞

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产品描述：

产品名称：BJ5183-AD-1感受态细胞

描述: BJ5183-AD-1菌株携带的pAdEasy-1质粒包含了大部分人腺病毒5型的基因组序列（E1/E3基因缺失），表达可供pAdEasy-1骨架质粒和pAdEasy穿梭质粒进行同源重组的所有组分，产生重组腺病毒质粒。pAdEasy-1为33.5kb，具有氨苄青霉素抗性，一旦与穿梭载体重组，其抗性消失。卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV质粒检测感受态细胞的转化效率大于10³ cfu/μg。
基因型：
endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR ) [pAdEasy-1 (AmpR )] 
菌株抗性：
对卡那霉素敏感，有链霉素和氨苄青霉素抗性

使用方法: 质粒转化步骤： 1、将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入目的质粒（含有目的基因并线性化）到细 胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀； 2、冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动； 3、42℃热击 60 秒钟，不要晃动； 4、冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动； 5、加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基； 6、置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟； 7、取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃培养 12-16 小时。 （平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl 重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平 板上的液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。）

储存/保存方法: -70℃保存，避免反复冻融

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