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广州博鹭腾生物科技有限公司

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公司动态

【中标喜讯】“虎”力全开,首季开门红!

近日,广州博鹭腾多模式动物活体成像系统在“西安交通大学医学院第一附属医院”的竞标中,凭借自主研发设备的卓越性能和优质服务体系顺利中标!衷心感谢西安交通大学医学院第一附属医院对国产自主研发设备的信任,以及对博鹭腾产品质量及研发实力的认可!博鹭腾将继续开拓创新,为中国的科研事业贡献自己的力量!西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学第一附属医院(原西安医科大学第一附属医院)我国西北地区规模最大的集医疗、教学、科研、康复、预防保健为一体的大型综合性三级甲等医院,医院于1956年建院。博鹭腾广州博鹭腾作为国产自主研发高端生命科学仪器制造商,坐落于广州高新技术产业示范基地-广州科学城,公司拥有一支由多名博士、硕士研究生组成的高水平研发管理团队,为广大科研工作者提供一站式完整解决方案。

企业动态

2022.04.18

新品!博鹭腾小动物活体三维成像系统在广州发布!

2022年3月26日,“第一届华南动物活体成像应用研讨会暨小动物活体三维成像系统发布会”在广州隆重举办。此次会议由广东省医药行业协会和广东省实验动物学会指导,广州博鹭腾生物科技有限公司主办,广州云星科学仪器有限公司协办。大会开幕大会开始,广东省食品医药联合党委书记张俊修先生首先上台致开幕辞。张书记对此次大会的举办表示了祝贺,也肯定了博鹭腾在国产动物活体仪器方面取得的重大成果。与此同时,张书记提出了几点期望与建议:一是响应国家号召,加强对科学技术道路的坚持;二是在中医方面,运用新的思维改进现有的研究成果;三是在西医方面,希望活体成像技术的进步能够为器官移植提供新思路和新方法。张俊修  先生广东省食品医药联合党委书记广东省实验动物秘书长朱才毅研究员对大会的成功举办表示热烈的祝贺,他指出小动物活体三维成像产品的发布,将有利于推动实验动物行业的进一步发展,特别能有效减少实验动物的使用量,符合动物伦理,体现了民族科技企业的强烈社会责任感。他希望博鹭腾能够按照伟中省长提出的,加快构建基础研究+技术攻关+加成果产业+科技金融+人才支撑全过程创新生态链,强化企业创新主体责任,探索产学研相结合的路子,推出更多更好的新产品,为建设更高水平的科技自立自强贡献力量和智慧。朱才毅  研究员广东省实验动物学会秘书长最后,广州博鹭腾生物科技有限公司总经理罗文波博士致辞。罗文波总经理强调了生命科学仪器在科学进步中的重要性,尤其是高端的科学仪器对重要行业的发展有着不可或缺的推动作用。不论是当前的发展趋势还是国家出台的相关政策,都对国产科学仪器寄予了厚望。博鹭腾正是要迎难而上,开拓创新,创国产生命科学仪器先锋,为生命科学乃至世界的科技进步贡献自己的力量。 罗文波  博士广州博鹭腾生物科技有限公司总经理学术分享在各位嘉宾精彩致辞结束后,迎来了“干货满满”的应用研讨会。本次会议采用线下分享和线上直播相结合的方式,邀请了来自广州医科大学、汕头市中心医院、湖南斯莱克景达实验动物有限公司、新疆医科大学、中山大学附属第五医院的五位专家,就活体成像技术在纤维化疾病研究中的应用、光学分子影像技术在乳腺外科手术导航中的应用、常见肿瘤动物模型构建以及应用、基于近红外光辅助的活体成像与光活化治疗研究、近红外荧光成像用于食管癌术中导航的研究进行了深入的分享。专家们精彩绝伦的讲座,为本次研讨会注入了新的力量,使现场嘉宾和线上观众都收获颇多,对活体成像也有了更加深入的了解和认识。苏金  教授广州医科大学呼吸疾病国家重点实验室课题组长、博士生导师《活体成像技术在纤维化疾病研究中的应用》邱斯奇  副主任医师汕头市中心医院科研大数据中心副主任、硕士生导师《光学分子影像技术在乳腺外科手术导航中的应用》聂晶  博士湖南斯莱克景达实验动物有限公司研发部总监《常见肿瘤动物模型构建以及应用》努尔尼沙·阿力甫  副教授新疆医科大学医学工程技术学院副院长、博士生导师《基于近红外光辅助的活体成像与光活化治疗研究》李丹  副研究员中山大学附属第五医院广东省生物医学影像重点实验室副主任、博士生导师《近红外荧光成像用于食管癌术中导航的研究》新品发布仪式最后是本次会议最为激动人心的新品发布仪式。随着倒计时的结束,幕布落下,Aniview Kirin现身。从此刻起, AniView Kirin小动物活体三维成像系统将正式加入博鹭腾AniView活体成像家族。来自博鹭腾的市场部经理魏宇清先生对新产品进行了详细介绍,魏经理将AniView Kirin的特点归纳为六点,灵敏、精准、形象、出色、温暖、安全。这几大特点不仅体现在优异的硬件参数上,同样也体现在智能的软件算法、人性化的设计以及优秀的使用体验等方面。魏宇清  先生广州博鹭腾生物科技有限公司市场部经理这是国产唯一集光谱分离算法与三维立体成像于一体的高端活体成像系统,打破了国外产品的技术垄断,从此高端活体成像系统领域拥有了属于中国人自己的声音。AniView Kirin小动物活体三维成像系统博鹭腾博鹭腾作为一家集生命科学仪器设备的研发、生产、服务于一体的国家高新技术企业,目前已开发并上市了多款具有自主知识产权的产品,形成了分子影像、蛋白凝胶预制及印迹处理系统、发光检测、活体成像四个系列,用户包括清华大学、中山大学、西北农林科技大学等上百家高校及科研单位。

媒体关注

2022.03.28

省动监所朱才毅所长赴博鹭腾调研

3月21日下午,广东省实验动物监测所所长、研究员、广东省实验动物学会秘书长朱才毅等一行莅临广州博鹭腾生物科技有限公司进行调研,博鹭腾总经理罗文波热情接待了领导一行,并就博鹭腾的基本情况、产品特色和未来方向做了重点介绍。△  广东省实验动物监测所所长朱才毅(左二)领导们随罗文波总经理一起参观了博鹭腾的办公环境、生产车间和研发部门,朱所长对博鹭腾十年来的高速发展表示祝贺,对博鹭腾的研发理念和未来发展给予了高度赞扬和肯定。实验动物是动物活体成像技术的重要载体,也是生物医药研究的基础,对于整个生物医药行业的发展起着至关重要的作用。朱所长指出,动物成像仪器是开展生命科学研究的必备科学仪器,博鹭腾作为专业从事该领域的国产企业,创新和技术是企业发展的重要支撑,要不断加大产品的创新力度,为生命科学行业做出贡献。未来,博鹭腾将继续努力,一如既往地提供优质和产品和完善的服务,不断提高自身实力和创新性产品,助力国产生命科学仪器更好更快发展。

企业动态

2022.03.22

第一届华南动物活体成像应用研讨会暨小动物活体三维成像系统发布会

在去年发布的「十四五规划」的国家战略中,生命科学被纳入引领性科技领域的重点攻关项目,而正在呼吁生物医药行业健康发展的议题也引起了广泛关注。动物活体成像技术作为基础医学、材料科学、药效评估等领域的基础研究方式,受到越来越多的应用。 博鹭腾作为专业从事动物活体成像设备研发与生产的高新技术企业,一直致力于对动物活体成像相关技术的开发与推广,现已研发出国际先进的小动物活体三维成像系统。 为了加速动物活体成像技术的发展,进而推动整个生命科学研究行业的进步,博鹭腾特举办《第一届华南动物活体成像应用研讨会暨小动物活体三维成像系统发布会》。【会议流程】08:30-09:00 | 签到入座09:00-09:05 | 主持人开场09:05-09:10 | 领导致辞                        张俊修    广东省食品医药行业联合党委书记09:10-09:15 | 领导致辞                        朱才毅    广东省实验动物学会秘书长09:15-09:20 | 总经理致辞                        罗文波 博士    广州博鹭腾生物科技有限公司09:20-09:40 |《活体成像技术在纤维化疾病研究中的应用》                        苏金 教授    广州医科大学呼吸疾病国家重点实验室09:40-10:00 |《光学分子影像技术在乳腺外科手术导航中的应用》                        邱斯奇 博士    汕头市中心医院10:00-10:20 |《常见肿瘤动物模型构建以及应用》                        聂晶 博士    湖南斯莱克景达实验动物有限公司10:20-10:35 | 茶歇10:35-10:55 |《活体成像仪在动物模型构建及临床前评价中的应用》                        谢水林 副研究员    华南理工大学10:55-11:15 |《近红外荧光成像用于食管癌术中导航的研究》                        李丹 副研究员    中山大学11:15-11:25 | 新产品发布仪式11:25-11:45 |“AniView Kirin”介绍                        小动物活体三维成像系统11:45-12:00 | 合影【举办单位】指导单位:广东省医药行业协会                 广东省实验动物学会     主办单位:广州博鹭腾生物科技有限公司协办单位:广州云星科学仪器有限公司

企业动态

2022.03.22

文献速递ㅣ动物活体成像系统在纳米医学领域中的应用一

全文字数:1852阅读时间:6分钟● 快讯近日,湘雅二医院药学部湖南省转化医学与创新药物工程技术研究中心向大雄教授团队在纳米医学领域取得系列研究成果,在国际知名期刊《Advanced Healthcare Materials》(IF=9.93,JCR1区)及《Journal of Controlled Release》(IF=9.77,JCR1区)上连续发表两篇研究性论文。两篇论文第一作者及通讯作者单位均为中南大学湘雅二医院,向大雄教授为通讯作者,团队2018级博士研究生吴军勇、2019级博士研究生李泳江为共同第一作者。文章一图1|国际知名期刊《Advanced Healthcare Materials》(IF=9.93,JCR1区)三阴性乳腺癌含有致密的肿瘤基质,是药物渗透和细胞毒性T淋巴细胞浸润的主要障碍,因此化疗和免疫治疗通常难以发挥作用。研究发现中性粒细胞弹性蛋白酶能快速破坏致密的细胞外基质,克服肿瘤基质屏障,使药物或免疫细胞进入肿瘤内部发挥作用。然而游离的弹性蛋白酶缺乏靶向性,因此向大雄教授团队开发了嵌合肿瘤细胞膜蛋白的仿生脂质体(LMP),并在表面结合弹性蛋白酶(NE-LMP),利用肿瘤细胞膜蛋白同源靶向及渗透与滞留效应(EPR)可以有效将NE靶向至小鼠原位乳腺癌内部并降解肿瘤基质。与紫杉醇及与PD-1免疫检查点抑制剂联合应用表现出显著增强的化学-免疫协同疗效,显著延长了小鼠的生存期。同时,这一联合应用策略还可以明显抑制肿瘤肺转移。文章中,标记DiR的NE-LMP在原位乳腺荷瘤小鼠中的生物分布和肿瘤靶向作用的活体实验成像,使用了广州博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄。活体结果显示DiR标记的NE-LMP在给药后很快到达肿瘤部位(2小时),并在8小时积累最多;体外器官结果显示DiR标记的NE-LP也到达肿瘤部位,但荧光强度不如DiR标记的NE-LMP,证明了NE-LMP的优越肿瘤靶向作用。图2|NE-LMP的生物分布(A)  NE-LMP和NE-LP的体内生物分布和肿瘤靶向作用(B)  NE-LMP和NE-LP的体外生物分布(C)  体外组织中荧光强度的量化目前上市用于临床的纳米载体大部分是脂质体,向大雄教授团队利用简单易制备的脂质体作为核心,表面嵌合特殊功能蛋白,这是一种“自下而上”的组装思路,具有前沿的创新性和实用性。图3|用于增强肿瘤化学免疫治疗的膜蛋白弹性蛋白酶结合仿生脂质体的制备示意图文章二图4|国际知名期刊《Advanced Healthcare Materials》(IF=9.93,JCR1区)多形性胶质母细胞瘤(GBM)是恶性程度最高的脑部肿瘤,目前缺乏有效的治疗方式,常规的化疗药物难以跨越血脑屏障(BBB)发挥作用。外泌体(Exos)是由细胞分泌,粒径在30-150nm的纳米囊泡,作为药物载体具有多种优势。脑微血管内皮细胞是BBB主要组成成分,其分泌的外泌体可以跨越BBB,用其载药可以将药物递送至脑内。然而,Exos提取纯化过程较为繁琐,产量较低,作为药物载体极大限制了应用。为了弥补这一缺陷,向大雄教授团队采用连续挤压细胞的方式生产仿生纳米囊泡(BNVs),其具有与Exos相似的粒径、外观和蛋白表达。本研究将Exos和BNVs进行深入比较,在脑部肿瘤的药物递送中进行了直接对比。结果表明,来源于脑微血管内皮细胞的BNVs是天然Exos的合格替代品。二者的载药能力相似,但BNVs的产率是Exos的500倍。携带阿霉素的天然Exos和BNVs在斑马鱼和体内皮下/原位异种移植小鼠肿瘤模型中表现出良好的抑瘤作用。文章中,评估和比较Exos和BNVs在小鼠肿瘤模型中脑肿瘤靶向能力的活体实验成像,使用了广州博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄。尾静脉对原位GBM小鼠注射给予DiR标记的Exos、BNVs或游离DiR,并在注射后6小时、12小时和24小时使用AniView100拍摄获得小鼠体内和体外器官荧光图像。结果显示DiR标记的Exos和BNVs在6小时达到GBM,并在24小时积累更多,而游离DiR在大脑中没有显示荧光信号,表明Exos和BNVs都可以突破BBB并靶向大脑中的肿瘤部位。图5|Exos和BNVs的生物分布和肿瘤靶向作用(A) Exos和BNVs在GBM小鼠中的体内生物分布(n=3)(B) Exos和BNVs在原位GBM小鼠中的体外生物分布(n=3)。H:心脏;S:脾;K:肾脏;B:大脑;GI:胃肠道(C)  原位GBM小鼠中Exos和BNVs的脑分布(n=3)鉴于自体来源的BNVs的低免疫原性、高产量等特性,可将其作为纳米医学中有效的Exos替代物,以克服Exos制剂研究过程中难以扩大生产的缺陷。图6|文章图形概要恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病,近年来。发病率和死亡率逐年上升,而临床常规的治疗方式(化疗、放疗、免疫治疗)特异性差,毒副作用较大,使用常受到限制。精心设计的纳米载体可以实现肿瘤的准确靶向,用以调控肿瘤的微环境或杀灭肿瘤细胞,达到减毒增效,然而常规的有机或无机纳米载体属于外源性材料,常引起机体的免疫响应,易被吞噬而失去效果。鉴于此,向大雄教授团队近年来着眼于仿生纳米递药系统研究,设计了一系列以外泌体、囊泡、细胞膜和蛋白等内源性材料为基础的纳米载体,实现了肿瘤的准确治疗。文献链接:https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2021.07.004https://doi.org/10.1002/adhm.202100794博鹭腾助力科研实验广州博鹭腾作为一家专业从事光学成像设备研发与生产的高新技术企业,坚持为用户提供强大的图像处理技术、优质的产品设备和贴心的售后服务,为中国科研工作贡献一份力量。

应用实例

2022.03.15

Western blot 撤稿主要原因有哪些?怎样才能避免?

# 据相关报道 #截止到2021年1月31日,全世界SCI论文共撤稿25,099篇,而新闻报道最多的就是Western blot(蛋白质印迹法)因“造假”而撤稿。什么是Western blot?Western Blot(蛋白质印迹法),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是将电泳分离后的细胞或组织中蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术。Western Blot(蛋白质印迹法),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是将电泳分离后的细胞或组织中蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术。Western blot 撤稿主要原因有哪些?1  重复使用数据Metformin inhibits cell proliferation, migration and invasion by attenuating CSC function mediated by deregulating miRNAs in pancreatic cancer cells.Cancer Prevention Research (2012)2  修改图片数据Down-regulation of Notch-1 contributes to cell growth inhibition and apoptosis in pancreatic cancer cells.Molecular Cancer Therapeutics (2006)3  无法提供原始实验数据当编辑要求作者提供原始数据(非jpg或tif格式)验证假设时,作者会以原始数据丢失,或无法再次提供可重复性数据等理由要求撤稿。4   Western blot 实验图片不够完整以《Nature》期刊要求为例,期刊允许发表的文章对Western Blot实验图片进行剪切,但是投稿时需要提供完整的Western Blot实验图片,且要在文章中注明图片经过剪切处理,同时对实验图片长宽比也有要求。若编辑认为剪切后的图片存在故意遮挡等问题,投稿人也会面临拒稿的风险。1.剪切的图片需要在文章中注明,且长宽比相同2.需要提供完整的实验图片5   Western blot 实验图片对比度过高接收                                 不接收(Journal of Biological Chemistry, Good practices for preparing publication-quality figures)有时候为了让背景更干净,条带更清晰,会对实验图片进行高对比度调节,虽然实验数据看上去更好看了,但是这样的图片数据丢失了大量原有的图像信息,极大可能不被期刊所接收。那有没有好的方法避免以上问题,让文章顺利发表呢?当然有,广州博鹭腾产品软件系统由高水平团队自主研发,具有不压缩数据位深,GLP数据追踪,多用户登陆,以原始数据进行灰度分析等优势,功能综合强大,是您科研实验的好帮手!博鹭腾产品助力科研实验1不压缩数据位深输出的图像为16bit(65536个灰阶),与相机的位数16bit相同,图像细节更多,更加真实;市面上有些仪器会自动将图片进行美化,往往美化后输出的图像为8bit (256个灰阶)。虽然看上去目的蛋白更圆滑,背景更干净,但美化后的图像会丢失许多细节,影响数据的真实性。TIPS:如何查看tif. Jpg.等格式图像是不是16bit,真实未经“美化”的图像?鼠标右键点击图像→ “属性”→“详细信息”, 即可查看图像的bit(位深度),分辨率,DPI等信息。2GLP数据追踪博鹭腾产品自带GLP协议,具备对实验数据记录、追踪、溯源等功能。拍摄参数、曝光时间、拍摄日期等信息无法被修改。安全可靠,为您的数据保驾护航。GLP (Good laboratory practice of drug) 药品非临床研究质量管理规范。旨在严格控制化学品安全性评价试验的各个环节,确保试验结果的准确性,促进试验质量的提高,提高登记、许可评审的科学性、正确性和公正性,更好地保护人类健康和环境安全。实验数据自动保存,不可修改实验数据追踪与溯源3多用户登陆客户可以根据实验室管理需求,对不同的实验室人员进行权限管理。如普通的实验人员只能进行正常的实验拍摄操作,无法进行删除原始文件或修改仪器设置等操作。方便实验室的统一管理,确保实验数据的安全。4以原始数据进行灰度分析博鹭腾产品拥有自主研发综合分析软件,在原始数据(.blt格式)的基础上进行数据分析,反映实验数据的真实样貌。保证图像的真实性同时,避免不必要的麻烦。GelView 6000Plus智能图像工作站

参数原理

2022.03.14

BLT小课堂 经典的双报告系统:海肾+萤火虫

01什么是双荧光素酶报告系统?双荧光素酶报告系统通常是指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,F-Luc)和海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,R-Luc)组合而成的双报告系统。其中,F-Luc是从萤火虫Photinus pyralis中分离出来的;R-Luc则是从海肾Renilla reniformis中分离出来的。萤火虫海肾这两种酶都能催化底物发光,但它们在进化上的起源不同。因此,他们具有不同的酶学结构和底物要求:F-Luc需要荧光素、氧气、ATP和镁离子同时存在才能发光;R-Luc仅需要腔肠素和氧气。此外,他们发光的颜色不同:F-Luc的光波长为550-580nm;R-Luc的光波长为470-490nm。正是由于这两种酶的底物和发光波长不同,互不干扰,所以在双报告系统中得到广泛应用。发光反应方程式02双荧光素酶报告系统有什么优势?单荧光素酶实验的结果往往会受到各种实验条件(比如,培养细胞的数目和活力的差别,细胞转染和裂解的效率等)的影响,而双荧光素酶实验中,通常以海肾荧光素酶为内参,对萤火虫荧光素酶的检测结果做均一化处理,使得最终的数据更为准确。03双荧光素酶报告系统的应用?一、miRNA与靶标基因相互作用1. 验证microRNA同mRNA靶向互作。将待测mRNA的3’UTR序列插入报告基因载体,再共转入该microRNA,如果荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。2. 验证microRNA同lncRNA靶向互作。将候选的lncRNA序列插入报告基因载体中的3’UTR区域,再共转入该microRNA,检测荧光素酶活性。二、启动子分析1. 启动子结构分析。将启动子区域序列进行分段截短或对特定位点进行突变,再分别连接到报告载体,荧光素酶活性变化可以指示启动子功能变化。2. 启动子SNP分析。一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性,可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。3. 验证特定转录因子同其调控序列的作用。将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同时在实验细胞中过表达该转录因子,可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。三、信号通路分析将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体,在不同上游信号条件下,荧光素酶活性代表了通路的下游响应。04常用的双荧光素酶载体是什么?载体的选择有两种策略:第一种方案是两种荧光素酶分别位于两个载体上,。海肾荧光素酶常用载体为pRL-TK。萤火虫荧光素酶载体会根据实验需求进行不同的选择,比如启动子荧光分析相关研究可以选用Pgl3-Basic载体,miRNA与靶标基因相互作用的相关研究可以选用pMIR-REPORT载体。pRL-TKPgl3-BasicpMIR-REPORT第二种方案就是将萤火虫荧光素酶与海肾荧光素酶构建到一个载体上,这样偏差更小,在这方面,现在比较有名的是pmirGLO载体。05所使用的仪器是哪些?为了精确检测荧光素酶发出的光信号,需要高灵敏度的光学检测设备。广州博鹭腾生物科技有限公司生产的高灵敏度板式发光检测仪Lux-P110和管式发光检测仪Lux-T020可以检测到20zmol 荧光素酶,检测范围达到7个数量级,满足市面上绝大多数双荧光素酶报告体系的检测需求,目前已被多家学校、医院、企业所使用。本公司可免费提供样机试用,欢迎广大客户前来咨询和申请~

应用实例

2022.02.11

BLT小课堂 | 蛋白芯片技术原理及应用

概念蛋白质芯片技术是在DNA芯片技术基础上发展的一项蛋白质组学技术。其原理是将大量不同的蛋白质分子(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等)通过微阵列的形式有序排列在固相载体表面,利用蛋白质与蛋白质或者蛋白质与其他分子之间的特异性结合,获得与之特异性结合的待测蛋白(如血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等)的相关信息,便于我们分析未知蛋白的组分、序列,体内表达水平、生物学功能、与其他分子的相互调控关系、药物筛选、药物靶位的选择等。蛋白质芯片技术的出现,为我们提供了一种比传统的凝胶电泳、Western blot和Elisa更为方便和快速研究蛋白质的方法。该方法具有高通量,微型化和快速平行分析等优点,不仅对基础分子生物学的研究产生重要影响,也在临床诊断、疗效分析、药物筛选及新药研发等领域有着广泛应用。特点①蛋白芯片具有高特异性、重复性、准确性。这是由抗原抗体之间、蛋白与配体之间的特异性结合决定的。②蛋白芯片具有高通量和操作自动化的特点,在一次实验中可对上千种目标蛋白同时进行检测,效率极高。③可发现低丰度、小分子量蛋白质,并能测定疏水蛋白质,特别是膜蛋白质。④蛋白芯片具有高灵敏性,只需0.5-5μL样品,或2000个细胞即可检测。蛋白芯片技术在分子生物学及生物化学基础研究中的应用01 在蛋白质水平上检测基因的表达由于基因转录产物mRNA数量并不能准确反映基因的翻译产物蛋白质的质与量,因此在蛋白质水平上检测基因的表达对于了解基因的功能非常重要。蛋白质芯片技术产生前,蛋白质双向电泳技术是蛋白质组规模上进行蛋白质表达研究的唯一方法,但这种技术操作繁琐而且难以快速检测样品中成百上千种蛋白质的表达变化。蛋白质芯片的特异性、灵敏性和高通量等特点,在检测基因表达终产物蛋白质谱的构成及变化中发挥着不可替代的作用。02 高通量筛选抗原/抗体相互作用目前蛋白质芯片检测利用最广泛的生物分子相互作用是抗原抗体的特异性识别和结合,单克隆抗体是蛋白质芯片检测中使用最广泛的生物分子。运用蛋白质芯片可以研究不同抗原/抗体的特异性作用,而且对于检测样品中极微量的抗原/抗体分子作用非常有利。03 蛋白质/蛋白质相互作用分析酵母双杂交系统是近年来基因组规模上研究蛋白质相互作用的主要方法,但存在体内操作、假阳性、假阴性和外源蛋白质折叠、修饰等局限。蛋白质芯片技术不依靠任何生物有机体而在体外直接检测目标蛋白质,实验条件可随意控制,同时实验步骤自动化程度高,一次分析的蛋白质数量巨大,因而成为目前除酵母双杂交系统外进行大规模研究蛋白质相互作用的主要方法。04 酶/底物作用分析耶鲁大学的Snyder小组用蛋白芯片对酵母基因组编码的119种蛋白激酶的底物专一性进行了研究。实验中将蛋白激酶表达为谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白,针对17种不同的底物,平行测定了119种GST2蛋白激酶融合蛋白的底物专一性,发现了许多新的酶活性,大量蛋白激酶可以对酪氨酸进行磷酸化,而这些激酶在催化区域附近有共同的氨基酸残基。也证明了蛋白质芯片可作为高通量筛选酶-底物作用的良好平台。蛋白芯片的检测目前蛋白芯片的检测主要有两种方式。一种是以质谱技术为基础的直接检测法,采用表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱技术,用激光解析电离的方法将保留在芯片上的蛋白质解离出来。具体过程为:芯片经室温干燥后,加能量吸附因子如芥子酸,使其与蛋白质结合成混合晶体,以促进蛋白质在飞行时间质谱检测中的解析和离子化,利用激光脉冲辐射使芯池中的分析物解析成荷电粒子,根据不同质荷比离子在仪器场中的飞行时间长短不一,通过飞行时间质谱来精确地测定出蛋白质的质量,并由此绘制出一张质谱来,以分析蛋白质的分子量和相对含量。另一种为蛋白质标记法,样品中的蛋白质预先用荧光染料或同位素等标记,结合到芯片上的蛋白质就会发出特定的信号,用CCD照相技术及荧光扫描系统等对激发的荧光信号进行检测。与飞行时间质谱相比,该方法定量更加准确,操作也更加简便。与DNA芯片一样,蛋白质芯片同样蕴含着丰富的信息量,必须利用专门的计算机软件进行图像分析、结果定量和解释。其中应用最广的是荧光染料标记法,原理较为简单、使用安全、灵敏度高,且有很好的分辨率。可直接用广州博鹭腾 GelView 6000Plus进行拍摄。图1.GelView 6000Plus智能图像工作站GelView 6000Plus 配备600万像素科学级制冷CCD相机,制冷温度为环境温度下 55℃,极低的暗电流,很大程度降低背景干扰。而且独有的红外感应开关,自动控制样品台的开启与关闭,同时也减少了实验时对仪器的污染。

应用实例

2022.02.10

文献速递ㅣ动物活体成像系统在外泌体研究中的应用

细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是来源于细胞的脂质双层包裹的纳米囊泡。外泌体(Exosomes)作为EVs的一个亚型,由于具有体积较小、能跨越生物屏障、循环稳定和固有靶向性等特性,成为非常有吸引力的药物输送载体。目前对于外泌体的获取,主要是基于差速超速离心,对细胞培养上清液的外泌体进行离心分离、收集和浓缩;但是在分析外泌体的内容物、研究其功能或用于治疗应用之前,储存条件对sEVs(small EVs)特性的影响还没有完全阐明,也缺乏对不同储存条件的对比评价。▲  典型的外泌体结构。外面由磷脂双层包围,含有对运输很重要的膜联蛋白;用于细胞靶向的四环素以及参与其他生物过程的蛋白。近日,中南大学、湖南省转化医学与创新药物工程研究中心向大雄教授课题组通过差速超速离心分离获得bEnd.3细胞来源的sEVs,并测试了保存条件对sEVs的大小、数量、蛋白质/RNA含量和与治疗应用相关的性质影响。在研究不同储存温度对sEVs在活体治疗应用的影响时,采用博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统进行了连续纵向检测sEVs在活体体内生物分布。结果直观清晰地显示储存会显著影响bEnd.3细胞来源的sEVs的脑靶向能力;因此,对于sEVs的治疗应用,应使用新鲜的sEVs或可在-80℃下短期保存备用。相关成果已发表在期刊《Drug Delivery》,可为未来sEVs的商业化储存提供参考。▲  使用博鹭腾AniView100拍摄的sEVs在小鼠体内和体外器官的生物分布结果。(A) sEVs在健康小鼠体内的生物分布(B) 在小鼠主要器官的生物分布(C) sEVs在小鼠脑部生物分布比较(D) sEVs在小鼠器官中的荧光信号强度(E) sEVs在小鼠脑部荧光信号的强度参考文献:1、Wu J Y , et al. Preservation of small extracellular vesicles for functional analysis and therapeutic applications: a comparative evaluation of storage conditions[J]. Drug Delivery, 2021, 28(1):162-170.2、Kourembanas, Stella. Exosomes: Vehicles of Intercellular Signaling, Biomarkers, and Vectors of Cell Therapy[J]. Annual Review of Physiology, 2015, 77(1):13-27.AniView100多模式动物活体成像系统应用实例肿瘤学研究新药筛选评价干细胞研究病毒感染模式疫苗开发基因表达调控研究

应用实例

2022.01.21

文献速递|动物活体成像系统在载药纳米超声造影剂研制中的应用

近日,中山大学附属第七医院肾泌尿外科中心庞俊教授团队在载药纳米超声造影剂研究中取得成果,在国际知名期刊《ACS Applied Materials & Interfaces》(IF=9.229,JCR1区)上发表研究性论文。图1|国际知名期刊《ACS Applied Materials & Interfaces》(IF=9.229,JCR1区)超声(US)由于其安全性、非放射性、实时监测和低成本而被广泛用于临床诊断成像。然而,传统的超声造影剂(UCAs)只能用于血池成像,且由于尺寸相对较大,无法实现肿瘤区域的血管外成像。此外,仅应用常规UCAs也不能达到预期的治疗目的。基于纳米粒子(NPs)的UCAs因其无创性、精确靶向、可见性和装载小分子的便利性而受到越来越多的关注。产生气体的NPs具有很高的回声敏感性,二硫键可以用于还原响应性NPs药物递送系统制备。目前,已报道的同时具有超声成像和治疗功能的医用NPs大多仅基于pH响应性药物释放,并且药物释放速率不完全。基于上述考虑,庞俊教授团队制备了包裹二硫聚合物、碳酸氢钠(NaHCO3)水溶液和化疗药物盐酸阿霉素盐(DOX·HCl)的NPs(DOX@HADT-SS-NaHCO3NPs)。NaHCO3在酸性条件下能产生CO2,提供回声信息;更重要的是,双重pH/GSH响应性药物释放可以进行癌症治疗,最终实现前列腺癌US成像和治疗的一体化。图2|制造聚合物步骤和通过产生回声CO2气泡放大超声对比度并发挥按需治疗作用的NPs示意图文章中,标记Cy5.5的HADT-SS-NaHCO3NPs在C4-2荷瘤裸鼠体内的生物分布活体实验成像,使用了博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄。当C4-2荷瘤裸鼠的肿瘤体积达到100mm3时,静脉给药注射游离Cy5.5和Cy5.5@HADT-SS-NaHCO3NPs溶液。活体结果显示用Cy5.5@HADT-SS-NaHCO3NPs处理的小鼠肿瘤中的荧光信号从0.5到4小时逐渐增加,并在4小时达到峰值,然后随着时间的推移逐渐减弱。相比之下,整个时期肿瘤部位未观察到明显的游离Cy5.5荧光信号,游离Cy5.5荧光信号主要出现在肝脏。定量荧光信号也证实了Cy5.5@HADT-SS-NaHCO3NPs在肿瘤和肝脏中分布的趋势,揭示了HADT-SSNaHCO3NPs通过EPR效应在肿瘤组织中的特异性积累。图3|负载Cy5.5的HADT-SS-NaHCO3NPs(A)和具有等效Cy5.5浓度(0.2 mg/kg)的游离Cy5.5溶液(B)在C4-2荷瘤小鼠中的体内生物分布。静脉注射后0.5、1、2、4、8、12、24、48和72小时,用AniView100获得的小鼠背部和前部的体内荧光图像,一列代表同一只裸鼠的正面和背面。(C)和(D)为肿瘤组织和肝脏荧光强度的定量分析US造影剂已广泛应用于肿瘤的诊断和鉴别诊断。商业US由于体积大,成像时间短,应用受到限制;同时,仅应用常规的US造影剂并不能达到预期的治疗目的。庞俊教授团队设计的HADT-SS-NaHCO3NPs在酸性pH条件下表现出明显增强的超声对比度和抗肿瘤效果,为前列腺癌的有效超声成像诊断和治疗提供了一种有效的潜在药物。文献链接:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsami.1c00077

应用实例

2022.01.19

文献速递|多模式动物活体成像系统在鱼疫苗研发中的应用

病毒性疾病爆发是水产养殖业最严重的问题,具有传播快、发病快和致死率高等特点,对水产养殖业造成了巨大的经济损失;而疫苗免疫是对其进行防控的最有效措施。在水产动物免疫途径中,注射方式效果较好,但不适合渔业生产;浸浴免疫操作简单,适合在鱼苗和鱼类大规模养殖中推广使用,但是浸浴疫苗的应用需要克服生物屏障等阻碍作用,才能使疫苗发挥出理想的免疫效果。     研究发现,纳米载疫苗靶向递呈技术是解决水产养殖产业实现疫苗高效免疫保护最安全有效的手段之一;单壁碳纳米管(SWCNTs)是一种高效的疫苗载体,具有高穿透性、高承载力、易修饰性和安全性等特性;甘露糖受体(Mannose receptor)是抗原呈递细胞上的标志性受体,能够结合甘露糖修饰的抗原物质,可以作为疫苗的靶点。     近日,西北农林科技大学动物科技学院朱斌教授课题组运用纳米载疫苗靶向递呈技术,构建靶向性碳纳米管载疫苗系统,选择高效的疫苗载体(单壁碳纳米管)来突破生物屏障的限制,并利用合适的佐剂(甘露糖修饰的抗原物质)来增强疫苗的免疫效果,使疫苗充分发挥治疗和免疫保护效果。这些研究成果相继发表在期刊Vaccines和Journal of Nanobiotechnology,可以为其它水产动物纳米载疫苗系统的研究、应用奠定理论基础,对渔业的可持续发展和水产品食品安全生产具有重要意义。文章一     草鱼呼肠孤病毒(GCRV)已被公认为是所有水生病毒物种中最具致病性,VP7作为GCRV的外衣壳蛋白,是一种可以诱导宿主免疫反应的主要抗原。通过构建靶向浸没疫苗递送系统(CNTs-M-VP7),该系统由SWCNTs作为疫苗载体,GCRV VP7蛋白作为抗原,甘露糖作为抗原呈递细胞靶向部分。结果表明CNTs-M-VP7疫苗可通过粘膜组织(皮肤,腮和肠)进入鱼体内,呈现给免疫相关组织,显著诱导的成熟和呈递过程,从而引发强大的免疫反应。a、CNTs-M-VP7纳米疫苗的制备过程;b、巨噬细胞对纳米疫苗的吸收;c、鱼组织中纳米疫苗的摄取;d、用博鹭腾多模式动物活体成像系统检测接种鱼体内和体外荧光的分布;e、草鱼接种后,用GCRV人工攻击后的相对存活百分比(每组n =100)。文章二      鲤春病毒血症(Spring viremia of carp,SVC)是危害最严重的水产病毒性疾病之一,SVCV作为SVC的病原,其表面糖蛋白(G)被认为是一种主要抗原,可以诱导原发性宿主免疫反应。通过化学修饰的方法将SVCV的抗原蛋白(G)、功能化单壁碳纳米管和功能化甘露糖进行结合,构建了靶向性碳纳米管载疫苗系统(SWCNTs-MG)。结果表明SWCNTs-MG通过提高疫苗进入鱼体的含量,并增强对抗原呈递细胞的靶向呈递作用,进而提高疫苗浸浴免疫的效果。a、SWCNTs-MG纳米疫苗的制备过程;b、纳米疫苗在体内和体外的安全性评估;c、鲤鱼巨噬细胞体外纳米疫苗的摄取;d、鱼组织中纳米疫苗的摄取;e、用博鹭腾多模式动物活体成像系统检测接种鱼体内和体外荧光的分布;f、在接种的鲤鱼中用SVCV人工攻击后的相对存活百分比。TipsAniView 100多模式动物活体成像系统      AniView 100多模式动物活体成像系统作为广州博鹭腾生物科技有限公司推出的高灵敏度动物活体成像系统,其采用全密闭抗干扰暗箱,避免外界光源及宇宙射线对拍照影响的同时,配合零缺陷、科研级高灵敏背部薄化、背部感应型冷CCD相机,极大地提高成像的灵敏度。AniView 100可以检测到参考文献:1、Zhang C ,  Wang G X ,  Zhu B . Journal of Nanobiotechnology, 2020, 18(1).2、Zhu B, Zhang C, Zhao Z, Wang GX. Vaccines(Basel). 2020;8(1):87. 3、张晨.[D]. 西北农林科技大学,2019.

应用实例

2022.01.04

BLT小课堂 | 萤火虫萤光素酶在ATP检测中的应用

前言:生物发光是一种在生物体内由酶将化学能转化为光能的现象,在自然界中有超过30种生物发光体系,而我们所熟知的萤火虫的发光体系就是其中研究最早,应用也最广泛的一种。萤火虫的发光现象是由其体内的萤光素酶(luciferase)的催化下三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)与发光底物萤光素(lucierin)发生反应产生光。ATP被认为是一种在所有生物体生存和繁殖的细胞合成中必不可少的普遍能量来源,形象的说,它是一种通用的能量“货币”。ATP可以通过水解产生AMP和一个磷酸基团,同时释放出能量,供给细胞活动。ATP结构图发光反应的方程式:研究历史:1885年萤光素及萤光素酶第①次被Dubois提取出来;1952年Strehler和Totter首次使用萤光素酶粗制品测定ATP;1961年White等人工合成了萤光素;1985年Dewet, JR等首次克隆了P. Pyralis萤光素酶基因并在大肠杆菌中表达,从中得到具有活性的萤光素酶,从而开启了萤光素酶作为报告基因的历程。ATP的含量直接反应了细胞或微生物的含量,通过监测ATP含量的改变,可以评价多种药物、生物制剂或生物活性物质引起的细胞杀伤、细胞抑制和细胞增殖作用;另外ATP也常作为微生物污染的一个指标,检测ATP含量能直接反映出其受污染程度。测定生物体中ATP的水平及其动态变化便成为监测生物体必不可少的手段。接下来,小编将向大家具体介绍一下他在近年来的应用领域。应用领域01食品安全人类的身体健康、生命安全长期受到微生物污染的威胁,营养琼脂平板计数法是国际上针对微生物检测的现有标准方法,然而该方法要求在 37 ℃下持续培养 48 h,过于繁琐的操作无法实现快速检测。现下,国内也加大了对核酸法、电阻抗测量、免疫学方法、微菌落技术等各类微生物快速检测技术展开了研究、应用。ATP生物发光法因快速、简便且具有较高灵敏度的缘故,可用于实时监控微生物污染,与食品行业需求相符合,故而有关该技术的研究与应用十分广泛。其检测步骤通常为:①首先根据ATP发光检测试剂盒的使用说明将标准ATP按梯度稀释,与酶、底物、缓冲液按比例混合,使用发光检测设备(比如博鹭腾发光检测系列)测量对应的发光值,绘制标准曲线。②提取样品细胞中的ATP,稀释,之后按比例与酶、底物、缓冲液混合,使用发光检测设备测定发光值,代入标准曲线,即可知道样品中ATP浓度。(ATP浓度与细胞浓度关系的测定:取对数生长期的细胞,离心浓缩后用苔盼蓝染色,计活细胞数,之后在 96孔培养板上等比稀释,测定其发光值,发光值代入标准曲线获得ATP浓度,经过计算即可获得ATP浓度与细胞浓度关系。)应用案例:酒类制作过程中微生物浓度检测食品生产线卫生学检测环境保护部门水体微生物检测卫生监管部门微生物数量检测对应文献:[1]吴慧清.ATP生物发光法饮用水中细菌总数快速测定方法研究[J].中国卫生检验杂志,2009,19(9):1975-1978.[2]刘阳,牟金明.ATP生物发光法快速测定物体表面的菌落总数[J].安徽农业科学,2016,44(1):125-128.[3]易琳.微生物检测中 ATP 生物发光法的应用研究现状[J].生物化工,2019,5(1):124-126.[4]高红阁.ATP 生物荧光法在卫生监督工作中的应用进展[J].疾病监测与控制杂志,2013,7(9):548-550.[5]伍季.ATP生物发光法快速检测啤酒中的菌落总数[J].河南科学,2006,24(1):63-65.[6]李春艳,霍贵成.ATP生物发光法快速测定生乳中微生物总数的研究[J].食品工业科技,2008,29(7):233-238.[7]魏树源.三磷酸腺苷生物发光快速微生物检测法在疫苗中间品无菌试验中的应用[J].中国生物制品学杂志,2010,23(10):1120-1124.[8]丛苑,李平兰.ATP 发光法快速检测玉米中的霉菌[J].中国食品学报,2014,14(8):233-238.02药物敏感实验化疗是恶性肿瘤主要治疗手段之一,其地位已越来越重要。但因为不同类型的肿瘤以及不同个体的同类肿瘤存在异质性,以致惯用的经验式化疗效果尚不理想。临床上迫切需要有切实可靠的检测方法,在化疗实施前筛选出有效药物,进行个体化治疗,以提高疗效而减少毒副作用。ATP生物发光法是近年来发展起来的一种高度敏感的药物敏感试验。文献表明 ,将ATP生物发光法应用于临床个体肿瘤药物敏感性的预测,与临床有较好的相关性。基本思路为:①将癌细胞与药物体外混合培养一段时间。②与食品安全检测类似:绘制发光标准曲线→测定与药物混合培养细胞的发光值→代入标准曲线,最 后计算出药物对肿瘤的杀伤强度。应用案例:化疗药物筛选结核药物筛选细胞活性测定中医疗效评价对应文献:[1]周旻.ATP生物发光法检测卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性[J].广东医学,2000,21(4):293-295.[2]陈历排.用微量板 ATP生物发光法检测肿瘤细胞对化疗药物的敏感性[J].肿瘤,2000,20(2):103-105.[3]刘君.三磷酸腺苷发光法快速检测结核分枝杆菌异烟肼耐药的研究[J].现代预防医学,2014,41(1):108-113.[4]梁镇兴.利用自主发光结核分枝杆菌快速连续检测抗结核药物的细胞内活性[J].实用医学杂志,2013,29(23):3823-3826.[5]张志敏.ATP释放法测定人外周血NK细胞活性及初步临床应用[J].免疫学杂志,1992,8(4):260-261.[6]湛学军.三磷酸腺苷生物发光法分析莪术油等中药抑制肝、胃癌细胞增殖活性的研究[J].江西医药,2005,40(11):706-708.[7]朱云仙.养心2号方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织ATP及MMP的影响[J].南京中医药大学学报,2016,32(3):274-278.[8]彭艳.艾灸对脾虚大鼠空肠组织ATP含量和ATP酶活性的影响[J].中国现代医学杂志,2013,23(1):8-13.高灵敏度板式发光检测仪Lux-P110:目前已被多家学校、医院、企业所使用,具有极高的灵敏度(≤10amolATP或≤20zmol 萤光素酶)、超宽的线性范围(≥6个数量级),同时配备了两个原位进样器,支持双萤光素酶报告体系的检测。高灵敏度管式发光检测仪Lux-T020:管式发光检测仪主要针对单样品发光检测的客户,相比于Lux-P110,体积更加小巧,使用更加方便,灵敏度则与Lux-110相同。该系列设备支持试用,欢迎您与我们联系。

应用实例

2021.12.29

BLT小课堂|水母发光蛋白检测法在细胞钙离子含量测定中的应用

Ca2+作为普遍的第二信使在细胞信号转导过程中起着非常重要的作用,是单个细胞生存和死亡的信号。它参与了神经传导、血液凝固、肌肉收缩、心脏收缩、大脑功能、酶功能以及内分泌腺的激素分泌等各种生理机能。而人们对Ca2+在信号转导中作用的认识,则很大程度上取决于Ca2+测定技术。目前常用的Ca2+检测方法主要有:Ca2+选择性微电极测定法、同位素示踪法、核磁共振法和水母发光蛋白检测法等。01Ca2+选择性微电极测定法:Ca2+选择性微电极一种电化学敏感器。利用内充液和组织或细胞之间产生电位差,理想情况下,该电位差是Ca2+对数的线性函数,遵循Nernst方程。优点:直接、敏感地测定组织或细胞内的Ca2+,不需使用指示剂,不影响结合钙和游离钙的平衡。缺点:反应速度慢而无法测定Ca2+的快速变化,而且穿刺损伤细胞可引起渗漏,且不适用于太小的细胞。02同位素示踪法:用放射性核素45Ca2+对Ca2+进行示踪,可测量出通过细胞膜转运到细胞内Ca2+增加的速度及浓度的大小,揭示Ca2+泵的作用,目前主要用于测定跨膜Ca2+的流动。优点:测量方法简单易行,比普通化学分析法的灵敏度高。确定放射性示踪剂在组织器官内的定量分布,可以达到细胞、亚细胞乃至分子水平。缺点:静态效果差,需要特定的同位素测定仪,并且要注意示踪剂的同位素效应和放射效应问题。03核磁共振法:是一种新的、非光学技术的Ca2+检测方法。由于正常生物体内氟含量很少,为了得到足够的响应,在检测时需要使用含氟指示剂。该指示剂经过化学修饰后进入细胞,进而被水解成游离状态,然后与Ca2+结合,根据获得的波谱图计算出Ca2+的浓度。优点:具有非破坏性和无损伤性,能够在接近生物样本生理状态下连续动态地进行检测,准确反应Ca2+浓度。缺点:需要核磁共振仪,成本较高。04荧光探针法:目前常用的Ca2+荧光探针有Fluo-3、Fluo-4、Fluo-8等。这类探针本身无法进入细胞,但它的亲脂性衍生物却可以透过细胞膜进入细胞。一旦进入细胞,这类亲脂性衍生物的亲脂性封闭基团在细胞非特异性酯酶的作用下被分裂除去,在细胞内便会形成一种带负电荷的荧光染料。与胞内Ca2+结合时,其荧光强度显著增加。优点:指示剂易导入细胞,空间分辨率高,反应速度快,而且可同时检测多重离子。缺点:需要有荧光显微镜或激光共聚焦显微镜,成本较高。05水母发光蛋白检测法:最近十几年来,水母发光蛋白(Aequorin)很受人们的关注。水母发光蛋白由189个氨基酸组成,具有3个Ca2+结合的EFhand结构,所以水母发光蛋白可作为检测Ca2+的新型探针。优点:Ca2+/水母蛋白复合物能检测~0.1μm到>100μm范围内的钙离子浓度,且复合物不会从细胞内泄露出来,可检测几小时至数十天内Ca2+浓度的变化。比荧光探针法的背景低,样本本身不会发生自荧光。腔肠素的性质腔肠素(Coelenterazine)作为海洋动物体内贮存光能的分子,它广泛存在于海洋生物体内,比如海肾、海蜇、水螅等。腔肠素是天然荧光素中最普遍的,它可作为很多荧光素酶的底物。目前研究得最透彻的以腔肠素为底物的荧光素酶来源于海肾(Renilla),即海肾荧光素酶(Renilla reniformis,简称Rluc)。腔肠素的工作原理腔肠荧光素是一个分子量约400 Da 的疏水基团,它可以自由穿越细胞膜。在一个以荧光素/荧光素酶为基础的系统中,腔肠素作为以水母发光蛋白为代表的海洋发光蛋白的辅助因子,与水母发光蛋白进行稳定的结合,引起脱辅基水母发光蛋白和腔肠荧光素之间的共价键破裂,腔肠荧光素(Coelenterazine)被氧化脱羧,形成腔肠酰胺(Coelenteramide),释放出CO2,同时发出波长为469nm的蓝色生物荧光,该荧光可用博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪进行测定。图1.腔肠素/水母发光蛋白检测Ca2+机制水母发光蛋白一旦和Ca2+反应即丧失发光功能,因此当一部分水母发光蛋白与Ca2+反应时,被消耗水母发光蛋白的发光强度能反映出Ca2+浓度变化,而且被消耗的水母发光蛋白的发光强度与Ca2+浓度之间存在线形关系。如同萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶的活性也不需要翻译后修饰,一旦翻译完成即可行使遗传报告基因的功能。但是与萤火虫荧光素酶又有差异,即腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更利于生物荧光的研究。技术小结由于Ca2+在生命活动的各种生理生化反应、疾病的发生和发展中都扮演着极其重要的角色,而游离的Ca2+浓度变化又与细胞的功能、信号转导乃至细胞的凋亡有密不可分的联系,因此,研究如何检测细胞内游离Ca2+浓度显得尤为重要。Ca2+选择性微电极测定法不需要使用指示剂,但是穿刺过程会损伤细胞,进而引起渗漏。同位素示踪法简单,但是静态效果差,还需要注意同位素效应和放射效应问题。核磁共振法和荧光探针法都需要特定的仪器,成本较高。水母发光蛋白检测法不需要激发光源,因而消除了细胞自发荧光的干扰,背景荧光远低于使用钙离子指示剂的荧光。另外腔肠素具有疏水性,易于通过细胞膜,适于全细胞的研究。 腔肠素/水母发光蛋白的生物荧光反应对Ca2+浓度的变化非常敏感,但是这种发光相对较弱,因此需要使用高灵敏度的发光检测仪进行检测。  图2.Lux-T020高灵敏度管式发光检测仪   图3.Lux-P110高灵敏度板式发光检测仪博鹭腾公司的管式/板式发光检测仪采用超高灵敏度的低噪音单光子PMT,同时通过计数电子记录和分化脉冲 的单脉冲输出的能力来定义高数量级,从而实现更宽的动力学范围。高灵敏度板式发光检测仪设计了2个独立的喷射式自动进样器,精度高于97%。两款产品都适用于以水母发光蛋白为载体的 Ca2+ 浓度测定,极其微小的浓度变化也可以轻松检测。除了检测上述Ca2+ 浓度以外,博鹭腾高灵敏度管式/板式发光检测仪还可以测定活细胞内报告基因、ATP、活性氧、半胱天冬酶等指标。

应用实例

2021.12.27

博鹭腾入选2021年广州市“专精特新”企业!

近日,广州市工业和信息化局发布了关于市级“专精特新”(两高四新)等“三个一批”企业(第五批)入库名单的公示,广州博鹭腾生物科技有限公司名列其中。“专精特新”(两高四新)企业的入库认定,不仅要求企业发展韧性足,具有高科技、高成长属性,还要求企业创新能力强,具有新技术、新产业、新业态、新模式的开拓实力。此次入库“专精特新”(两高四新)企业,是市工信局对博鹭腾在生命科学仪器领域技术创新研发能力、制造实力与发展潜力高度认可。感谢政府对博鹭腾的肯定与支持!什么是“专精特新”——“专精特新”企业定义:是指具有“专业化、精细化、特色化、新颖化”特征的工业中小企业。“专”是指采用专项技术或工艺通过专业化生产制造的专用性强、专业特点明显、市场专业性强的产品。其主要特征是产品用途的专门性、生产工艺的专业性、技术的专有性和产品在细分市场中具有专业化发展优势。“精”是指采用先进适用技术或工艺,按照精益求精的理念,建立精细高效的管理制度和流程,通过精细化管理,精心设计生产的精良产品。其主要特征是产品的精致性、工艺技术的精深性和企业的精细化管理。“特”是指采用独特的工艺、技术、配方或特殊原料研制生产的,具有地域特点或具有特殊功能的产品。其主要特征是产品或服务的特色化。“新”是指依靠自主创新、转化科技成果、联合创新或引进消化吸收再创新方式研制生产的,具有自主知识产权的高新技术产品。其主要特征是产品(技术)的创新性、先进性,具有较高的技术含量,较高的附加值和显著的经济、社会效益。关于博鹭腾广州博鹭腾生物科技有限公司坐落于广州科学城,是一家集生命科学仪器设备的研发、生产、服务于一体的国家高新技术企业,目前已开发并上市了多款具有自主知识产权的产品,形成了分子影像、蛋白凝胶预制及印迹处理系统、发光检测、活体成像四个系列,用户包括清华大学、中山大学、西北农林科技大学等上百家高校及科研单位。作为市级“专精特新”(两高四新)企业,未来,博鹭腾将继续精耕生命科学仪器领域,变革传统制造模式,加大创新力度,进一步提升产研能力,力争更好、更优、更先进,助力国产生命科学仪器快速发展!(文源:广州博鹭腾)

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2021.12.21

BLT小课堂|细菌发光原理及其在动物活体成像中的应用

夏季的夜晚,走到山间草丛,可以看到一种昆虫提着一盏灯在飞行,这就是萤火虫在发光。萤火虫体内的荧光素酶催化底物荧光素,发生化学反应,产生光子。这也是大家比较熟悉的,在动物活体生物发光成像当中运用到的反应原理。通过利用该原理,配合上转基因技术及动物活体成像系统,我们可以非侵入性和纵向研究小动物的基因表达、蛋白质-蛋白质相互作用、肿瘤学机制和抗肿瘤药物药效及动力学和疾病机制等;相比于传统研究手段,这种方法通过在动物整体水平上进行研究,能提供更多有用的信息,同时大幅减少实验研究所需的动物数量和降低个体间的差异。萤火虫荧光素酶反应的示意图(a)、荧光素酶以报告基因的形式进入细胞核,并翻译成功能性酶。该酶将底物荧光素、氧(O2)和三磷酸腺苷(ATP)转化为氧荧光素、二氧化碳(CO2)和二磷酸腺苷(ADP),同时发光。(b)、萤火虫底物D-荧光素及其产物氧合荧光素的化学结构。     那么问题来了,自然界会发光的生物除了有萤火虫,还有鱼类、藻类、植物和细菌等,这些生物的发光原理是否也和萤火虫一样呢?这些发光原理能否运用到动物活体成像研究中呢?今天,小编就为大家介绍另外一种生物发光原理—细菌发光及其在动物活体成像中的应用。细菌荧光素酶对于细菌的生物发光现象,早在1875年就被发现了,研究人员Boyle首先揭示了细菌发光对氧气的依赖。而随着研究的深入,研究人员发现细菌发光涉及到的酶有荧光素酶、脂肪酸还原酶和黄素还原酶,以及底物还原性黄素单核苷酸和长链脂肪醛。在发光细菌中发现的一种操纵子,基因顺序为luxCDABEG,其中luxA和luxB基因分别编码细菌荧光素酶α和β亚基,luxC、luxD和luxE基因分别编码合成和回收荧光素酶醛底物的脂肪酸还原酶复合物的r、s和t多肽,luxG编码黄素还原酶。到目前为止所知的所有发光细菌,都是基于细菌荧光素酶介导的酶反应来产生光。这是一种大约80kDa的异二聚体蛋白,与长链烷烃单加氧酶具有同源性。该酶通过以下反应介导O2氧化还原的黄素单核苷酸(FMNH2)和长链脂肪族(脂肪)醛(RCHO),以产生蓝绿光。细菌荧光素酶介导的酶反应1细菌发光明场图2细菌发光发光图细菌发光反应过程在发光反应中,FMNH2与酶结合,然后与O2相互作用,形成黄素-4A-过氧化氢。这种复合物与醛结合形成一种高度稳定的中间体,其缓慢的衰变导致FMNH2和醛底物的氧化和发光,反应的量子产率估计为0.1-0.2个光子。该反应对FMNH2具有高度特异性,体内的醛底物可能是十四醛。FMNH2是由NADH:FMN氧化还原酶(黄素还原酶)提供,该酶从细胞代谢(如糖酵解和柠檬酸循环)中产生的NADH中提取还原剂,还原剂通过自由扩散从FMNH2向荧光素酶的转移。长链醛的合成是由脂肪酸还原酶复合物催化。与细菌荧光素酶一样,底物FMNH2和长链脂肪醛也是细菌发光反应的特异性底物;真核生物生物发光使用不同的化学物质和荧光素酶,它们在蛋白质或基因序列水平上与细菌荧光素酶不同。细菌中的荧光素酶反应过程细菌发光原理在动物活体成像中的应用目前,细菌发光原理在动物活体成像研究中的应用有:传染病研究、菌种抗药性测试及细菌介导的肿瘤治疗等。通过将luxCDABE操纵子稳定地整合到不同的细菌基因结构中,不需要任何其他外源底物(除了氧)来产生生物发光,再通过一套超灵敏的动物活体成像系统(AniView 100),为监测细菌物种感染负担、致病机理研究和肿瘤药物靶向治疗等提供了一种快速便捷的研究检测方法。AniView 100检测减毒鼠伤寒沙门氏菌体内靶向性肿瘤情况(箭头指向为肿瘤)应用说明如以细菌介导的肿瘤治疗为例,传统的癌症治疗方法是手术切除,治疗转移性癌症还需要与其他疗法(如放疗或化疗)相结合。这些疗法存在局限性,如放疗的疗效主要取决于组织氧水平,肿瘤内坏死区和缺氧区低氧浓度是治疗失败的常见原因;而化疗的疗效主要取决于药物的分布,肿瘤内坏死区和缺氧区的血管不规则会影响药物的输送,限制药物的疗效。与传统方法相比,使用细菌进行癌症治疗有以下优势:首先,细菌会在肿瘤中选择性积累,肿瘤中的细菌聚集量大约是正常器官的1000倍,肿瘤特有的坏死区和缺氧区一般不会在大多数器官中形成。其次,细菌的增殖能力使得它们可以进行持续治疗;最后,许多细菌的全基因组测序已经完成,能够通过基因组操作提高它们在人类使用中的安全性,并增强其杀瘤效果。目前,细菌介导的肿瘤治疗广泛应用于DNA或siRNA的传递、运送经工程改造的毒素或前药物和触发机体免疫反应,进而达到抑制或杀灭肿瘤细胞、起到抗击肿瘤的作用。应用案例  静脉注射3天后,表达lux的鼠伤寒沙门氏菌在各种肿瘤中积聚。CT26:小鼠结肠癌,4T1:小鼠乳腺癌,MC38:小鼠结直肠腺癌,TC-1:小鼠肺癌,Hep3B:人肝细胞癌,ARO:人甲状腺癌,ASPC1:人胰腺癌应用案例    携带受L-阿拉伯糖诱导启动子pBAD表达系统控制的细胞毒蛋白(溶细胞素A)、表达lux报告基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌,用于肿瘤治疗。总结利用生物发光原理进行动物活体成像,目前主要有两种方式。一种是使用萤火虫荧光素酶,最适合在哺乳动物细胞中表达;另外一种是细菌荧光素酶,广泛应用于原核生物。细菌Lux操纵子由于编码生物发光所需的所有蛋白质,包括荧光素酶、底物和底物生成酶,不需要外源底物,成像更加的方便,不需要像萤火虫荧光素酶一样,考虑ATP的可用性、底物分子的渗透、药代动力学和生物分布等对成像的影响。但是,细菌荧光素酶的发射波长较短(490nm),组织吸收较大,这会影响成像数据的量化;而且,对于某些真核微生物(包括真菌和寄生虫)和真核细胞,仍然需要使用萤火虫荧光素酶标记,原因在于lux报告基因没有得到足够的优化,还不能在真核细胞中稳定表达。不过由于细菌荧光素酶和萤火虫荧光素酶的发射波长不同,从而可以进行多光谱成像,用于同时定量评估小动物的不同生物过程,进一步扩展生物发光原理在动物活体成像中的应用。TipsAniView 100多模式动物活体成像系统     AniView 100多模式动物活体成像系统作为广州博鹭腾生物科技有限公司推出的高灵敏度动物活体成像系统,其采用全密闭抗干扰暗箱,避免外界光源及宇宙射线对拍照影响的同时,配合零缺陷、科研级高灵敏背部薄化、背部感应型冷CCD相机,极大地提高成像的灵敏度。AniView 100可以检测到参考文献1、Hastings JW. Cell Physiology Source book 2012.2、Nguyen V H et al. Cancer Research, 2010, 70(1):18-23.3、 Nguyen V H et al. Nuclear Medicine & Molecular Imaging, 2016.4、 Dunlap P . ADVANCES IN BIOCHEMICAL ENGINEERING BIOTECHNOLOGY, 2014.5、Keyaerts Marleen et al. Trends in molecular medicine,2012,18(3).6、 Nathan K. Archer et al. Springer International Publishing, 2017.7、Doyle T C et al. Cellular Microbiology, 2004, 6(4):303-317.8、Avci P et al. Virulence.

应用实例

2021.12.21

文献速递│动物活体成像系统在前列腺癌治疗研究中的应用

前列腺癌(Prostate cancer, PCa)是男性最常见的肿瘤之一。对于局部晚期和转移性前列腺癌,雄激素去势治疗最初有效,但最终会发展为耐去势,导致治疗效果差,死亡率高。紫杉醇(Docetaxel, DTX),一种紫杉烷类药物,已被证实可以延长总生存期的标准化疗药物;然而,因为耐药性和严重的副作用,限制了其在癌症化疗中的应用。因此,需要开发生物相容的药物释放平台以减少目前化疗的全身副作用,提高抗癌效果。 ▲ 前列腺癌                                  ▲  紫杉醇随着纳米药物的发展,利用肿瘤微环境响应性的载药纳米传递系统已成为一种很有前途的肿瘤化疗策略。肿瘤细胞相比正常细胞,会产生更高水平的活性氧(Reactive oxide species, ROS),具有活性氧响应性功能基团(如草酸酯键、硫酮)的载药纳米颗粒在肿瘤细胞中可以发生化学结构的变化,进而触发药物释放;同样,肿瘤细胞中的谷胱甘肽(Gltathione,GSH)水平比细胞外基质高出1000倍,含有二硫键(Disulfide bonds, SS)的谷胱甘肽反应性载药纳米颗粒也能在肿瘤细胞内优先释放药物。目前已有载药纳米颗粒被开发出来同时对ROS和GSH做出反应,这为PCa化疗设计无毒、双重响应性纳米颗粒具有重要的参考意义。 ▲ 活性氧产生及种类                     ▲  谷胱甘肽近日,中山大学附属第七医院肾泌尿外科中心庞俊教授课题组针对肿瘤细胞中丰富的ROS和GSH,成功地设计并开发了一种独特的双响应纳米载体(PCL-SS)用于DTX的传递和前列腺癌的治疗。负载DTX的PCL-SS纳米颗粒不仅在正常生理环境中稳定,而且能迅速触发前列腺癌细胞释放DTX。体外实验表明,PCL-SS@DTX纳米颗粒具有良好的生物相容性,对前列腺癌细胞有较强的细胞毒作用,能抑制细胞迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。在荷前列腺癌小鼠体内,PCL-SS@DTX纳米颗粒可在原位肿瘤部位蓄积,通过抑制前列腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡而显著抑制肿瘤生长,且对主要器官无明显损伤。有理由相信,这种双响应性纳米给药系统可能为前列腺癌化疗提供一种有前途的治疗选择。相关成果已发表在国际知名期刊《Materials Science and Engineering: C》。▲  前列腺癌原位治疗中PCL-SS@DTX纳米颗粒的制备及ROS和GSH触发DTX释放的示意图▲  不同药物组对原位前列腺癌的体内抗癌作用。(A)、实验计划和实施的时间表。(B)、使用博鹭腾AniView100拍摄的DU145荷瘤小鼠经不同药物组处理后的体内生物发光图像。(C)和(D)为各组前列腺肿瘤组织的照片和重量。(E)、不同药物组小鼠体重变化,箭头表示静脉给药的时间点。▲  使用博鹭腾AniView100拍摄的游离DiR和PCL-SS@DiR纳米颗粒在DU145前列腺原位移植瘤小鼠体内的荧光分布图。(A)、DU145荷瘤小鼠静脉注射游离DiR和PCL-SS@DiR纳米颗粒后的体内荧光图像。(B)、静脉注射24小时后主要器官和肿瘤组织的体外荧光图像。(C)、主要器官和肿瘤组织的荧光强度的定量分析。参考文献:[1] Lzab C, et al. Reactive oxygen species and glutathione dual responsive nanoparticles for enhanced prostate cancer therapy[J]. Materials Science and Engineering: C, 2021.

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2021.12.20

【中标喜讯】连中7标,火力“标”升!

近日博鹭腾活体成像系统在四川大学华西医院内蒙古医科大学中医学院内蒙古自治区人民医院山西省人民医院山西省眼科医院深圳大学附属华南医院中国林科院林木遗传育种国家重点实验室竞标项目中凭借自主研发设备的卓越性能务实的产品理念优质的服务体系顺利中标!(以上排名不分先后)”衷心感谢以上单位对国产自主研发设备的信任,以及对博鹭腾产品质量及研发实力的认可!博鹭腾将继续开拓创新,为中国的科研事业贡献自己的力量!1四川大学华西医院四川大学华西医院是中国西部疑难危急重症诊疗的国家级中心,也是世界规模第一的综合性单点医院,拥有中国规模最大、最早整体通过美国病理家学会(CAP)检查认可的医学检验中心。医院现有包括生物治疗国家重点实验室、2011生物治疗协同创新中心、转化医学国家重大科技基础设施、国家老年疾病临床医学研究中心在内的国家及省部级研究平台及重点实验室39个、基础研究室38个、临床研究所/室21个、科研支撑机构及公共服务平台7个。2内蒙古医科大学中医学院内蒙古医科大学中医学院前身是内蒙古医学院中蒙医系,成立于1958年,是全国西医院校中设置中医学专业较早的系部之一。2004年9月经上级批准更名为“中蒙医学院”;2006年12月中医和蒙医分为2个学院,成立了“内蒙古医学院中医学院”。3内蒙古自治区人民医院内蒙古自治区人民医院成立于1947年,历经70年的建设发展,现已成为集医疗、科研、教学、预防、保健、急救为一体的全区最大的“三级甲等”综合性医院。医院先后荣获全国“五·一”劳动奖状,全国百姓放心示范医院,全国卫生系统先进集体,全国科技、文化、卫生三下乡先进集体,全国“百佳医院”、全国精神文明建设先进单位,全国医院文化工作先进单位,内蒙古自治区“五一”劳动奖状、首府百姓最满意品牌医院(连续七年)等50多项国家级和自治区级荣誉。4山西省人民医院山西省人民医院(山西医科大学附属人民医院)创建于1953年,1955年建成开诊,是直属于山西省卫生健康委员会的一所集医疗、教学、科研、预防、康复、保健、急救为一体的综合型三级甲等医院,是山西省最大的医疗机构之一,担负着包括急危重症在内的各种医疗救治、突发公共卫生应急和重大任务抢险以及干部保健等职能,医疗服务范围遍及全省各地及周边省份。5山西省眼科医院山西省眼科医院是于1978年在原山西省工农兵医院的基础上创建而成,是华北地区最早开设的省级眼科专科医院。经过40年的发展,目前已成为一所集医疗、科研、教学和防盲为一体的省级三级甲等眼科专科医院。同时还是山西医科大学附属眼科医院、山西省眼科研究所、山西省红十字眼科医院、国际奥比斯地面培训中心和卫生部国际紧急救援网络医院、山西省眼科住院(专科)医师培训基地。6深圳大学附属华南医院深圳大学附属华南医院是深圳市政府按照三级甲等医院规模打造,重点投入建设的市属公立医院,是深圳大学的直属附属医院,坐落于深圳市龙岗区平湖街道,建筑面积约32.77万平方米,是深圳当前最大的集医教研于一体的单体医院。7中国林科院林木遗传育种国家重点实验室林木遗传育种国家重点实验室是我国林学学科唯一国家重点实验室(以下简称“实验室”),由中国林业科学研究院与东北林业大学联合共建,2011年获批建设,2014年通过建设期验收。实验室的前身是“国家林业局林木培育重点实验室”和“林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室”。实验室面向现代林业发展的国家战略需求,开展基础与应用基础研究,系统研究林木功能基因组,揭示林木重要目标性状形成的分子生物学基础,培育林木优质新品种,为我国现代林木育种的发展做出重大创新性贡献。博鹭腾广州博鹭腾坐落在广州高新技术产业示范基地-广州科学城,公司拥有一支由多名博士、硕士研究生组成的高水平研发管理团队,为广大科研工作者提供一站式完整解决方案。从自主核心软硬件产品研发到整体解决方案,博鹭腾始终坚持科技创新,致力于为广大科研工作者提供优质的国产设备和全方位的服务。同时,博鹭腾也一直在不断学习、开拓,始终保持着一颗向上的心,力争更好、更优、更先进,助力国产生命科学仪器快速发展。现在,博鹭腾的活体成像系统正在成为越来越多CRO企业、医院和学校等研究机构的选择。未来,博鹭腾将更加全力以赴,力争取得更优异的成绩!

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2021.12.17

【中标喜讯】博鹭腾活体成像系统再次进驻院士单位!

2021年11月18日,中国科学院公布,根据《中国科学院院士章程》《中国科学院院士增选工作实施细则》《中国科学院外籍院士选举办法》等规定,2021年中国科学院选举产生了65名中国科学院院士和25名中国科学院外籍院士。其中生命科学和医学学部10人(详见下图)。祝贺 CONGRATULATE祝贺四川省人民医院杨正林教授当选为中国科学院生命科学和医学学部院士!杨正林,男,教授,博士生导师,中共党员,1966年6月出生,四川邛崃人。现任四川省医学科学院·四川省人民医院院长、电子科技大学医学院院长。长期致力于临床检验诊断学与医学遗传学的临床和科研工作,带领团队入选国家自然科学基金委创新研究群体、科技部重点领域创新团队、中国医学科学院院外创新单元;立足临床工作的同时,在视网膜疾病致病机制、分子诊断和防治领域取得了系统性和创新性的研究成果,广泛用于疾病的诊断和防治。中标喜讯 GOOD NEWS近日,广州博鹭腾多模式动物活体成像系统在杨正林院士所在单位——四川省人民医院,凭借自身卓越的性能、配置和服务在竞争中脱颖而出,顺利中标!感谢四川省人民医院用户及专家对国家自主研发品牌的信任,以及对博鹭腾产品质量和研发实力的认可!# 再次进驻院士单位 #这是博鹭腾继清华大学生命科学学院谢道昕院士、西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室康振生院士、陆军军医大学西南医院卞修武院士之后,再次进驻院士单位。博鹭腾非常荣幸能够为广大医务人员及科研工作者服务,今后,博鹭腾将继续开拓创新,为中国的科研事业贡献自己的力量!项目单位介绍 PROJECT四川省医学科学院·四川省人民医院,始建于1941年,是一所集临床医疗、干部保健、医学科研与医学教育为一体的三级甲等综合性医院。

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2021.12.01

文献速递ㅣ植物活体成像在藻类研究中的应用

● 快讯近日,中国科学院烟台海岸带研究所,中国科学院海岸环境过程与生态修复重点实验室的吕剑,张翠和武君研究团队在《Frontiers of Environmental Science & Engineering》(IF=3.85)发表了题为“Removal of steroid hormones from mariculture system using seaweed Caulerpa lentillifera ”的研究论文,揭示海水养殖系统中不同种类的海藻对类固醇激素的去除作用。海水养殖是提高沿海地区经济和生活水平的最重要产业之一。然而,海水养殖系统会产生各种污染物,并排放到环境中,对生态和健康造成有害影响。只有减少与海产养殖活动相关的负面环境影响,才可以实现该行业的长期可持续性。在循环式水产养殖过程中的污染物,如含氮废物和类固醇激素的不断积累,对水产养殖系统的负面影响最为显著。本文研究不同海藻(海葡萄、石莼、龙须菜和刺松藻)在海水养殖系统中对类固醇激素(Steroid hormones)的去除率。研究人员对不同种类的活海藻样品在用17β-雌二醇(E2)和17α-乙炔雌二醇(EE2)处理 24 小时后,立即使用 PlantView 100 植物活体成像系统观测海藻中有机污染物 E2 和 EE2 在海藻中的分布。结果显示,海葡萄对类固醇激素的去除效果最好。海葡萄在12小时内,通过初始快速生物吸附、缓慢积累和生物降解等过程,对浓度为10 μg/L 的E2 或 EE2 去除率超过90%。说明,利用海葡萄可以同时去除海水养殖废水中的类固醇激素和营养物质,同时也表明海葡萄在水温相对较高的工业化海水养殖系统中具有良好的应用前景。通过使用植物活体成像系统进行了长达三周的连续追踪成像后,海葡萄仍然能够同时有效地去除E2和EE2。综上结果表明,利用海葡萄可以同时去除海水养殖废水中的类固醇激素和营养物质。本研究中,E2或EE2在藻类中的积累结果(3D数据视图),由广州博鹭腾生物科技有限公司的PlantView100植物活体成像系统软件进行拍摄与分析

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2021.11.16

文献速递|动物活体成像系统在纳米医学领域中的应用

● 快讯近日,同济大学附属东方医院乳腺肿瘤科主任董春燕教授课题组联合化学科学与工程学院石硕教授课题组开展了跨学科合作研究,证明纳米制剂可以用于三阴性乳腺癌(TNBC)的联合治疗,针对TNBC的多种治疗方式是一种创新的策略。相关研究成果已发表在国际知名期刊《Small》(IF: 13.3,JCR1区)。图1|国际知名期刊《Small》(IF: 13.3,JCR1区)传统的化疗具有肿瘤多药耐药性和非靶向毒性,不能显著改善TNBC的预后,且TNBC极具侵袭性和转移性,因此,迫切需要在TNBC治疗中寻找具有独特作用模式的治疗药物。铁下垂(Ferroptosis,又名铁死亡)是一种新的非凋亡性细胞死亡方式,由铁依赖的毒性过氧化脂质(Lipoid-ROS)积聚所致。由于其在杀死癌细胞方面的有效性,最近受到了广泛的关注,但是细胞内Fe2+含量不足严重影响了其效果。研究表明,谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)也可引起铁下垂。直接使用Gpx4抑制剂(如ML210)消耗谷胱甘肽,将使得Gpx4失活,最终引起过氧化脂质(LPO)大量生成,导致细胞铁死亡。博莱霉素(BLM)是一种糖肽类抗生素,与Fe2+等氧化还原活性金属离子结合后具有独特的抗癌活性,成为治疗多种人类恶性肿瘤的有效抗癌药物。然而其对正常组织的高毒性,尤其是对肺的毒性,使其在癌症治疗中的进一步临床应用仍具有极大的挑战性。为了更好的治疗TNBC,董春燕教授和石硕教授课题组跨学科合作研究,提出了多种治疗方式协同治疗TNBC的新策略。通过将单宁酸(TA)、BLM和Fe3+形成的金属-酚类网络与负载Gpx4抑制剂(ML210)的中空介孔普鲁士蓝(HMPB)纳米管混合,制备了HMPB/ML210@TA-BLM-Fe3+(HMTBF)纳米复合物,以促进TNBC的铁下垂/凋亡协同治疗作用。实验结果显示,HMTBF可以通过增强渗透性和滞留效应(EPR)有效地靶向肿瘤区域。肿瘤细胞内化后,TA介导的Fe3+/Fe2+转化可启动Fenton反应,使细胞内活性氧水平急剧上调,引起LPO积累,从而导致细胞铁死亡,同时释放的ML210能有效抑制Gpx4激活铁下垂途径的活性。此外,Fe2+与BLM的螯合作用导致BLM在肿瘤部位的原位毒化,进而触发肿瘤细胞的凋亡,与铁下垂协同治疗肿瘤。这些结果表明HMTBF纳米制剂可作为有效的铁下垂和凋亡诱导剂用于TNBC的联合治疗,对TNBC的治疗策略具有重要的参考意义!图2|实验方案示意图a)、HMTBF纳米复合物的制备b)和c)、肿瘤特异性ROS的产生、Gpx4抑制和BLM原位转变为活化的BLM用于协同铁下垂/凋亡TNBC治疗文章中,验证HMTBF在4T1荷瘤小鼠的生物分布和肿瘤靶向性活体实验成像,使用了博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄。尾静脉注射小鼠游离ICG及ICG-HMTBF,并在注射后不同时间段使用AniView100获得小鼠体内、解剖器官和肿瘤的荧光图像。结果显示ICG-HMTBF在肿瘤部位的荧光信号在注射2h后开始出现,注射12h后逐渐增强并达到最大值,并在注射24h后仍保持较强的荧光信号(图a,b),表明ICG-HMTBF在特定的肿瘤组织中蓄积增强,滞留时间延长。相对地,游离ICG在肿瘤部位只出现极弱的荧光信号,并且在12h内进一步减弱,表明非特异性分布的游离ICG可迅速从体内清除。体外荧光图像和半定量数据显示,肿瘤部位的荧光强度约为其他器官的3.7-162.2倍(图c,d),说明HMTBF对肿瘤组织有明显的富集作用。此外,HMTBF注射4h后在肿瘤内的分布为9.9%ID/g,注射12h后达最大值,为典型的EPR效应所致。同时,由于网状内皮系统的捕获,HMTBF也分布在肝脏和脾脏。图3|HMTBF的体内外分布情况a)、ICG和ICG-HMTBF静脉给药后在小鼠体内的分布情况,红色圆圈代表肿瘤b)、肿瘤组织在不同时间点的荧光强度c)、解剖器官和肿瘤在12h的典型荧光图像d)、半定量分析解剖的脏器和肿瘤组织在12h的荧光强度论文链接:1、https://doi.org/10.1002/smll.202103919

应用实例

2021.11.04

BLT小课堂丨植物蛋白互作技术

我们的世界物种多种多样,而与我们人类生存关系最密切的就是植物。随着时间的推移与科技的进步,人类在逐步揭示自身基因真相的同时,也在不断探寻植物基因的种种功能。其中,蛋白质是植物生命活动的主要承担者。因此,在植物学相关研究中,蛋白质之间的相互作用是研究的重要基础和手段。目前,研究蛋白质-蛋白质相互作用常用方法主要包括:酵母双杂交技术 (Yeast Two-hybrid, Y2H)、双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)、免疫共沉淀技术(Co-Immunoprecipitation, CoIP)及荧光共振能量转移技术(Fluorescence Resonance Energy  Transfer, FRET)等,以及近几年来逐步应用到的萤火虫荧光素酶互补技术(Firefly luciferase complementation imaging assay, LCI)。面对众多的技术,您是否也苦恼过,到底哪种技术更加适合我的实验呢?要选择哪些技术相互搭配才更加高效呢?面对这一连串的疑问,不要惊慌,今天小编准备了一篇技术简报,一起了解一下各类蛋白互作技术。酵母双杂交技术(Y2H)酵母双杂交技术是将待研究的两种蛋白质分别克隆(融合)到酵母表达质粒的转录激活因子的DNA结合结构域(DNA-BD)和转录激活域(AD)上,通过2 个结构域的结合,从而调控目的基因的转录过程。这两个结构域分开时仍分别具有功能,但不能激活转录,只有当被分开的两者通过适当的途径在空间上较为接近时,才能重新呈现完整的转录因子活性,并可激活上游激活序列(upstream activating sequence,UAS)的下游启动子,使启动子下游基因得到转录。优点:① 操作简单,方便快捷,实验成本较低;② 可快速、大量筛选蛋白互作组;③ 灵敏度高,可检测存在于微弱或暂时蛋白相互作用。缺点:① 自身转录蛋白往往会造成假阳性的结果;② 蛋白过量表达时对酵母产生毒性,使得酵母无法正常生长;③ 无法检测细胞核外的蛋白互作。双分子荧光互补技术(BiFC)双分子荧光互补技术本质上是一种蛋白质片段互补技术,是指将荧光蛋白多肽链切开并形成不发荧光的 N-和 C-末端2个多肽片段。当目标蛋白质相互作用时,2个片段重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子,即可产生荧光。优点:① 灵敏度高,直观可视;② 可以对在动物、植物和细菌等不同的宿主细胞中蛋白进行定位和互作强度分析;③ YFP,RFP等荧光标记选择多样。缺点:① 对温度条件要求较高,温度越低,越有利于片段之间的互补;② 有时2个不发光的荧光片段会发生自发融合的情况,出现假阳性的结果。免疫共沉淀技术(CoIP)借助抗体和抗原之间的专一性,确定两种蛋白质在完整细胞内生理性的相互作用。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。优点:① 常被用于鉴定特定蛋白复合物中未知的蛋白组分;② 可分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点:① 可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白互作;② 两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用,也可能出现假阳性的结果;③ 对抗体选择和实验者操作技术要求较高。荧光共振能量转移技术(FRET)基于两个荧光基团间能量通过偶极-偶极耦合作用以非辐射方式从供体传递给受体的现象,可用于测定分子间的距离。在两个不同的荧光基团中,如果一个荧光基团(供体 Donor)的发射光谱与另一个基团(受体 Acceptor)的吸收光谱有一定的重叠,当这两个荧光基团间的距离合适时(一般小于100Å),就可观察到荧光能量由供体向受体转移的现象,即以前一种基团的激发波长激发时,可观察到后一个基团发射的荧光。优点:① 适用于活细胞和固定细胞的各类分子,② 灵敏度更高,成像更清晰,最直观地提供蛋白质相互作用的定位和定量信息。缺点:① 能量供体与能量受体的光谱、排列方式、量子产率、消光系数、水溶性、抗干扰能力等方面要求较高。② 需要更加精密的仪器,技术难度更高,操作更复杂。荧光素酶互补法(LCI)最初开发用于检测哺乳动物活细胞中的蛋白质-蛋白质相互作用,但后来被用于植物的研究中。借助于烟草的瞬时表达系统,将含有融合蛋白的表达载体转化农杆菌后注射烟草叶片,培养2-3天后,在注射部位均匀涂抹反应底物。通过植物活体成像系统和高灵敏度发光检测仪检测生物发光的强度,从而对蛋白之间的相互作用进行定性和定量分析。此方法已被广泛应用于动植物相关领域的蛋白质互作研究。原理:将荧光素酶蛋白分为N端和C端2个功能片段, 即NLuc和CLuc。待测的2个目的蛋白分别与NLuc和CLuc融合。当2个目标蛋白相互作用将NLuc和CLuc紧密结合,恢复荧光素酶的催化活性,促使荧光素酶底物氧化而发光。优点:① 高度定量,允许在几个数量级的范围内对发光信号进行线性测量。② 与FRET和BiFC相比,此法可对整个组织或细胞群进行采样,避免了来自单个细胞的偏差。③ 在黑暗中测量发光,不受叶绿素和细胞壁产生的自荧光的影响。④ 可用于在组织水平上研究蛋白质-蛋白质相互作用,该技术对于研究组织特异性蛋白质-蛋白质相互作用非常有用。⑤ 无需显微镜,通过使用植物活体成像系统和板式发光检测仪可以在1-2分钟内收集数据,进行定性和定量分析,同时检测大量的蛋白质组。⑥ 需要最少的样品处理和实验室培训,操作简便,实验高效。⑦ LCI作为植物蛋白质相互作用研究的简单工具的可用性将有助于验证从酵母双杂交分析中收集的蛋白质相互作用组数据。⑧ 实验周期更短,实验从零开始,只需1-2个月便可得到稳定的实验结果。   实验方法   ① 分别将待测蛋白质的基因克隆到含有CLuc和NLuc编码序列的质粒中,然后将所得质粒转入农杆菌中。② 将含有这两种质粒的农杆菌细菌浸入本氏烟草中,以便重组DNA可以被传递到植物细胞中并稳定表达。③ 收集表达测试蛋白质的叶组织,通过植物活体成像系统和高灵敏度发光检测仪检测生物发光的强度,从而对蛋白之间的相互作用进行定性和定量分析。技术总结上述5种技术中应用最广泛的是Y2H,它可以大规模筛选相互作用的蛋白对,然而,其检测有一定的假阳性率和局限性。CoIP则需要特定抗体,受如蛋白质提取、结合和洗涤方案等实验操作影响较大,使得每个实验室的结果往往是不同的。FRET分析技术都需要精密的显微镜和计算,在植物上的应用依旧困难重重。与FRET相比,BiFC相对简单,已用于许多植物蛋白质-蛋白质相互作用研究,但由于细胞壁、叶绿体和其他细胞结构产生的自荧光,FRET和BiFC分析在植物中的应用与检测方法变得十分复杂。最后,由外部光源激发荧光引发的干扰,也使其在植物中的应用受限。因此,采用荧光素酶互补法就具有重要意义。萤火虫荧光素酶的氨基末端和羧基末端只有在融合到两个相互作用的蛋白质上时才能重建活性荧光素酶,可使用植物活体成像系统来进行观测。其技术简便、可靠、灵敏度高、定量,并已获得很多文献的支持,可用于相互作用蛋白的瞬时表达或稳定的转基因表达。

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2021.10.29

中标喜讯 | 博鹭腾活体成像系统捷报频传!

喜报近日,广州博鹭腾多模式动物活体成像系统在“中美瑞康核酸技术(南通)研究院有限公司”、“南京大学”的竞标中,凭借自主研发设备的卓越性能和优质服务体系顺利中标!衷心感谢以上单位对国产自主研发设备的信任,以及对博鹭腾产品质量及研发实力的认可!博鹭腾将继续开拓创新,为中国的科研事业贡献自己的力量!项目单位介绍中美瑞康核酸技术(南通)研究院有限公司中美瑞康是一家新药研发企业,致力于研发以“RNA激活”技术为核心的创新型药与疾病治疗方法。RNA激活(RNAa)技术是目前唯一能够实现内源性基因激活并已进入临床验证的颠覆性技术, 它通过重新开启内源性基因的表达、恢复蛋白质的天然功能来治疗疾病,有望填补现有靶向治疗药物只能抑制靶基因靶蛋白表达的巨大空白。南京大学鼓楼校区南京大学(Nanjing University),简称“南大”,是中华人民共和国教育部直属的全国重点大学,中央直管高校,位列“双一流”A类、“211工程”、“985工程”重点建设高校。南京大学鼓楼校区为南京大学四大校区之一,全国重点文物保护单位金陵大学旧址所在地。博鹭腾广州博鹭腾作为国产自主研发高端生命科学仪器制造商,坐落于广州高新技术产业示范基地-广州科学城,公司拥有一支由多名博士、硕士研究生组成的高水平研发管理团队,为广大科研工作者提供一站式完整解决方案。现在,博鹭腾的活体成像正在成为越来越多CRO企业、高校、医院等研究机构的选择。未来,我们将不断创新,成为优秀生命科学仪器及试剂供应商,做行业先锋,创国际品牌。

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2021.10.19

中标喜讯 | 博鹭腾活体成像系统连中三元!

近日,广州博鹭腾多模式动物活体成像系统在“内蒙古医科大学附属医院”、“南方医科大学皮肤病医院”、“上海市第十人民医院”的竞标中,凭借自主研发设备的卓越性能和优质服务体系顺利中标!衷心感谢以上单位对国产自主研发设备的信任,以及对博鹭腾产品质量及研发实力的认可!博鹭腾将继续开拓创新,为中国的科研事业贡献自己的力量!项目单位介绍内蒙古医科大学附属医院内蒙古医科大学附属医院创建于1958年,是一所集医疗、教学、科研和预防保健为一体的三级综合医院,获得“全国百姓放心示范医院”、“中国诚信医院AAA级示范单位”、“百佳医院”、“爱婴医院”、“医院文化建设先进集体”等荣誉称号。南方医科大学皮肤病医院南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院)始建于1964 年,前身是广东省平洲医院,历经数次机构变革,现已发展成为集医疗、科研、教学、预防为一体的大学直属附属专科医院,同时承担全省性病、麻风病防治业务指导单位职责。上海市第十人民医院上海市第十人民医院(暨同济大学附属第十人民医院),创建于1910年,1993年成为卫生部首批“三级甲等”综合性医院。博鹭腾广州博鹭腾作为国产自主研发高端生命科学仪器制造商,坐落于广州高新技术产业示范基地-广州科学城,公司拥有一支由多名博士、硕士研究生组成的高水平研发管理团队,为广大科研工作者提供一站式完整解决方案。现在,博鹭腾的活体成像正在成为越来越多CRO企业、高校、医院等研究机构的选择。未来,我们将不断创新,成为优秀生命科学仪器及试剂供应商,做行业先锋,创高端品牌。

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2021.09.28

文献速递│荷载溶瘤病毒干细胞在急性髓系白血病中的应用研究

急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia, AML)是一组具有髓系特征的多发性异质性恶性肿瘤。通过化疗、放疗、造血干细胞移植、支持性治疗和靶向治疗等方式,可以提高患者五年总存活率;但是,与其他血液肿瘤相比,AML的治疗效果较差,最常见的表现是缓解后复发。因此,对于复发和化疗耐药的患者来说,迫切需要寻找新的具有有效和可控副作用的治疗药物和技术。溶瘤病毒(Oncolytic Virus, OVS)是一类具有复制能力的肿瘤杀伤型病毒,通过直接溶解感染的肿瘤细胞和间接增强宿主的抗肿瘤免疫力来介导肿瘤细胞的破坏。其种类有:新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)、单纯疱疹病毒-1(Herpes simplex virus-1, HSV-1)、呼肠孤病毒(Reovirus)和溶瘤腺病毒(Oncolytic adenovirus)等。由于OVS优先破坏肿瘤细胞,而对正常细胞无害,同时越来越多的研究证据表明,AML细胞感染溶瘤病毒会显著增加肿瘤细胞的死亡率,这为AML的治疗提供了新的方法和思路,已经在多个临床试验中进行了安全性和可行性的探索。然而,B淋巴细胞会对血液循环中的OVS产生中和抗体(Neutralizing Bntibodies、NAbs),从而阻止病毒的传播,最终会降低病毒的治疗效果。▲  OVS的双重作用模式,优先靶向并杀死癌细胞,而对正常细胞几乎没有有害的影响间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是一类存在于多种组织(如骨髓、脐带血和脐带组织、胎盘组织、脂肪组织等),具有多向分化潜力的多能干细胞。在过去的十年中,MSCs被认为是OVS的理想载体,其原因有:(1)、MSCs为病毒提供了一个复制场所;(2)、MSCs能避免被免疫系统清除;(3)、MSCs确保病毒能到达肿瘤部位;(4)、MSCs会分泌细胞因子,增强抗肿瘤免疫反应。然而,携带溶瘤病毒的人脐带来源的间充质干细胞(Human umbilical cord-derived MSCs, Huc-MSCs)的抗肿瘤效果及其分子机制尚不清楚。▲  间充质干细胞的分化潜力近日,贵州医科大学成体干细胞转化研究重点实验室赵星和何志旭教授课题组首次报道Huc-MSCs作为呼肠孤病毒的细胞载体,并使用博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统检测携带呼肠孤病毒的Huc-MSCs和MSCs在活体内对AML的治疗效果和抗肿瘤效果。该工作有助于提升研究人员对MSCs携带OVS的抗肿瘤机制的理解,并可能为临床治疗AML提供新的策略。相关成果已在国际著名期刊《International Immunopharmacology》发表。评价携带呼肠孤病毒的Huc-MSCs在体内的治疗效果。根据荧光素酶报告基因可用于体内移植的Huc-MSCs的定量,将呼肠孤病毒(Luc-MSCs-Reo)负载于Huc-MSCs,并静脉注射注射到AML小鼠模型内。通过博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统进行成像,结果显示Huc-MSCs位置同肿瘤THP-1细胞定位相同。小鼠的Kaplan-Meier生存曲线结果表明,接受呼肠孤病毒感染的Huc-MSCs的小鼠的中位存活时间比接受裸鼠呼肠孤病毒的小鼠显著增加。这些数据证实了Huc-MSCs作为呼肠孤病毒载体具有良好的治疗效果。▲  携带呼肠孤病毒的Huc-MSCs对AML小鼠模型的治疗作用评价携带呼肠孤病毒的MSCs的体内抗肿瘤效果。建立具有免疫活性的小鼠AML模型,通过博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统进行成像,结果显示标记DIR的MSCs和呼肠孤病毒感染的MSCs对C1498肿瘤具有肿瘤归巢能力,提示携带呼肠孤病毒的MSCs维持其固有的向肿瘤细胞迁移的能力。根据各组的肿瘤体积和重量、肿瘤中的病毒RNA定量显示、治疗后小鼠血清干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α水平及免疫组织化学法观察到肿瘤中CD8的表达结果,可得MSCs有效地将呼肠孤病毒运送到肿瘤部位,并触发小鼠的免疫反应,对肿瘤生长有明显的抑制作用。这些结果证实了MSCs载体能够增强呼肠孤病毒的抗肿瘤效果。▲  携带呼肠孤病毒的MSCs对C57BL/6小鼠C1498肿瘤的治疗作用

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2021.09.06

文献速递ㅣ多模式活体成像系统在肝癌药物载体研究中的应用

肝癌是最常见的致命癌症之一。目前临床上主要采用手术切除癌变肝组织,同时以化疗、放疗等方式阻止正常肝细胞被感染恶化来治疗肝癌;但是,化疗会滥杀滥伤各组织的正常细胞,并产生极大的副作用,而且在肝癌细胞发生转移或再生后也难以治愈。因此,设计与制造出更好的用于肝癌治疗的药物,是医药研究人员亟待解决的难题。如何提高药物疗效,不仅可以从药物结构本身出发,而且可以从药物载体入手。选择新型药物载体或靶向基团,可以使有效药物分子直接作用于癌症患处,提高药物靶向性,减少药物对正常组织的伤害,减轻患者的疼痛。近日,辽宁新药研发重点实验室李丽教授课题组成功构建并制备了两种甘草次酸修饰的金属有机框架药物载体,并通过组织分布和活体成像实验,验证载体具有明显的肝靶向性。该成果已发表在纳米技术与精密工程领域国际权威期刊《Nanotechnology》。1. 甘草次酸(GA)甘草次酸(Glycyrrhetininc Acid,GA)是从中草药甘草中提取分离出来的具有抗炎、抗病毒、抗溃疡等多种药理活性的甘草酸苷元。近期研究发现,在肝细胞膜上镶嵌着许多GA特异性受体,可与GA特异性结合,因此,GA作为药物靶向分子进行修饰的药物载体已经成为研究热点和一种新的靶向性治疗肝癌的有效途径。2. 金属有机框架(MOFs)金属有机框架材料(Metal-organic Frameworks,MOFs),是一类通过组装无机金属离子与有机配体形成的具有多孔隙、高比表面积的新型材料。它的最大的优点是具有良好的生物相容性,而且会在体内特定环境中自行分解,减少药物在体内的副作用,降低耐药性,提高药物治疗效率。通过在MOFs表面修饰GA,可以实现MOFs的肝靶向性,并且MOFs的孔隙率高,具有超大比表面积,可以有效装载药物,提高载药能力。两种MOFs载体:Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA与UiO-66-NH2-GA。3. 小鼠体内靶向性研究DiR荧光染料,DiR@Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA和DiR@Uio-66-NH2-GA 在小鼠体内不同时间段的荧光成像图DiR荧光染料,DiR@Uio-66-COOH-1,4-丁二胺-GA和DiR@Uio-66-NH2-GA 在心、肝、脾、肺、肾的荧光成像图关于多模式动物活体成像系统AniView100多模式动物活体成像系统是广州博鹭腾生物科技有限公司全新推出的高灵敏度、多模式动物活体成像系统。其采用一级背部薄化、背部感光超低温CCD相机,具有极高的检测灵敏度。大功率全波长卤素灯激发光源配合精密复杂的全局光源和万向鹅颈管点状光源光路系统,再加上顶级的光谱转换能力和多组滤光片组合,极大的提高了荧光信号的特异性,并大大缩短曝光时间。

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2021.08.26

文献速递ㅣ动物活体成像系统在白血病耐药机制研究中的应用

慢性髓系白血病(Chronic myeloid leukemia, CML)是一种由造血干细胞染色体t(9;22)(q34;q11)易位引起,并在分子水平上形成Bcr-Abl融合基因的骨髓增生性疾病。使用酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors, TKIs)可以缓解疾病,但TKIs耐药性是治疗失败或诱发急性白血病的主要问题。根据Abl激酶结构域点突变的不同,TKIs的耐药机制主要包括Bcr-Abl依赖型和非Bcr-Abl依赖型。Bcr-Abl依赖型的耐药性最常见,它会干扰小分子酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Imtatinib, IM)结合和随后的激酶抑制。然而,超过50%的耐药CML患者中并没有Bcr-Abl突变。▲ 慢性髓系白血病蛋白激酶C(Protein kinases C, PKCs)在细胞周期调节、增殖、凋亡和造血干细胞分化等多种细胞过程中发挥作用,并和Bcr-Abl协调参与对恶性细胞转化至关重要的几种信号通路。实验和临床证据表明,使用PKC抑制剂可以有效地治疗CML。最近,不同的PKC亚型也被报道参与CML细胞的耐药,但是,PKC信号在CML TKIs耐药中的作用并不清楚。▲ 蛋白激酶C的晶体结构近日,贵州医科大学王季石教授课题组根据先前的研究结果:一种泛PKCs抑制剂星孢菌素(Stauroporine)在低浓度下可以有效地逆转K562R细胞(没有任何突变)的IM耐药,因此推测Bcr-Abl非依赖型IM耐药可能是由PKC亚型介导。在此基础上,鉴于白血病干细胞(Leukemia stem cells)在CML TKIs耐药中起基础性作用,研究首次在Bcr-Abl非依赖型TKI耐药的CML患者CD34+细胞中检测到9种PKCs亚型的表达。对PKC亚型异常表达所介导的机制进行深入研究时,使用博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄的活体成像实验结果,从体内进一步证明PKC-β的过表达与肿瘤耐药密切相关,表明靶向PKC-β过表达可能是克服CML耐药的一种新的治疗机制。相关成果已发表在期刊《Journal of Cellular Physiology》。▲抑制PKC-β可增强IM对CML细胞的体内杀伤作用(a) 博鹭腾AniView100拍摄的不同药物处理的CML小鼠模型中白血病细胞的活体示踪成像图。LY333531: PKCβ 抑制剂。(b) 流式细胞仪检测各组小鼠CD33+和CD45+细胞。(c) 直方图显示流式细胞仪检测的各组小鼠CML细胞的差异。(d) 各组小鼠的生存曲线。(e、f) 比较各组小鼠脾脏体积和重量。(g、h) Wright‘s染色检测各组小鼠外周血中CML的进展情况。统计学处理采用t检验。**表示p参考文献1、Ma D, et al. PKC‐β/Alox5 axis activation promotes Bcr‐Abl‐independent TKI‐resistance in chronic myeloid leukemia[J]. Journal of Cellular Physiology, 2021.2、Zubair M S, et al. Cembranoid Diterpenes as Antitumor: Molecular Docking Study to Several Protein Receptor Targets[C]// International Conference on Computation for Science & Technology. 2015.

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2021.08.20

招聘啦!看看有没有你心仪的岗位~

随着博鹭腾发展越来越好需要的人也越来越多我们这里不乏有能力的青年同时也需要有实力的你期望优秀的你早日与我们相见!关于我们广州博鹭腾生物科技有限公司坐落于广州科学城,是一家集生命科学仪器设备的研发、生产、服务于一体的国家高新技术企业,目前已开发并上市了多款具有自主知识产权的产品,形成了分子影像、蛋白凝胶预制及印迹处理系统、发光检测、活体成像四个系列,用户包括清华大学、中山大学、西北农林科技大学等上百家高校及科研单位。应用专员 (2名)职位职责:1.分子生物学产品售前技术支持工作,包括技术讲座、技术培训、Demo实验等;2.产品及客户应用支持,包括整理文献、销售及客户培训、实验方案设计等工作;3.产品资料整理与市场调查分析;4.产品评估与市场宣传、推广等工作,包括培训、讲座、合作研究等工作。应聘要求:1.分子生物学相关专业。2.硕士研究生及以上学历,实验动手能力强。3.分子生物学技术背景,熟练掌握Western Blot等分子学实验。有动物实验相关技术操作者优先;4.有较强的听、说、读、写及英语口语能力,能够阅读英文文献以及与国外技术人员沟通交流;5.有责任心、理解能力和表达能力强,善于交流,具有团队合作精神;6.能够适应出差。工作地点:广州、成都、西安薪酬:面议算法工程师(1名)岗位职责:1、三维视觉及三维重建等相关技术研发; 2、三维图像移植、三维图像拼接、三维图像变形等相关技术研发。 3、算法模块的设计开发与验证。岗位要求 :1、计算机科学、计算机视觉、图像处理、模式识别、信息科学、数学类相关专业硕士及以上学历,有独立项目经验优先; 2、有三维计算机视觉理论基础及相关项目经历,能参考文献实现算法; 3、熟悉特征提取、图像配准、相机标定、点云处理等相关算法; 4、熟悉主动/被动式三维重建算法,SFM及立体视觉技术,对图像特征检测、稀疏/稠密匹配有一定研究; 5、熟练掌握C/C++编程,熟悉OpenCV图像视觉库,有相关实际工程经验者优先。工作地点:广州薪酬:面议硬件工程师(1名)岗位职责:1、根据项目要求进行产品方案设计,原理图设计,PCB设计等;2、编制产品电路图、BOM表、规格书等资料,按要求完成设计输出;3、参与项目计划,完成样品的制作;4、按要求完成设计各阶段资料;5、产品硬件电路调试,安全性能、EMC测试及其整改;6、电子物料BOM整理,元器件选型。岗位要求:1、自动化、电子类相关专业,本科及以上学历,至少1年相关工作经验,有仪器仪表从业经验者优先;2、熟悉数字电路及模拟电路设计,对磁性元件、EMI、安规、热流等有一定的了解;3、熟悉产品开发流程、常用元器件的选择和使用、数字控制,STM32控制单板设计;4、能熟练使用office/Excel等办公软件,掌握常用EDA软件,会电路仿真,熟悉使用通用仪器,能够独立完成电路设计、调试以及测试验证工作;5、有较强的逻辑分析能力和学习能力;较好的沟通技巧和团队精神,较强的责任感及进取精神、工作认真细致有耐心。工作地点:广州薪酬:面议动物活体成像应用专家(2名)职位职责:1.动物活体成像产品售前技术支持工作,包括技术讲座,技术培训,Demo实验等;2.产品及客户应用支持,包括整理文献、销售培训、实验方案设计等工作;3.产品资料整理与市场调查分析;4.产品评估与市场宣传、推广等工作,包括培训、讲座、合作研究等工作。应聘要求:1.分子生物学、细胞生物学相关专业。2.硕士研究生及以上学历,实验动手能力强。3.分子生物学技术背景,熟练动物实验相关技术,有动物活体成像实验技能者优先;4.有较强的听、说、读、写及英语口语能力,能够阅读英文文献以及与国外技术人员沟通交流,有相关工作经验者优先;5.有责任心、理解能力和表达能力强,善于交流,具有团队合作精神;6.能够适应出差。工作地点:广州薪酬:面议简历请投至:hr@newbiochem.com我们这里有· 极具竞争力的薪酬· 五险一金· 绩效奖金· 餐饮/交通/通讯补贴· 周末双休· 公费体检· 聚餐/团建/旅游· 员工生日会· 年轻有活力的小伙伴· 轻松愉快的办公氛围· 宽松的上下班时间甜有的方式一百种最重要的一种就是每天在公司看到你风里雨里我们等你简历请投至:hr@newbiochem.com

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2021.08.17

文献速递ㅣ常用静脉麻醉药丙泊酚或致肿瘤侵袭/转移增加

● 快讯近日,上海市第十人民医院精神心理科主任、同济大学医学院麻醉与脑功能研究所常务副所长申远教授与美国哈佛大学麻省总院老年麻醉实验室主任谢仲淙教授的合作团队,历经两年的探索研究,证实常用静脉麻醉药丙泊酚(propofol)或使肿瘤侵袭/转移增加。相关论文于2021年7月15日在《先进科学》(Advanced Science,IF:16.08)在线发表。麻醉药物广泛应用于外科手术或相关临床检查,然而长久以来,麻醉药物对患者脑功能和肿瘤复发转移的影响一直存在争议。 对此,上海市第十人民医院精神心理科主任、同济大学医学院麻醉与脑功能研究所常务副所长申远教授与美国哈佛大学麻省总院老年麻醉实验室主任谢仲淙教授的合作团队,通过一系列体内、体外实验,从分子、蛋白、组织等多层面证实,常用静脉麻醉药丙泊酚(propofol)或使肿瘤侵袭/转移增加。 研究人员以结肠癌细胞为主要研究对象,通过对小鼠尾静脉注射结肠癌细胞的同时注射丙泊酚进行建模,模拟临床围术期中丙泊酚与血管内循环肿瘤细胞接触的过程。小鼠实验结果说明,丙泊酚有可能增加结肠癌细胞的侵袭转移潜能,造成肺部远处转移(见图1)。图1|标准剂量(standard-dose)丙泊酚促进结肠癌细胞在小鼠肺部的转移丙泊酚是一种γ-氨基丁酸 ( γ-Aminobutyricacid,GABA ) A受体(GABAaR)激动剂。那么,丙泊酚促进结直肠癌肺转移的作用是否是通过激动GABAaR实现的呢? 研究团队紧接着使用另一种GABAaR特异性激动剂Muscimol体外预处理肿瘤细胞后再注射入体内,同样也在小鼠肺部也发现了肿瘤转移灶的增加,初步锁定了GABAaR在其中的作用。 接下来,研究人员采用同样的体外预处理方法观察了更多肿瘤细胞,包括肺癌、子宫内膜癌细胞等,发现相对于对照组,丙泊酚能使更多的肿瘤细胞黏附到血管内皮细胞,并伴随更大的伸展面积和更多的黏着斑形成。 研究人员据此进一步锁定了研发抗癌药物的重要靶标、同时也是介导细胞黏附的重要原癌基因——Src激酶。研究表明,丙泊酚通过激活肿瘤细胞中的 GABA 受体,减少TRIM21 ,从而增加细胞粘附相关的蛋白Src的表达,增强肿瘤细胞与血管内皮细胞的粘附和伸展,从而促进肿瘤在小鼠肺内转移。抑制 Src 则可以减弱丙泊酚促进肿瘤转移的作用。 综上所述,丙泊酚可能通过调节GABAaR/TRIM21/Src信号通路促进肿瘤细胞在肺部的转移(见图2)。图2|丙泊酚可能通过调节GABAaR/TRIM21/Src信号通路促进肿瘤细胞在肺部的转移这一发现进一步证实了常用静脉麻醉药丙泊酚或致肿瘤侵袭/转移增加,对于麻醉学、肿瘤学和外科学等领域均具有非常重要的临床意义。文献链接:https://doi.org/10.1002/advs.202102079注博鹭腾助力科研实验本研究中活体成像结果由广州博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统拍摄

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2021.08.11

文献速递ㅣ植物活体成像还能用来看藻类?快来围观吧!

近日,中国科学院烟台海岸带研究所,中国科学院海岸环境过程与生态修复重点实验室的张翠,武君和吕剑研究团队在《Journal of Hazardous Materials》(IF=9.04、一区top期刊 )发表了题为“Enhanced removal of phenolic endocrine disrupting chemicals from coastal waters by intertidal macroalgae”的研究论文,揭示潮间带大型藻类对近岸海域酚类EDCs的植物修复具有重要作用。在经济快速发展和广泛的人为活动的影响下,沿海水域的生态相对比较脆弱,是环境保护与修复的重点地区。内分泌干扰物(EDCs)作为一种新的沿海水域污染物,其浓度随着季节的不断变化而变化,并对生态环境造成破坏。该文章首次研究了潮间带大型藻类对近岸海域酚类EDCs的植物修复作用。结果表明,潮间带大型藻类对双酚A(BPA)和壬基酚(NP)的去除效果与环境浓度有关,其中孔石莼对EDCs的去除率最高。在大多数情况下,EDCs去除率的大小顺序为:绿藻>褐藻>红藻。利用植物活体成像系统进行的现场监测证实了潮间带大型藻类中EDCs的积累。其去除机制包括最初的快速生物吸附过程,然后是缓慢的积累过程,以及生物降解过程。其中,BPA和NP的去除率与温度和营养盐浓度有关。初始浓度与平均去除率呈线性关系(R²>0.99)。在中试试验中,即使经过三次循环,孔石莼也能有效去除环境相关浓度(100μg/L)下的双酚A和NP。在野外调查的结果也表明,潮间带藻类群中的孔石莼对NP和BPA具备较高的去除率。综合以上这些结果表明,潮间带大型藻类对近岸海域酚类EDCs的植物修复具有重要作用。▲  本研究中,EDCs在潮间带大型藻类中的累积结果,由广州博鹭腾生物科技有限公司的PlantView100植物活体成像系统拍摄。

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2021.08.10

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