博鹭腾D-荧光素钾盐

产品参数

产品简介

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，可被催化生物发光产生典型的黄绿光，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。以ATP和Mg2+作为辅因子，有氧条件下荧光素酶与D-荧光素反应发出一种特有的黄绿色发射光，在37℃活体内转换为红光。荧光素酶的表达基因被转染在研究动物中比如大鼠、小鼠，用来标记肿瘤细胞，干细胞或传染病。通过生物荧光成像这个模式系统中注射D-荧光素可以用来实时非侵入性监测疾病的进程或药物效率。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性，也可以基于ATP对此反应体系的影响，用来指示能量或生命体征。在细胞体内水环境下，D-荧光素均是以离子形式存在，对于D-荧光素钠盐和钾盐，原理都是一样的。

产品规格

保存条件

冰袋运输；4℃干燥避光保存，-20℃储存更佳；有效期一年。

使用方法

1. 体外生物发光检测

1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，建议配制成15 mg/mL的储存液。立即使用或分装，于-20℃避光保存，避免反复冻融（注：配成溶液的D-荧光素钾盐储存时间不宜过长）；

2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至适当的工作液浓度，如：0.15 mg/mL；

3）去除原培养基，替换加有D-荧光素钾盐的培养基，37℃孵育5-10分钟；

4）然后进行图像分析。

2. 活体成像分析

1） 用无菌的DPBS (不含Mg2+、Ca2+) 溶解D-荧光素钾盐，建议配制成15 mg/mL的荧光素的注射液，混匀；

2） 用0.2 µm滤膜过滤除菌，立即使用或分装，于-20℃避光保存，避免反复冻融（注：配成溶液的D-荧光素钾盐储存时间不宜过长）；

3） 建议按照150 mg/kg的荧光素用量/体重进行注射相应的量，腹腔（IP）或皮下（SQ）注射需等待三分钟后根据所选方法（气体或注射麻醉）使其镇静，而静脉注射（IV）则需立即对动物进行镇静；

4） 为建立荧光素酶表达的动力学曲线，对于腹腔或皮下注射方法：每隔5-10分钟拍摄一次，总时长40-60分钟，对于静脉注射方法：每1-5分钟拍摄一次，总时长20-30分钟；

5） 动物模型需从动力学曲线中选择最佳的成像时间点，对于腹腔或皮下注射大约10-15分钟达到信号峰值，对于静脉注射约2-5分钟达到信号峰值；

6） 实验时选择光信号达到最强稳定平台期进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

温馨提示

1． 为了您的自身安全，实验前请做好有效防护；

2． 本品要进行避光操作和保存，配成溶液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存，配成溶液的D-荧光素钾盐储存时间不宜过长；

3． 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！