Namocell 助力NIH确立高效、安全的iPSC/hPSC单克隆技术

     2022年10月19日，美国国立卫生研究院干细胞中心的Carlos Tristan团队在《nature protocols》上发表题为“Efficient and safe single-cell cloning of human pluripotent stem cells using the CEPT cocktail”的论文（doi: 10.1038/s41596-022-00753-z），公布其确立的人多能干细胞单细胞克隆技术实验方法。文章中详尽介绍了人多能干细胞研究的各个步骤的操作方法和关键点。包括复苏，复苏后培养，染色，单克隆分选+分离，单克隆培养，细胞干性验证，克隆扩增，细胞冻存，细胞系分析等方面的内容。文中阐述了标准化的工作流程，这种先进的实验流程促进了干细胞自我更新的生存能力和适应性。为可扩展出的基因编辑，细胞系开发，疾病建模和再生医学等方面的应用奠定了夯实的基础。

人多能干细胞（hPSC）具有广泛的自我更新能力，可以分化为人体内所有的细胞类型，在基础科学和临床医学方面都具备极大的研究价值。但是hPSC又是固有的敏感细胞，在体外极易受到外部环境扰动的影响。hPSC的单克隆分离和单克隆细胞系的建立长期以来都是研究中的巨大挑战，其中细胞克隆效率低下是多能干细胞研究简化和标准化的主要障碍。NIH经过长期的筛选，确立了一种化学定义的小分子化合物组合CEPT（chroman 1，emricasan，polyamines，trans-ISRIB）进行稳健的细胞克隆，以安全和高效的方式从hPSC中生产出遗传稳定的单克隆细胞系，并进行连续的传代。这不仅有助于开发药物和个性化细胞治疗的先进策略，还有助于在干细胞生物学领域进行更深一步的可重复的可靠的研究。

文中对比了基于流式细胞术的单细胞分选方法、基于图像的单细胞打印方法和基于微流控的单细胞分选方法，选择了对细胞极其温和，不仅能够快速分离单个细胞，而且能够保持细胞活性，并且仪器设置用时短和单块96孔板分选快的Namocell微流控单细胞分选仪。确立了用户友好的微流控细胞分选来完成整个干细胞单克隆分选方案，配合小分子化合物组合CEPT，干细胞单克隆保持了原有的形态学特点，减少细胞膜空泡化，维持其圆润程度。后续的核型和WES分析再一次确认了细胞完全正常。

Namocell 是一家成立于美国硅谷的专注于世界领先的单细胞分选技术的生物仪器公司，2022年7月加入Bio-Techne。公司自主研发的微流控单细胞分选平台，使复杂的单细胞分选变得极其简单快速，极大地推动了单细胞分析在基础研究和临床上的应用。我们的单细胞分选仪已在细胞株的构建，单克隆抗体的筛选，细胞基因编辑，基因及细胞治疗，癌症液体活检，癌症免疫治疗，产前基因筛查，噬菌体展示，单细胞基因组学等多方面得到广泛的应用。目前Namocell微流控单细胞分选仪已经被世界各大顶尖研究机构及生物制药公司广泛应用于生命科学研究的各个领域，例如美国国立卫生研究院(NIH)，美国食品药品监督管理局 (FDA)，美国疾病控制与预防中心(CDC)，哈佛大学，斯坦福大学，麻省理工大学，Genentech，Merck，Biogen，BMS，Janssen，Boehringer-Ingelheim等。

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