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1、原理及适用范围 将乳糖胆盐选择性培养基和TTC显色剂加载在纸片上,经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性,记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。 食品大肠菌群检验纸片法与国标法中的九管法相对应,将原来几步的试验简化为一步,时间由78h缩短为24h以内,省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以打开包装进行抽样检测。 执行标准:食品安全国家标准 食品微生物检验大肠菌群计数MPN计数法(GB/T 4789.3--2010)。 适用于各类食品、饮料等样品中大肠菌群的快速测定。
2、操作方法 2.1、样品处理:
按无菌操作称取样品25g(或25mL)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样瓶或均质杯中,经充分振摇做成1:10的样品匀液。样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调节。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇试管制成1:100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计,按上述操作,一次制成10倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次,换一支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过15min。 2.2、接种 2.2.1、选取两个稀释度进行接种,普通食品一般采用1:10和1:100这两个稀释度,饮料采用原液和1:10两个稀释度。本品每份由三片大纸片(接10mL,袋中二片叠放算作一大片),六片小纸片(接1mL)组成。 2.2.2、用灭菌吸管吸取10mL 1:10样品匀液加到含有大纸片的塑料袋中(相当于接样品1g),吸透后平放,做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1mL同一稀释度的样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.1g),做三个重复。再另取一支1mL灭菌吸管吸取1mL 1:100样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中(相当于接样品0.01g),做三个重复。
2.3、培养:
将接种好的纸片(可叠放)放入36℃±1℃培养箱中培养15~24h。
3、大肠菌群可能数(MPN)的报告3.1 若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫蓝色不变或在紫蓝色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。 3.2 记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据《食品饮料大肠菌群MPN表》查出相应的大肠菌群数。 3.3 如接种的第一个梯度为原液,应将表上查出的结果除以10。
4、注意事项 新的国家标准所用的单位改为每克(或毫升)检样中大肠菌群可能数,标准的接种量为0.333g(mL),MPN表也是由此而设计。而使用本品的标准接种量为3.33g(mL),大纸片接种10mL 1:10样品匀液相当于1g样品,因而表内数字应相应降低10倍。饮料样品的接种量为33.3mL,大纸片接种10mL样品原液,表内数字应降低100倍。5、保存条件 本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,建议在拆封前将整包回温至室温。 食品、饮料大肠菌群(MPN)检索表
阳性纸片数
MPN
95%可信限
0.10
0.01
0.001
下限
上限
0
1
<3.0
3.0
6.1
-
0.15
1.2
9.5
9.6
11
18
2
3
21
28
35
29
4.5
8.7
42
94
6.2
9.4
3.6
7.2
0.17
1.3
38
36
23
64
4.6
17
110
180
7.4
20
43
75
120
160
9
37
40
200
420
15
16
9.2
14
1.4
93
150
210
290
90
430
1000
27
3.7
240
460
1100
<1100
2000
4100
注1:本表采用3个稀释度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g(或0.01ml)、和0.001g(或0.001ml)〕,每个稀释度接种3片。
注2:表内所列检样量如改用1g(或1ml)、0.1g(或0.1ml)、和0.01g(或0.01ml)时,表内数字应相应降低10倍;如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g(或0.001ml)、和0.0001g(或0.0001ml)时,则表内数字应相应增高10倍,其余类
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企业名称
广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
440108000027433
成立日期
2006-04-26
注册资本
经营范围
投资咨询服务;非许可类医疗器械经营;技术进出口;计算机零售;计算机批发;电子、通信与自动控制技术研究、开发;化学工程研究服务;食品科学技术研究服务;软件开发;化学试剂和助剂销售(监控化学品、危险化学品除外);药物检测仪器制造;房屋租赁;汽车销售;汽车零售;电子产品批发;光电子器件及其他电子器件制造;电子测量仪器制造;生物技术咨询、交流服务;试验机制造;生物防治技术推广服务;化工产品批发(危险化学品除外);其他日用化学产品制造(监控化学品、危险化学品除外);室内装饰、装修;室内装饰设计服务;家具批发;机械技术开发服务;软件服务;软件测试服务;软件批发;农业技术推广服务;计算机网络系统工程服务;信息技术咨询服务;机电设备安装服务;安全检查仪器的制造;光学仪器制造;农林牧渔专用仪器仪表制造;生物技术开发服务;实验分析仪器制造;供应用仪表及其他通用仪器制造;仪器仪表修理;生物技术推广服务;仪器仪表批发;化学试剂和助剂制造(监控化学品、危险化学品除外);软件零售;货物进出口(专营专控商品除外);电工仪器仪表制造;技术服务(不含许可审批项目);医用电子仪器设备的生产(具体生产范围以《医疗器械生产企业许可证》为准);许可类医疗器械经营;化学药制剂、生物制品(含疫苗)批发;改装汽车制造
公司地址
广州市高新技术开发区科学城开源大道11号科技企业加速器园区A1栋六楼
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公司名称: 广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司
公司地址: 广州市高新技术开发区科学城开源大道11号科技企业加速器园区A1栋六楼 联系人: 曾小姐 邮编: 510000 联系电话: 400-860-5168转3937
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