naica®微滴芯片数字PCR系统为新冠病毒在母婴之间垂直传播研究提供证据

最近，人们发现新冠病毒SARS-CoV-2有可能在母婴之间进行垂直传播，而这种传播的后果，无论是胎儿还是新生儿，均尚不清楚。来自法国艾克斯-马赛大学的科学家在《Clinical Infectious Diseases》杂志上发表了一篇名为Congenital Infection of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 With Intrauterine Fetal Death: A Clinicopathological Study With Molecular Analysis 的文章，该文章是关于SARS-CoV- 2因母胎传播而继发胎死腹中并伴有先天性感染，胎盘和胎儿组织损伤的第一篇报道。

文中采取个案研究的方式，来自于一个SARS-CoV-2孕中期先天性感染的病例。一名孕妇在SARS-CoV-2检测呈阳性后入院观察。随后检测到胎儿只有少量运动，羊水正常，胎盘形态正常。第二天，患者出现失血，胎儿运动减少。在超声检查中未发现胎儿心脏活动。在引产后，这对夫妇提出并同意了胎儿和胎盘的病理学检查。后续采用免疫化学，RT-qPCR和RT-dPCR对胎儿和胎盘进行病理学检查和SARS-CoV-2基因组变异分析。

为了提高SARS-CoV-2基因组检测的灵敏度，文中作者采用naica®微滴芯片数字PCR系统进行检测。在SARS-CoV-2病毒RNA的3个特异性区域设计引物和双标记探针：NI和N2为N基因，IP2为RdRP基因。均在FAM通道中检测荧光信号，可以提高检测的敏感性和特异性，在HEX通道中测量的人类基因被用作内部控制来验证样本的存在。

▲利用RT-dPCR技术，从阳性对照(PAC)、固定肺组织和胎盘检测SARS-CoV-2病毒载量的2D微滴图。(A)HEX通道的阳性微滴检测内源性细胞。(B)FAM通道检测3个SARS-CoV-2靶点。(C)在FAM通道和HEX通道均可以检测到内源性细胞和SARS-CoV-2靶点。(D)阴性微滴

通过临床病理学和分子水平的综合分析，结果表明：胎盘发生组织学病变，出现组织细胞间炎症和滋养层细胞坏死。胎儿表现出轻微的生长限制，出现肝细胞损伤和含铁血黄素沉着症，在胎儿组织中没有发现炎症细胞，在福尔马林固定胎盘、冷冻胎盘标本和胎儿肺和肝样品中均检测到SARS-CoV-2，在福尔马林固定胎盘组织中检测到最高的病毒载量。

本案例中，SARS-CoV-2孕中期先天性感染，伴有子宫内胎儿死亡，继发于SARS-CoV-2感染的极度弥漫性胎盘损伤特征。母胎交换严重受损，导致胎儿缺氧伴心力衰竭和胎盘组织中高水平的病毒RNA。因此，在疑似SARS-CoV-2垂直传播的病例中，应考虑对孕妇进行产科急诊管理，特别是存在血小板减少症导致胎儿移动减少的情况下。

原文链接：https://doi.org/10.1093/cid/ciab840