截止目前,针对疫情相关人群做新冠肺炎筛查时,主要采用鼻咽拭子核酸检测,原因是方便快捷,适合大规模筛查。但是,对于一些无症状感染者或轻症感染者来说,感染后病情恢复得很快,可能3至5天咽部核酸就检测不到了。通过研究发现,一部分感染者粪便或肛拭子核酸阳性的持续时间比上呼吸道持续时间更长。因此,增加肛拭子等复杂样本的核酸检测能够提高感染者检出率,减少漏诊。
日前,湖南省疾控研究人员对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者不同时间的全血、尿液、粪便标本同时进行qPCR和Naica数字PCR(cd-PCR)的核酸检测,并比较了两种方法检测各类样本中2019-nCoV的差异性,提出改进2019-nCoV核酸检测的综合策略,为核酸检测阴性患者提供更多诊断支持。
本实验中数字PCR在病例发病早、中、晚期标本中均能检测到阳性微滴,而qPCR漏检了发病小于5天的标本,检测到的阳性核酸均以中晚期为主。这也解释了受检测方法灵敏度的局限性,目前大部分假阴性患者都处于疾病发展的早期。此外,在本次实验中数字PCR在重症病例的三种标本中均测到阳性微滴,但因为血、尿和可疑粪便的标本病毒载量偏低,qPCR检测均为阴性。
总之,数字PCR技术可以有效克服qPCR灵敏度不足的难题,捕捉到病毒载量较低的血液、尿液和可疑的粪便或肛拭子标本,是qPCR的有益补充,为帮助临床医生准确判断早期感染及患者是否真正痊愈起到了积极的作用,对2019-nCoV的长期监控有重要的意义。
Naica数字PCR技术进行新冠病毒检测,依托高灵敏度、全封闭、判读快捷等优势,
可应用于以下场景:
1. 低浓度样本检测,如ct值>37个循环的样本,ct值为零的高危密接样本,排除假阴性结果;
2. 医院样本的准确复核;
3. 出院标准的确证;
4. 阳性病人的出院后定期跟踪检测;
5.取样困难病人的复杂样本检测:血浆、粪便、尿液等;
6.捐献库、样本库、血库中样本新冠筛查;
7.群采检测和单采群检,提高日检测能力,筛选灵敏度高。
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