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Sapphire文献速递|在囊性纤维化跨膜电导调节剂（CFTR）蛋白定量分析上的应用
2020年4月21日，由Tara N. Guhr Lee等在《Journal of Cystic Fibrosis》期刊中发表了《Accumulation and persistence of ivacaftor in airway epithelia with prolonged treatment》的文章，文中使用Azure Sapphire对IRDye 680孵育的印迹膜扫描成像，对CFTR蛋白进行定量分析。
背景：
囊性纤维化（CF）的基本缺陷反映了囊性纤维化跨膜电导调节剂（CFTR）的功能丧失，囊性纤维蛋白是参与氯离子和碳酸氢盐跨细胞膜转运的质膜蛋白。CF的一个关键治疗方法是CFTR调节剂，即用于改善异常CFTR功能的药物。
CFTR调节剂的当前剂量策略基于血清药代动力学，但靶组织（如气道上皮）中的药物浓度尚不清楚。先前的数据表明，CFTR调节剂可能在气道上皮中积聚，血清药代动力学可能无法准确预测慢性治疗的效果。
方法：
在治疗和冲洗阶段的各个时间间隔，通过质谱法测量药物浓度，在Ussings室中评估电生理功能，并通过Western印迹定量成熟的CFTR蛋白。
结果：
与lumacaftor或tezacaftor相比，CF-HBEs中ivacaftor的累积程度要大得多，并且在冲洗14天后仍然持续升高。CFTR活性在治疗7天达到峰值，但随着ivacaftor的进一步积累而降低，尽管冲洗后仍保持在基线以上。
结论：
慢性治疗期间和之后，CFTR调节剂的细胞内累积和持续存在提示气道上皮内复杂的药代动力学和药效学特性不能由血清药代动力学预测。可能需要直接测量靶组织中的药物以优化剂量策略，并且治疗停止后CFTR调节剂的持续存在对个性化药物治疗方法具有重要意义。
Sapphire 双模式多光谱激光成像系统可完成NIR和RGB荧光，化学发光和磷屏成像等多种检测。无论您的实验室进行哪种成像，例如普通的Western Blot、Southern印迹、2D和2D DIGE、可视化组织或小型模式动物成像都可高质量实现。
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