近日,中国学者熟知的PLOS ONE和PLOS Biology在投稿指南里指出,7月1日起,要求所有作者提供WB相关的原始数据,并存放在可用的数据库中,提供可查询的信息。
在《JBC》的作者投稿要求中也需要提供原始数据作为评审的依据。如果稿件正在审核中,未按照要求提供或拒绝提供这些数据的作者的文章将成为拒收理由。
在权威杂志《nature》的要求中,作者可能会被要求提交原始的,未经处理的图像。
在《cell》作者须知里面也指出需要提供原始的未裁剪的原始数据,如果未按时提交,可能推迟发布或存在撤稿风险.
以上列举了几种期刊关于提交原始图像的信息,因为WB由于其从原始数据到最后成文展示,本身即需要裁减排版,此过程中,造假的空间就会很大。还有很多知名期刊也有类似的要求,防止WB数据造假。
Azure凝胶成像系统提供给客户最真实的原始的tiff图片,而不是经过软件自行修改,编辑的看着好看的图片,例如插值图片,插值图像灰度值有明显的不连续性,图像质量损失较大,会产生明显的马赛克和锯齿现象。自动优化图片,软件类似PS的手法,在形成图像时进行自动优化,消除背景等方法,这样会使图片丢失大量信息,影响数据的真实性。
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以上和大家说了原始图片的期刊要求,我们看看关于定量数据的要求:
JBC期刊杂志要求使用总蛋白定量,传统单一蛋白会有潜在的不稳定表达的风险,影响定量准确性.
在《Nature》和《Cell》杂志中鼓励在一张印迹膜上进行印迹实验,平行胶因为体系和条件的不同会影响定量的准确性,荧光方法更符合。
化学发光方法由于其自身的半定量和一次仅能进行单一的信号采集,所以才会有这么多学术造假的文章出现,化学发光检测的局限性就体现出来了。之后科学家为了寻求解决方法,荧光western blot检测应运而生。
荧光Western blot使用荧光染料标记的二抗进行检测,膜上的靶标蛋白浓度与可见荧光信号强度呈线性关系,实现真实可靠的定量分析。荧光染料发射光谱不同,因此在一张印迹膜上可实现多重检测。在无需剥离和二孵育条件下,进行上样量质控,可以分析翻译后修饰蛋白。
因此当您进行如下实验室,选择荧光检测方法,妥妥的:
> 同时检测多种蛋白
> 研究翻译后修饰蛋白
> 同一印迹膜的上样质控
> 精确定量western blot实验
综上所述,采用现在动态范围更宽的多重荧光western blot检测方法来进行western blot检测,实现真正的定量要求,无需剥离膜和二次孵育,进行上样质控,目标蛋白和内参蛋白在同一张膜上,就不会发生和避免上面数据造假的情况发生,更容易被期刊杂志接收。
Azure凝胶成像系统秉承实事求是,尊重科研的态度,提供给客户最真实的原始的数据。
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