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定量western blot :为什么需要验证抗体

2019-12-13 09:32

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验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的,即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白,抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前,经常需要验证抗体的特异性,但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证,因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而,抗体与抗原的亲和性高度依赖于实验条件,因此,验证您的试验方法中的条件适用于抗体与抗原的结合是十分重要的。在《JBC》杂志中关于抗体验证信息如下: ? 定义所有使用的抗体的来源和种类,包括目录/批号。 ? 描述如何产生新抗体,包括表位/抗原的制备和纯化。 ? 描述支持抗体特异性的数据,包括翻译后修饰或新表位。 ? 证明对抗原进行遗传或其他分子修饰后免疫反应性降低。
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