2022/02/08 19:26
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方案摘要:
产品配置单:
上海仪电分析-LC220液相色谱仪(LC)
型号: LC220
产地: 上海
品牌: 仪电分析
¥5万 - 10万
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方案详情:
【仪电分析】《药典》蟾酥测定方法-高效液相色谱法
蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans Cantor或黑框蟾蜍Bufo melanistictus Schneider的干燥分泌物。多于夏、秋二季捕捉蟾蜍,洗净,挤取耳后腺和皮肤腺的白色浆液,加工,干燥。味辛性温,有毒,归心经。有解毒,止痛,开窍醒神的功效,用于痈疽疔疮,咽喉肿痛,中暑神昏,痧胀腹痛吐泻。
一、方法原理
参照《药典》中蟾酥的液相色谱检测方法,以华蟾酥毒基和酯蟾毒配基为目标物,以保留时间定性,峰面积外标法定量。
二、主要仪器和试剂
a. LC220高效液相色谱仪:含紫外检测器;
b. 万分之一天平;
c. 回流冷凝装置;
d. 华蟾酥毒基对照品;
e. 酯蟾毒配基对照品;
f. 乙腈:色谱纯;
g. 甲醇:色谱纯;
h. 磷酸二氢钾:分析纯;
i. 磷酸:分析纯。
三、实验方法
3.1 色谱条件
色谱柱 | C18(250mm*4.6mm,5μm) | 流 速 | 0.8 mL/min | ||
波 长 | 296 nm | 柱 温 | 40 ℃ | 进样量 | 20 μL |
流动相 | 乙腈:0.5%磷酸二氢钾缓冲液=50:50(用磷酸调节pH到3.20) |
3.2 试剂配制
3.2.1 华蟾酥毒基和酯蟾毒配基标准储备液
分别准确称取10mg(精确到0.1mg)华蟾酥毒基和酯蟾毒配基对照品于100mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,配制成浓度均为100mg/L的华蟾酥毒基和酯蟾毒配基混合标准储备液,于4℃避光保存。
3.2.2 华蟾酥毒基和酯蟾毒配基标准工作液
取上述标准储备液用甲醇分别稀释成10、20、50、70、100mg/L的标准工作液,待测。
3.2.3 样品处理
称取25mg(精确至0.1mg)蟾酥细粉于50mL具塞锥形瓶中,加入20mL甲醇,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量,用甲醇补充减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
四、实验图谱及计算结果
4.1 标样谱图
华蟾酥毒基和酯蟾毒配基标准色谱图
4.2 样品谱图
蟾酥样品色谱图
4.3 样品重复性
4.4 标准曲线
华蟾酥毒基标准曲线
酯蟾毒配基标准曲线
4.5 计算结果
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