锘锘海生命科学·2022学术沙龙系列讲座海生命科学·2022学术沙龙系列讲座锘海生命科学·2022学术沙龙系列讲座报告时间：2022年8月3日 周三 13:00-14:00报告主题：基于TESOS透明化包埋技术的中枢与外周神经投射图谱成像腾讯会议：264-344-305嘉宾介绍：赵瑚北京脑中心高级研究员个人简介2001年于四川大学华西口腔医学院获得口腔医学博士学位，2003年于University of Virginia获得生物学硕士学位，2011年于UCLA牙学院获得临床牙科博士学位 (DDS)。于2003-2009和2011-2015在University Of Southern California牙学院柴洋实验室从事博士后工作，于2016年加入Texas A&M University牙学院从事助理教授工作和兼职临床牙医工作。于2021年通过大学tenure委员会的评审。赵瑚于2021年八月份入职北京脑科学中心。曾以第一或者通讯作者在Cell Stem Cell, Nature Cell Biology, Developmental Cell, Cell Research等杂志发表文章。研究领域1. 开发基于新型透明化技术的中枢和外周神经组织连接图谱成像平台。赵瑚教授实验室开发的PEGASOS透明化技术，目前已经被许多实验室广泛运用于各类软硬组织的透明化和三维成像研究。他进一步提出了透明化包埋的新概念，研发出了TESOS技术并基于此技术在北京脑科学中心建设开发中枢与外周组织神经投射图谱的高速高分辨成像平台。2. 颅颌面发育与干细胞生物学，研究颅颌面软硬组织的发育还有成体颅颌面牙，骨组织的干细胞调控机制。锘海学术沙龙背景：借助组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，研究者对生物组织内部的结构及生理、病理特征的观察和分析从2D提升到了3D。透明化三维成像技术利用深部组织可视化和大数据，引领科学领域的进步。针对科学研究中组织三维成像中的重点和难点，锘海自主搭建一站式科研平台，提供从“组织透明化/染色”→“平铺光片显微镜3D成像”→“数据采集分析处理及存储”整体解决方案。同时，大力推广组织透明化及平铺光片显微镜三维成像技术和应用。2022锘海学术沙龙系列讲座，将邀请国内该领域知名专家学者做特邀学术报告，借此为致力于组织三维成像研究者提供一个共享科研成果和前沿技术，了解学术发展趋势，拓宽研究思路的机会。2022学术沙龙系列讲座由锘海生物科学仪器（上海）有限公司主办，锘海专注于高速高分辨率3D荧光显微成像系统的研发、生产和服务，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个研究领域。目前已与国内外多家高水平实验室开展合作研究，并获得高质量的成像数据。扫码参会：  锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海组织透明化试剂盒Cat#：NH210701锘海自主研发的组织透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。锘海组织透明化试剂盒，详细信息请点击链接：锘海组织透明化试剂盒锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过精准、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

会议介绍清华大学生物医学测试中心于2022年7月继续举办第五届显微成像基础及应用暑期研讨会。此次研讨会采用线上直播方式，面对科研单位、企事业单位的技术平台。研讨会邀请组织透明化及荧光显微镜相关领域的知名专家做专题报告。锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海组织透明化试剂盒Cat#：NH210701锘海自主研发的组织透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。锘海组织透明化试剂盒，详细信息请点击链接：锘海组织透明化试剂盒锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室锘海生命科学锘海生物科学2020获得国家高新技术企业资质。提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。 锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、心肝脾肺肾、肌肉及肿瘤等组织器官3D结构呈现。公众号

生物组织由各种具有不同光学特性的物质组成，因此，当光线穿过组织时，光分布和光强度由于光散射和光吸收等因素的影响而衰减，从而导致图像模糊或减弱，尤其是在组织深层区域更是显著。即此，组织透明化的目的是尽量减少光的散射和吸收，以获得更好的光学成像性能。有效的组织透明化有助于提高成像深度和对比度，使完整器官甚至啮齿类小鼠样品的全身3D成像成为可能。从技术上讲，所有成像步骤的目标是期望以高通量方式拍摄理想分辨率（细胞到亚细胞）的细胞/器官/组织/完整实验模型图像。在众多的成像技术中，光片显微镜（LightSheet Mciroscope, LSM）因其优异的光切成像能力和高质量的成像速度而特别适用于透明化组织或模式生物的 3D成像。实际图像采集及应用中，应根据实验需求平衡图像质量、采集数据量和采集时间，不言而喻更高分辨率的图像会增加数据量及采集时间。而随着检测物镜NA值的增加，横向分辨率比轴向分辨率增加得更快，这使得保持空间分辨率各向同性变得更加困难。所以，LSM实际使用过程如何根据实验需求选择合理拍摄条件尤为重要。锘海LS18平铺光片显微镜不仅可以实时预览和自动校准光片，且可以根据用户成像应用需求灵活调整平铺光片数量（1-10 tile），以满足快速和高分辨成像的不同需求。通常在某一放大倍数下，通过选择合适的平铺次数得到的轴向分辨率，以接近横向分辨率即可实现空间分辨率的各向同性，这种性能对于重要结构信息的判断尤为重要，对于原始信号的保真性也尤其重要，可以更大程度的减少光学畸变对原始信号的影响及数据的解读、分析。LS18平铺光片显微镜具有卓越各向同性分辨率的成像能力，但我们建议用户应在特定应用中合理地选择空间分辨率及平铺次数，兼顾数据存储、软件图像处理能力和数据分辨率之间的平衡，毋庸赘述图像采集时间和数据量随3D 空间分辨率和组织大小成比例增加。锘海LS18平铺光片显微镜给予客户更大权限的选择，可灵活选择少量平铺、不平铺传统光片成像模式，可有效提高成像效率、缩短成像时间、减轻对数据存储和处理压力，对于仅仅是简单定性或分辨率要求不高的成像实验相对高效。同时亦可以选择多次平铺的独有专利模式，可以有效提升采集信号的各项等性空间分辨率，满足高质量数据的解读需求，此类模式在同等空间分辨率条件下，成像效率、成像时间显著优于传统光片对数据的采集。通过比较图像采集和图像重建过程，可以清楚地揭示使用常规光片显微镜和平铺光片显微镜在相同空间分辨率下对相同样本体积进行成像的不同效率。针对大组织样本成像时，传统光片显微镜空间分辨率和成像视野之间存在矛盾镜锘海LS18 平铺光片显微镜，在保持大的成像视野、快的成像速度的情况下，使用薄的光片厚度，实现大组织样本高分辨率成像以往我们的标准配置以高质量的各向同性分辨率成像设置（标准模式）为主，目前考虑到客户多样化的需求，更加灵活的专家模式即将开放给广大用户。以下展示一组成像结果的对比用于说明不同平铺次数成像模式之间的差异，可以让大家更直观地了解平铺所带来空间分辨率优势所在：使用锘海LS18平铺光片显微镜对透明化Thy1-eGFP 小鼠脊髓成像（6.3X），分别使用平铺6次（6 tile，上行图像）和1次（1 tile，下行图像）模式进行对比，如图横向（A-B）和轴向（C-D）更大强度投影（MIP）。（C）和（D）中选定区域（黄色）的放大视图分别为（E）和（F），即使是较小胞体的形态在6 tile模式下依旧清晰可辨，但是在1 tile模式下会丢失部分信息，但是毫无疑问1 tile的速度相比于6 tile模式至少可提升6倍之多！平铺 LSM 比传统 LSM 更有效地对具有高空间分辨率的透明化组织进行成像，因为通过平移光片而不是样本来减少对样本的扰动，这样更快、更准确、更灵活。锘海LS18平铺光片显微镜可以与所有组织透明化方法兼容，并且可以灵活地满足不同的成像需求，可通过相位调制对光片进行自动校准，因此也很可靠且易于操作。锘海LS18平铺光片显微镜不仅注重3D成像能力，满足从透明化大组织中获得所需的数据，同时还注重优化和调整成像性能的能力，使得显微镜更灵活的兼容各类应用场景。与其他光片显微镜不同，LS18平铺光片显微镜采用专利的光学设计和相位调制方法，使其在透明化组织成像方面的能力、可靠性和灵活性更高。与其他光片显微镜相比，LS18平铺光片显微镜具有多项先进功能：首先，基于自主研发的平铺专利技术，与传统 LSM 相比，平铺光片用于样品照明时空间分辨率和成像效率可以同时得到提高，解决空间分辨率与丞相速度之间的矛盾。其次，检测物镜NA、检测放大倍率和激发光片平铺次数可轻松调节，使显微镜能够以微米级到亚微米级的空间分辨率对厘米级的透明化组织进行3D成像。第三，由二进制空间光调制器 (SLM) 进行相位调制生成的照明光，可满足样品照明时灵活的的平铺光片数量需求，且调制便捷只需要软件参数设置，无需任何硬件调试。此外，通过 SLM 的相位调制，可校正几乎所有的对准误差，这重要的保障了光片显微镜成像性能的稳定性及成套系统可靠性。显微镜与所有组织透明化方法兼容，并且很容易适应通过不同方法得到的不同形状和机械强度的组织成像。参考文献Chen Y, Li X, Zhang D, et al. A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues. Cell Rep. 2020;33(5):108349. doi:10.1016/j.celrep.2020.108349Susaki EA, Ueda HR. Whole-body and Whole-Organ Clearing and Imaging Techniques with Single-Cell Resolution: Toward Organism-Level Systems Biology in Mammals. Cell Chem Biol. 2016;23(1):137-157. doi:10.1016/j.chembiol.2015.11.009锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

在生物成像和光诊疗学领域，通过对材料的结构调整以控制其光学性质是探索新材料，发现新应用的重要且常见方式。贵金属就是其中较为主要的一类原料，但通常的贵金属材料存在两个明显缺点：一、激发波长通常落在可见光和近红外一区（NIR-I，700 – 1000 nm），这使得成像的深度降低，同时无法与组织发生明显的作用；二、该类材料通常不具备激活功能（即始终在线，Always-on），使得难以从成像中分辨目标和其他无关组织，同时可能会存在未知副反应。在这样的背景下，作者Chunyu Zhou等人将目标放在更高信噪比、更大成像深度的近红外二区（NIR-II，1000 – 1700 nm），开发能够对肿瘤微环境进行响应的贵金属纳米材料。该材料以金纳米粒子（Gold nanoparticles，AuNPs）为主体（见图1），在乙醇和水的混合体系中使其形成纳米链（Nanochain）。之后引入四乙氧基硅烷（Tetraethyl orthosilicate，TEOS），水解后包裹金纳米链，形成核鞘结构（Core-sheath nanostructure，AuNCs@SiO2）。注射至小鼠体内后，因肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）中高H2O2水平触发邻近金纳米颗粒在AuNCs@SiO2的有限局部空间内融合，从而产生了具有强NIR-II吸收的串状结构。图1：AuNCs@SiO2作用示意图因AuNCs@SiO2具有TME激活特性，因此不容易受其他组织的影响，表现出优异的光声成像性能（图2）。图2：正常组织与肿瘤组织的超声、光声成像对比同时，AuNCs@SiO2在1064 nm处光热转换效率高达82.2%（图3），可导致癌细胞严重死亡，显著抑制肿瘤生长（图4、5、6）。图3：AuNCs@SiO2与其他已报道的光热治疗试剂的转换效率对比：1) AuNCs@SiO2; 2) Au3Cu@PEG TPNCs; 3) Au-wires-on-AuNR; 4) Pt Spiral; 5) Cu2MnS2 NPs; 6) Nb2C (Mxene); 7) Cu3BiS3 NRs; 8) L-Pdots; 9) TBDOPV-DT NPs; 10) SPN-DT图4：注射PBS和AuNCs@SiO2的荷4T1瘤小鼠光热红外热成像（1064 nm NIR-II激光，0.5 W/cm2）图5：注射PBS和AuNCs@SiO2后，肿瘤部位温度与照射时长的变化趋势图6：接受相应治疗后的小鼠肿瘤大小对比（I：PBS；II：AuNCs@SiO2；III：PBS+Laser；IV：AuNCs@SiO2+Laser）总结：作者首次成功合成出具有TME响应的、同时具有光声成像和光热治疗功能的二氧化硅包裹自组装金纳米链。通过TME中高浓度H2O2水，使金纳米粒子表面柠檬酸氧化，进而脱离纳米粒子表面，导致金纳米粒子融合，产生强NIR-II吸收。这一新型材料或许能够为准确非侵入性诊疗打开新的大门。美国PhotoSound 小动物3D光声/荧光成像系统 (PAFT)美国PhotoSound小动物全身3D光声/荧光成像系统(PAFT)为小动物活体成像和表征提供了完整的解决方案。该系统集成了三种互补的三维成像模式：光声成像(PAT)、荧光成像(FMT)、生物发光成像(BLT)，可同时实现小动物的3D光声、3D荧光和3D生物发光成像,该系统可为生物组织提供高分辨率、高对比的解剖学成像效果。可实现近红外一区和近红外二区（670-2600 nm）小鼠全身3D光声/荧光成像系统，采用OPO可调式激光器，提供670-2600 nm连续脉冲激光、完全3D光声成像(具有100 um等向分辨率的完全三维成像，非切片叠加成像)、高通量 (256个电子通道)、灵敏度高(60 nM ICG )、桌面式设计，方便使用、成像速度快 (完成一次3D扫描需30秒)。● 美国PhotoSound小动物全身3D光声/荧光成像系统● 小鼠解剖应用笔记 —— 美国PhotoSound小动物全身3D光声/荧光成像系统● 光声成像应用 | 探寻动脉粥样硬化斑块联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

2022年7月8日, 锘海线上直播围绕LS18平铺光片显微镜技术、生物组织透明化技术、测样服务平台以及LS18平铺光片显微镜应用案例等主题进行报告和展示。在报告互动环节中，各位老师就目前课题方向提出诸多代表性疑问，让我们一起回顾下精彩问答。Q: 什么是平铺光片技术？以及该技术的控制的原理是怎样的？A：平铺光片技术是一种新型的选择性平面照明显微镜（SPIM）三维成像技术，在不增加光片厚度、不降低激发光片约束能力的情况下，增加SPIM的FOV。如图1所示，在探测焦平面内沿光片长轴方向(y方向)平铺小而薄的光片，在每个位置拍摄一幅图像，将所有图像组合并重建整个FOV的图像。 平铺光片技术的控制原理：在成像时，无论是通过移动物镜或是移动样本等物理方式，都会影响成像质量，造成artifacts。LS18光片显微镜创新地采用平铺光片模式，通过对空间光调制器加载不同的相位图以对激发光束进行调制，实现快速平铺短而薄的光片，扩大了FOV且不影响空间分辨率和光学层析能力，从而获得均一的高分辨率3D图像。空间光调制器对激发光相位进行调制几乎可以解决所有的光片校准问题，真正地实现显微镜仪器的自动校准，并且性能非常稳定，易于操作和维护。另外，根据不同样品的研究需求，LS18光片显微镜能够灵活地调整光片平铺次数以及成像速度，实现不同类型的完整组织器官的3D结构与功能测量。  图1. TLS-SPIM的工作原理，（左）通过快速平铺小而薄的光片，（右）在每个位置拍摄一幅图像，将所有图像组合重建整个FOV的图像，使得视野范围内各处成像分辨率均一。关于平铺光片技术的详细原理可参考以下文献：1. Gao, Liang. Extend the field of view of selective plan illumination microscopy by tiling the excitation light sheet[J]. Optics Express, 2015, 23(5):6102-11.2. Fu Q , Martin B L , Matus D Q , et al. Imaging multicellular specimens with real-time optimized tiling light-sheet selective plane illumination microscopy[J]. Nature Communications, 2016, 7:11088. Q: 用lectin标记血管时，是尾静脉注射后再取器官然后透明化，还是先透明化再用染色仪器将lectin标记上?A: 血管标记透明化和染色顺序问题，在实验案例当中，两种方式我们都有尝试过，实际上它都是可行的。首先，lectin的尾静脉注射方式对整个灌注流程来说，需要非常大的技术把控性。如何做到良好的静脉内注射并维持小鼠一定时间的存活率，对于实验室新手可能需要多加练习。由于lectin具有半衰期，可参考发表文献中的操作步骤，根据代谢动力学来选择一个合适的时间，需要注意的是在灌注流程过程当中剥离取材时间或者说lectin的孵育时间。同时，有些客户送到我们这边的样本可能在前期经过灌注后会产生荧光淬灭的问题，我们可以选择性帮老师做巩固结构及加强染色步骤。对于加强染色这部分，可用lifecanvas 的SmartBatch+主动式透明化/染色一体电泳仪，亦可采用传统的被动渗透式方法来实现。 Q: 请问哪种透明方法和免疫染色结合的比较好?A: 透明化方法和免疫染色的结合目前为止没有好坏之分，大组织样品免疫染色目前是世界性的难题，从目前众多老师和我们测样的经验来看，油性染色方法中idisico和Pegasos的方法都比较可行，但是idisco涉及甲醇的脱水步骤，所以对抗体和甲醇的兼容性要求比较高，有条件的用户我们建议可以先做个兼容性测试，这样有助于提升后期染色的效率。通常来说，荧光基团在水性的环境当中保存性也更好。所以，如果样品可以满足水性透明化方法的前提下，可以尽量尝试采用水性透明化方法，同时关注指标染色特异性及有效性。此外，大组织免疫染色还与样品大小有关。在不同组织中，如：对于肠道、肺、整脑、整个脑连脊髓、心脏等各类样品，方法和步骤都有区别。所以透明化方法一定要和免疫染色指标综合考虑，才能寻找”更优解“，跟我们目前有限的经验，需要根据样品和染色指标来进行综合筛选，寻找合适的组合。 Q: matrigel细胞外基质胶可以通过哪几种透明化方法处理？A：涉及matrigel细胞外基质的样品一般多是类器官样品，此类样品可以通过多种方法透明进行透明化和染色。因为这类样品相对whole tissue来说一般体积较小，所以这个情况下，实际上有多种透明化方法可尝试，甚至可以结合我们更新的膨胀技术达到纳米级别的分辨，在3D纳米级水平完整展示整个类器官样品形貌。为方便广大科研老师，我们锘海依托大量实验案例开发出的组织透明化试剂盒（#NH-210701）就可以应用于类器官的透明化，试剂盒附有详细实验步骤可供老师选择。 Q: 采集的图像信息量很大，如何进行数据处理？大量的光学切片需要拼接，软件怎么选择？另外，用什么软件实现细胞分割和单细胞追踪？定量分析可以采用第三方软件吗？图像输出是什么格式？A：平铺光片显微镜采集的大样本成像数据量能达到几百GB或TB级别，可通过锘海自主研发的数据预处理软件对采集图像预处理，输出.3dtiff格式的原始数据供第三方数据分析软件调用（如图2所示）。通过第三方软件或自主拼接软件即可实现将所有ROI数据都拼接在一起，得到一个完整样品的3D数据（如下图所示）。图2. 平铺光片经数据提取后得到全视野高分辨率的图像 目前能实现3D大图拼接的第三方软件有很多，如Amira、Imaris，均可以对.3dtiff格式原始数据进行处理，可实现常规的单个区域数据结果快速查看、单个区域数据动态展示、大样本数据整体拼接、大样本组织整体图像处理及展示等操作。另外，3D成像的数据处理对电脑性能配置也有一定的需求，一般推荐128GB以上内存，4T以上的SSD，并需配备较高性能独立显卡。上述这些第三方的专业图像处理软件均有相应的图像分析模块，可实现分割、单细胞追踪及定量分析等功能。 Q: 组织透明化对组织本身有化学损伤吗？会破坏组织内荧光物质（如GFP）吗？A: 组织透明化方法分为主动式透明化方法和被动式透明化方法两个大类，以引入外力或生化试剂的被动扩散来完成对组织的透明化，组织透明化技术保留了组织的细胞间连接和细微特征。不同的组织透明化方法因其机理不同，对组织的形态、透明程度、透明效率、脂质留存、内源性荧光信号、核酸物质、免疫染色等的影响不尽相同。例如被动式透明化方法中的有机溶剂透明化方法，通过先脱去组织的水分，再利用高折射率的有机溶液进行折射率匹配，虽然达到很好的透明效果，但是对于荧光蛋白的信号产生淬灭作用。荧光蛋白中的亲水基团使得亲水溶剂透明化方法更有利于荧光的保存。被动式的亲水溶剂透明化方法通过浸泡将低折射率的组织液、细胞液或是高折射率的脂质逐渐替换，实现折射率一致，这类方法虽然更利于荧光保存，但耗时较长。基于CLARITY/SHIELD技术的主动式透明化方法从保护荧光蛋白构象出发，不仅能留存内源性蛋白、核酸，还通过电泳加速移除脂质，使透明化的效率提高。参考文献：冯异. 医学组织透明化三维成像 [M]. 复旦大学出版社，2020：3-21.Chung et al., Structural and molecular interrogation of intact biological systems. Nature, 2013.Park et al., Protection of tissue physicochemical properties using polyfunctional crosslinkers. Nature Biotechnology, 2019. 直播回放视频链接：https://v.qq.com/x/page/g3347h98jn8.html?sf=uri锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海组织透明化试剂盒Cat#：NH210701锘海自主研发的组织透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。锘海组织透明化试剂盒，详细信息请点击链接：锘海组织透明化试剂盒锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

INTRUDUCE直播预告直播时间7月8日（周五）15:00- 17:00直播主题锘海LS18平铺光片显微镜及组织透明化的应用介绍直播链接https://meeting.tencent.com/dm/TCpXHooRjvRo腾讯会议号209-160-156直播二维码    直播简介随着组织透明化技术和光片荧光显微镜成像能力的不断精进，科研工作者可以对结构复杂、高度异质性的生物样本进行三维成像，并通过搜集和分析荧光信号深入探索生理功能、病理结构及机制。锘海 LS 18平铺光片照明显微系统是一种新型的，专为透明化组织或模式生物的快速三维荧光成像而设计的选择性平面照明显微镜, 具有自动校准、全自动优化、易于维护等诸多优势。实验者可以根据样品自身特性与研究目的的不同，灵活的选用成像速度、放大倍数和分辨率，获得细胞级，甚至亚细胞级分辨率下的三维组织结构信息, 为神经系统疾病研究、脊髓损伤、肿瘤微环境、干细胞研究等各研究方向提供更全面、更快速、更准确的分析方法。直播内容锘海LS18平铺光片显微镜技术组织透明化技术锘海测样服务平台锘海LS18平铺光片显微镜应用案例展示锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室锘海生命科学锘海生物科学2020获得国家高新技术企业资质。提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。 锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、心肝脾肺肾、肌肉及肿瘤等组织器官3D结构呈现。公众号

2022年5月13日，国际学术期刊《Frontiers in Neurology》在线发表了复旦大学医学神经生物学国家重点实验室郭景春教授为第一通讯作者，何承峰为第一作者的研究成果“ Knockdown of NRSF Alleviates Ischemic Brain Injury and Microvasculature Defects in Diabetic MCAO Mice ”。 糖尿病（diabetes mellitus，DM）不仅是影响全球数亿人的主要健康问题之一，也是公认的脑卒中危险因素之一，越来越多的证据还表明糖尿病与更糟糕的脑卒中预后有关，例如认知障碍和痴呆。然而糖尿病及脑卒中后不良预后的生物学机制仍不清楚。NRSF即神经元限制性沉默因子（neuron-restrictive silence factor），又称为REST（repressor element-1-silencing transcription factor，抑制元件1-沉默转录因子），是一种重要的锌指蛋白转录负调控因子，它与神经元限制性沉默元件（neuron restrictive silencer element，NRSE），或称抑制元件1（repressor element 1，RE-1）相结合，调节靶基因的转录。NRSF 在多种神经系统疾病的发展和进展中发挥重要作用，例如缺血性脑卒中、阿尔茨海默病和帕金森病等。先前的研究表明，NRSF在糖尿病和缺血性脑卒中表达升高，而NRSF 在调节糖尿病缺血性脑卒中的作用也尚未完全清楚。本文作者通过高脂饮食和大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）建立糖尿病缺血性脑卒中小鼠模型（DM+MCAO），发现糖尿病增强了MCAO诱导的海马NRSF的升高，此外DM+MCAO小鼠的神经元损伤和学习/记忆障碍加重，血脑屏障（blood brain barrier，BBB）完整性和脉管系统疾病也进一步恶化。作者进一步利用重组腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）shRNA-NRSF基因干扰载体（sh-NRSF），发现NRSF敲低可改善糖尿病加重的缺血性脑损伤，也减轻了由此引起的海马神经元损伤，并可保护微血管免受糖尿病缺血性损伤。由此可见，转录因子NRSF的升高可导致糖尿病缺血性海马中更大的神经元损伤和脑微血管缺陷，为糖尿病性脑卒中的治疗实践提出了新的候选靶点NRSF。该研究成果是本月继浙江大学医学院脑科学与脑医学系、良渚实验室研究员，浙大二院双聘教授刘冲团队使用锘海LS18平铺光片显微镜在Nature发表“ Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1（点击链接看文章详情）” 研究成果后的另一佳作。原文Fig. 6 A-D采用锘海LS18平铺光片显微镜对sh-NRSF及其对照组进行全脑3D荧光成像（红色：Lectin; 绿色：GFP标记AAV shRNA），尽管两组的对侧海马体积大致相等，但是病毒注射同侧海马体积sh-NRSF约为对照组的1.5倍。原文Fig. 7 对Lectin标记全脑微血管的3D荧光成像结果进一步评估病毒注射同侧海马血管的荧光分布（A，C：CA1-CA2；B，D：CA3）、体积（E，F）、长度（G，H）和分支点（I，J），各指标显示sh-NRSF相对于对照组均有所改善。文献链接： Knockdown of NRSF Alleviates Ischemic Brain Injury and Microvasculature Defects in Diabetic MCAO Mice锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过精准、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务往期回顾锘海LS18平铺光片显微镜3D全脑成像助力表征神经胶质瘤小鼠模型-荣登Nature杂志锘海LS18平铺光片显微镜助力透明化三维成像技术研究电针治疗多囊卵巢综合征 (PCOS) 的作用《Nature》子刊：锘海LS18平铺光片显微镜和组织透明化技术助力开发新型MRI造影剂用于原位肿瘤早期诊断锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室锘海生命科学锘海生物科学2020获得国家高新技术企业资质。提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。 锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、心肝脾肺肾、肌肉及肿瘤等组织器官3D结构呈现。公众号

2022年5月11日，国际学术期刊《Nature》在线发表了浙江大学医学院脑科学与脑医学系、良渚实验室研究员，浙大二院双聘教授刘冲团队的新的研究成果“ Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1 ”。该研究建立超高时空单细胞分辨率小鼠癌症模型体系，用于自发性肿瘤微环境的可视化及功能分析，并从全新角度揭示外部感觉（嗅觉刺激）可以直接影响胶质瘤发生。动物不断地从周围环境中接收诸如气味、声音、光线和触觉等各类感官刺激，这些感觉刺激对于动物觅食以及躲避天敌来说不可或缺，同时它们也会影响动物的生理状态，甚至在某些情况下这些感觉刺激可能引发癌症。恶性胶质瘤是目前神经肿瘤中最致命的肿瘤之一，已有的研究表明神经胶质瘤细胞与诸如星形胶质细胞、内皮细胞、周细胞、免疫细胞以及神经元等多种细胞之间互作，进而形成独特的肿瘤微环境，对其后续发生、转移和侵袭至关重要。然而，在正常生理条件下，外界感觉刺激是否能直接影响恶性胶质瘤的发生发展目前尚不清楚。刘冲教授研究团队基于条件性敲除技术（conditional knockout，CKO）构建的自发胶质瘤小鼠模型，发现嗅球 （olfactory bulb）胶质瘤的生发概率很高，且肿瘤主要生发于嗅球的突触小球层（glomerular layer，GL）， 突触小球层是嗅觉环路中第一级神经元（olfactory receptor neuron，ORN，嗅觉感受神经元）和第二级神经元（mitral and tufted cells，M/T cells，僧帽/簇状细胞）的信息交流区域。研究团队利用化学遗传学干预手段和物理性嗅觉干预方式，均证实了嗅觉引起的神经元活动可以调控胶质瘤的生长。研究团队进一步追根溯源，发现小鼠大脑中胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor 1，IGF1）主要表达在嗅觉环路第二级神经元M/T cells中，并通过实验证明，嗅觉活动主要是通过IGF-1信号通路调控胶质瘤的发生。此项研究成果首次通过清晰证据链，证实嗅觉感知可直接调节神经胶质瘤的发生，嗅觉感知体验和神经胶质瘤发生之间存在独特的直接联系，为胶质瘤的临床诊治提供新的思路和靶点。本文是神经系统胶质瘤研究的颠覆性力作，是继厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组（2022年4月在国际学术期刊《Nature》子刊发表“ Carbonized paramagnetic complexes of manganese (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors ”，点击链接看文章详情）使用锘海LS18平铺光片显微镜对胶质瘤小鼠模型脑样本进行3D高分辨成像的又一案例。该文中的胶质瘤小鼠模型脑样本经过组织透明化后，使用锘海LS18平铺光片显微镜进行3D全脑成像。原文Extended Data Fig. 3a 不同肿瘤发育阶段的CKO模型脑样本，使用锘海LS18平铺光片显微镜成像得到的3D全脑视图，对CKO模型进行了全面表征。Ms19127 没有检测到肿瘤；Ms18980 在 OB 的突触小球层携带一个小肿瘤；Ms19119在突触小球层有明显的肿瘤；Ms18905在OB的突触小球层和颗粒细胞层均携带明显的肿瘤。白色箭头指向 OB 中的肿瘤。原文Video S8 视频展示Ms18905在OB的突触小球层和颗粒细胞层均携带明显的肿瘤（其他3个时期对应的视频可点击文章链接进一步查看）。参考文献：Chen, P., Wang, W., Liu, R. et al. Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1. Nature (2022). https://doi.org/10.1038/s41586-022-04719-9长按并识别二维码可查看原文锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，详细信息请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务往期回顾锘海LS18平铺光片显微镜助力透明化三维成像技术研究电针治疗多囊卵巢综合征 (PCOS) 的作用《Nature》子刊：锘海LS18平铺光片显微镜和组织透明化技术助力开发新型MRI造影剂用于原位肿瘤早期诊断锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

“背景牙周炎是一种较为常见的慢性炎症，常发生于30岁以上的成年人。若不进行及时有效的治疗，将可能导致严重的牙周损坏，包括牙槽骨、牙周韧带、牙骨质等，并最终导致牙齿脱落。针对该疾病，目前主流的治疗方法较多，包括龈下刮治术、根面平整术、翻瓣术等手术方式，也有通过降解膜引导的组织再生法。”因组织的成分复杂性和牙周缺陷的结构复杂性，组织再生法一直没有显著突破。最近，Arwa Daghrery等科研工作者尝试使用生物3D打印的方式，通过静电纺丝书写这一功能构建支架，促进牙周组织再生。其创新点主要有以下两个：一、验证模拟天然组织的结构和组成可促进组织有效整合这一理论；二、考虑体内免疫应答在组织再生中的作用，调整支架成分。实验细节及结果作者使用的主体材料为PCL——一种FDA批准可用于人体的聚合物，可在加热条件下熔融，并可在电场下被拉成极细的纤维，因此可以应用于静电纺丝书写中。使用的设备为放置于生物安全柜中的regenHU生物3D打印机（配备MEW：熔融静电纺丝书写打印头）。将原料颗粒置于料仓中，加热至90℃并维持30 min后，以一定的气压、电压和速度进行打印。文中提到的实验主要分为两部分：一、体外实验：考察不同打印条件所得支架的细胞增值情况。作者分别打印出随机（Random）、有序（Aligned）、小孔（Small Spacing，250 μm间距）、大孔（Large Spacing，500 μm间距）四种支架结构（图1），在附着细胞并培养1、3、7天后，分别对细胞成活率进行检测。结果为有序（Aligned）打印模式下的支架效果更好（图2）。图1 四种打印支架的结构电镜图图2 培养细胞后的支架分别于1、3、7日获得的细胞成活率二、体内实验：在大鼠牙槽构建模型，验证模拟天然组织的结构和组成可促进组织有效整合这一理论，阐明纤维形态学、纤维间距、化学组成对牙周组织再生的影响。在这一环节，作者选用的支架纤维形态学为有序（Aligned），因其在之前的结果中效果更佳；而纤维间距尽管在上一环节表现不尽人意，但为了促进组织再生（提供更大的空间以便于细胞增殖），作者参考了其他文献，选用了500 μm的间距；化学组成则为该课题组之前的研究成果，在普通PCL上覆盖氟化磷酸钙（Fluorinated calcium phosphate，F/CaP）使牙槽骨再生更加稳固以支撑牙周韧带的生成；同时，为了防止软组织渗透进入创伤部分阻碍牙周再生，作者也添加了胶原（Collagen）提供临时屏障，抵挡牙龈上皮细胞和纤维原细胞的侵入。因此在对比实验中，共有4组，分别为对照组（Sham）、胶原组（Collagen）、覆盖氟化磷酸钙的有序骨架组（Aligned+F/CaP）、在空隙填充胶原的覆盖氟化磷酸钙有序骨架组（Aligned+F/CaP_COL）。在植入大鼠牙槽后分别于第3、6周检测骨体积（BV）和骨填充比例（BF），发现Aligned+F/CaP_COL的表现更佳（图3）。图3 骨体积（BV）和骨填充比例（BF）对比小结作者的成果为牙周组织再生提供了新的治疗思路，但目前仍停留在小型动物实验阶段。未来如果能成功进行大型动物甚至人体实验，将大大提升这一方法的可行性。 参考文献[1] Arwa D, Jessica A. F, Jinping X, et al. Tissue-specific melt electrowritten polymeric scaffolds for coordinated regeneration of soft and hard periodontal tissues[J]. Bioactive Materials 19 (2023) 268–281.新一代regenHU生物3D打印机保留上一代高精度、高稳定性优势的同时，提供更为简洁的模块化设计，可根据用户应用方向自行定制独特组合功能。设备整体专为生物打印考量，提供从料仓到打印平台全程的细胞生理温度和无菌环境。如需了解细节，请拨打联系电话：021-37827858 或 13818273779（微信同号）。REGENHU生物3D打印机 R-GEN100 的样机已经到锘海啦！欢迎各位老师前来测样！REGENHU生物3D打印机，请点击链接：REGENHU生物3D打印机● 生物3D打印应用 | 挤出与静电纺丝配合打印三维活性生物结构● 生物3D打印的原理与实验方案（一）：生物墨水及新兴研究方向● 生物3D打印应用 | 电极心肌贴片● 生物3D打印应用 | 缓释复合成分药片联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

自17世纪中叶胡克用自制的显微镜发现了植物细胞以来，植物科学研究就一直与光学显微镜的发展密切相关。荧光标记和光学切片的发展也大大地加快了我们对组织微观形态、细胞发育、蛋白质定位和植物-微生物相互作用的研究进程，近年亚细胞级分辨率的3D成像技术也有助于研究植物的组织结构及其复杂的生理特性。然而，植物细胞本身的光学不透明特性使观察植物体及其内部组织器官受到极大限制，使成像深度被限制在了50μm左右。相比动物，植物还含有一些光敏色素和芳香族化合物，这些成分也容易被激光激发，从而在成像时产生噪音。组织透明技术结合光学成像和图像处理技术，能够将整个器官或全身快速透明并进行结构和细胞分析，为植物3D成像的发展提供了一个非常有前景的解决方案，能帮助研究人员在更接近自然的状态下观察植物的内部构造，有助于农作物品种改良、内部病虫害检测等，对推进植物学科领域的研究进展具有重要意义。（图1）图1. 植物组织透明、三维(3D)成像和数据分析流程时至今日，科学界已经涌现出许多先进的透明化技术，它们各具特色，适合不同领域的研究。植物体由于有细胞壁和叶绿体等特殊组分, 导致光学透明技术在植物中的应用面临很大挑战。植物组织不透明的原因主要有两点：一点是色素对光的吸收，另一点是具有大范围光折射率的细胞组分造成的光散射。为了达到生物样本光学透明的目的, 可以采用化学或物理方法去除样本中的色素和脂类物质从而减少样本对光的吸收和散射,并将样本浸入指定的匹配液中, 以获得均匀的内部折射率匹配。（图2）图2.植物组织透明化原理近二十年来，已有大量组织透明技术被开发应用在了植物组织成像领域。目前常用的植物组织透明方法可以分成基于有机溶剂的透明化方法和基于水性溶剂方法。1．基于有机溶剂的光学透明技术有机溶剂通常具有高脂溶解能力和高折射率(RI=1.5)的特点, 可使处理样品快速透明化。常见的有机溶剂透明化方法有BABB,3DISCO,uDISCO, vDISCO, PEGASOS等方法。这些方法都需要对样品先进行脱水，然后再用高折射率的试剂对样品进行折射匹配，从而实现样品的组织透明。基于有机溶剂的透明技术相对稳定, 可用于多种不同类型的组织。然而, 使用的有机溶剂大多具有毒性, 脱水过程中组织收缩严重, 以及导致荧光蛋白淬灭, 限制了有机溶剂透明方法的使用, 降低了其利用率。Visikol® for Plant Biology™（锘海代理）是2013年Villani等人发明的专为植物样本设计，可替代水合氯醛，快速、易用，样本无需固定前处理，与免疫组化兼容的透明剂。他们将生姜、冬青、罗勒、牛至及拟南芥组织样本分别使用Visikol试剂（折射率为1.4450）和水合氯醛进行透明化处理及显微观察，结果表明Visikol试剂对所有被测组织样本完全可以达到与水合氯醛一样清晰度的成像效果。（图3）图3. Visikol试剂透明化不同植物组织后显微成像结果：罗勒叶片上有气孔和头状、盾状的腺体的表皮(图1A)和叶肉细胞和叶绿体(图1B)。牛至叶脉上的表皮毛(图1C)、头状油腺细胞(图1D)和盾状油腺细胞(图1E)和叶肉细胞(图1F)。拟南芥根尖分生组织细胞(图1G)和分化木质部(图1H)Visikol 组织透明化试剂盒Visikol组织透明化试剂盒，请点击链接：Visikol 组织透明化试剂盒2．水溶剂性的组织透明化方法基于有机溶剂的透明技术无法保持荧光蛋白的的荧光以及脱水引起的组织结构的收缩，使基于有机溶剂的透明技术受到了限制。水溶剂性的组织透明化方法则具有荧光基团保护性好，生物相容性好及操作安全的优点。水溶剂性的组织透明化方法包括被动浸泡型、蛋白水化型和水凝胶包埋型三种方法。硫二甘醇 (TDE) 是一种水溶性低黏度液体, 可以通过水溶液稀释调节折射率的范围。透明植物器官成像方法TOMEI (transparent plant organ method for imaging)就是TDE作为透明化试剂的。动物组织样品在97% TDE溶液中浸泡1–2天后体积变得非常小。而在植物组织中, 用97% TDE处理不会导致植物器官的收缩或膨胀, 植物器官可能因细胞壁的刚性而显示出对高浓度TDE的耐受性。TOMEI法主要包括固定和TDE处理2个步骤。TOMEI-I使用乙酸和乙醇（1：3，1-2h）的混合液固定样本，TOMEI-II使用4%PFA（1h）固定样本。TOMEI-II方法对样品的形态和荧光信号保存相比TOMEI-I要好。除去固定因素，高浓度的TDE（95以上）也会使内源荧光淬灭，而50–70% TDE可以很好的实现植物透明化而且对植物的样本形态和信号保存较好。但是TOMEI依然存在无法完全去除样品色素和荧光信号降低的缺点。2022年发表的iTOMEI技术可以克服TOMEI技术的缺点。iTOMEI技术使用1%PFA固定样本，使用磷酸缓冲液（PH8.0）配制20%的硫代甜菜碱去除植物色素，使用70.4%的碘海醇代替TDE用作折射率匹配试剂（图4）。(A)(B)图4.不同植物组织透明化方法比较：（A）拟南芥幼苗分别用PBS, TOMEI-II, iTOMEI透明化处理；（B）对用PBS, TOMEI-II, iTOMEI透明化处理后的拟南芥叶片的H2B-GFP表达情况进行成像。基于对蛋白质进行水化的透明化方法包括样本脱脂和蛋白水化两个步骤。为了保护样品的荧光信号，水性透明化方法使用表面活性剂进行脱脂，表面活性剂的脱脂时间比有机溶剂脱脂时间长。Warner团队使用Triton X、甘油与尿素结合使实现了玉米、苜蓿、烟草（豆属，豌豆属)和豆科植物的根瘤的组织透明化。Kurihara团队对多元醇、表面活性剂和尿素组合的化学试剂筛选后建立起木糖醇、脱氧胆酸钠和尿素相组合的具有高透明效率、多种荧光蛋白信号保护能力并适用多物种多种组织的ClearSee透明化方法。ClearSee在保持荧光蛋白活性的同时, 也降低了叶绿素自发荧光, 打破了植物组织由于叶绿素存在而造成的成像障碍。因此, 研究人员可使用ClearSee进行多色成像, 并获得植物样本中精确的三维结构和特定的基因表达模式。但是在用ClearSee透明植物样品的时候，会出现部分样品褐化的现象，这是由于ClearSee处理会导致一些富含原花青素衍生物的组织被氧化从而使样品褐化。Daisuke团队通过在ClearSee中添加还原剂亚硫酸钠或者半胱胺盐酸盐可以有效的防止样品褐化，从而建立了ClearSeeAlpha透明化方法，鉴于半胱胺盐酸盐的价格是亚硫酸钠的100倍，故在ClearSeeAlpha中使用亚硫酸钠（图5）。Nagaki团队在ClearSee基础上建立了ePro-ClearSee透明化方法，该法在进行ClearSee透明化以前样品先进行纤维素酶对细胞壁进行酶解，然后再用异丙醇处理增加样品的通透性，从而使样品更加适合进行免疫组化反应。图5.ClearSeeAlpha可以防止在组织透明化过程中褐色色素的形成：CS: ClearSee;CS4: ClearSee+ 2-aminoethanethiol hydrochloride(半胱胺盐酸盐); CS5: ClearSee+ 2- Sodium sulfite (亚硫酸钠)PEA-CLARITY是在CLARITY技术的基础上发展起来的一种水凝胶包埋型植物透明化方法，该方法通过使用细胞壁降解酶增加细胞壁的通透性, 以及用淀粉水解酶减少淀粉颗粒的光学干扰, 克服了植物因存在细胞壁和淀粉粒而造成的渗透和成像限制，可显著提高叶片组织的透明度。酶处理在不需要对材料进行任何切片的情况下可使抗体能够渗透到整个组织中，在保留细胞结构的同时使蛋白质在完整组织中进行3D定位。通过对荧光蛋白和抗体标记进行光学成像后, 无需对材料进行任何切片即可获取蛋白质或基因在完整组织中的三维定位。但是PEA-CLARITY透明技术也存在局限性, 如糖含量较高的组织在长时间透明过程中可能出现褐变现象, 酶处理后的组织更加脆弱, GFP等荧光蛋白的信号会减弱等。此外, 该方法处理周期较长, 通常需要4–6周才能完成样本透明。3．其它组织透明化方法乳酸和水合氯醛是常被用于植物透明化的两种试剂。它们能被用作植物的透明化试剂，主要是因为它们的折射率在1.43左右，折射率是和植物细胞壁的折射率比较接近的。水合氯醛被广泛的应用于植物的组织透明化，它可以对拟南芥的叶片，花朵，角果等各种组织进行透明化，而且还可以与品红，苯胺蓝，GUS等染色试剂联合使用。水合氯醛还可以与希夫试剂联合使用对细胞PI染色（mPS-PI）观察植物的细胞壁。然而水合氯醛具有麻醉性，且会淬灭植物的内源荧光，从而使该试剂在植物透明化上受到了一定的限制。Shih等人使用不同浓度的氢氧化钠、乳酸、脂质和蛋白质水解酶、水合氯醛、甲苯及各种脂质溶剂对种子进行处理, 研发出一种改进的氢氧化钠-水合氯醛法, 可用于富含脂肪的种胚进行透明化, 该技术已经应用于枫树、油菜、西瓜及向日葵等油脂贮藏量高的种胚透明。尽管已有多种透明方法成功应用于植物组织和器官的成像及其功能研究, 但现有透明方法应用于大体积样品的整体透明、标记与三维成像等方面仍存在巨大挑战。(1) 较为剧烈的透明化方法可去除细胞内大部分光不透明成分, 获得高度透明样本, 后期结合细胞壁特异性染料或抗体进行荧光标记或免疫标记, 可实现大体积样本内细胞形态与结构分布的荧光示踪。但剧烈的透明化处理可能造成细胞内结构和成分被严重破坏, 难以对亚细胞组分和结构进行标记和后续分析。 (2) 对于已有遗传转化体系且含有荧光标记的植物样本, 可以采用温和透明方法进行透明化处理后进行三维可视化成像, 但样本体积过大所需透明时间较长且会降低组织内部深处荧光信号的强度和对比度。(3) 对于尚未建立遗传转化体系的植物样本, 可以利用抗体免疫标记的方法进行标记与成像, 但仍需根据成像内容和目的选择合适的透明方法,防止透明化造成目标物丢失。(4) 植物的果实和种子等致密大组织材料内糖类、淀粉和脂质等含量较多, 透明方法仍需要进一步优化。总之与动物组织研究相比，植物组织透明化方法的研究仍处于早期阶段。鉴于不同植物器官的脂质、蛋白质和糖成分各不相同，所以植物组织透明化试剂还需要进行进一步系统的筛选。透明化方法可以使组织透明，但要实现组织结构的可视化，还需要合适的成像工具。近年发展起来的光片显微镜就是适合组织透明化成像的工具。光片显微镜技术改变了传统显微镜光源照射方式，在同样信噪比的情况下光片显微镜可以将3D成像速度提高到共聚焦显微镜或双光子显微镜的数十到数百倍，而光毒性减少数十至数百倍。因此光片显微镜技术以低光毒性、高速的三维成像优势而被Nature Methods评选为2014年的年度方法学。但是传统光片显微镜存在对厘米级样本进行微米级或更高分辨率成像时成像效率不高的问题。而平铺光片技术作为一种新型的平面光片照明显微技术，通过对空间光调制器加载不同的相位图实现快速平铺短而薄的光片，从而达到扩大视场且不影响空间分辨率和光学层析能力，可以获取在视野范围内各处成像分辨率均一的高分辨率图像。锘海LS18光片显微镜采用了这种平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，使得3D透明化组织成像在生物医学研究中更加可靠及可行。LS18已经在脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域得到了广泛的应用。自主研发新型平铺光片显微镜锘海LS18平铺光片显微镜，请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜参考文献：1. Hériché M, Arnould C, Wipf D, Courty PE. Imaging plant tissues: advances and promising clearing practices. Trends Plant Sci. 2022 Mar 23:S1360-1385(21)00349-6.2. Palmer WM, Martin AP, Flynn JR, Reed SL, White RG, Furbank RT, Grof CPL. PEA-CLARITY: 3D molecular imaging of whole plant organs. Sci Rep. 2015 Sep 2;5:13492.3. Sakamoto Y, Ishimoto A, Sakai Y, Sato M, Nishihama R, Abe K, Sano Y, Furuichi T, Tsuji H, Kohchi T, Matsunaga S. Improved clearing method contributes to deep imaging of plant organs. Commun Biol. 2022 Jan 10;5(1):12.4. Villani TS, Koroch AR, Simon JE. An improved clearing and mounting solution to replace chloral hydrate in microscopic applications. Appl Plant Sci. 2013 May 7;1(5): 1300016.5. 马灵玉,祁晓红, 胡子建, 沈微微, 王广超, 张柏林, 张曦, 林金星. 光学透明技术在植物多尺度成像中的应用[J]. 植物学报, 2022, 57(1):98-110.联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

背景介绍传统的荧光（Fluorescence）组织成像，是将成像组织置放于不断发射特定波长的光源照射下进行。受同一个光源照射影响，周围的组织自体同样会产生荧光，称为背景荧光。背景荧光的存在将使得信噪比下降，不利于对目标组织进行成像。因而近几年，科研工作者开始寻求一种新的发光成像——余辉发光（Persistent luminescence）。余辉发光是物体在照射光源并撤去光源后，持续发光的现象。因为发光时不再接受光源照射，因而在应用于组织成像时，能够减少自体荧光背景的影响，提高信噪比（图1）。图1 荧光和余辉发光的原理对比图（蓝色箭头为激发光；绿色箭头为散射光；红色箭头为发射光；褐色箭头为背景荧光。强度可参考箭头粗细）尽管余辉发光有如此明显的优势，目前涉及的材料仍有以下几个问题：1、材料主要为大型晶体，涉及极端高温的合成环境并缺乏纳米结构和表面性质上的可调性；2、材料成像多为可见光和NIR-I，成像深度有限；3、激发材料发光的波长多为可见光或紫外，能量低，不利于材料能量富集；4、一些可富集高能量的由X光激发的材料所发射的波长在可见光和NIR-I范围内，成像深度同样有限。材料研发针对以上问题，Peng Pei等人通过在NaGdF4、NaGdF4纳米粒子中加入镧系元素掺杂剂，成功合成出了X光激活的余辉发光纳米粒子（Persistent luminescence nanoparticles，PLNPs）。通过调整加入的元素种类，使得PLNPs具有可调谐性，且均在NIR-II波段内（图2）。图2 通过掺入不同的稀土元素（Er、Tm、Ho、Nd）调整纳米粒子在NIR-II波长段的发射波长材料优化文章中涉及的主体材料有NaYF4、NaGdF4 两种，因而可优化的方向非常多。作者首先将作为主体的NaGdF4、NaGdF4 同时应用于一个纳米粒子中，形成壳核结构。之后对纳米粒子的掺杂剂浓度、核体积、壳厚度、结晶相（Crystalline phase）、主体基质（Host matrix）等性质进行的考察。其中对于主体基质，作者发现壳核使用同一种主体材料（NaYF4或NaGdF4）将获得更高的纳米粒子发光强度。这可能是由于同一种主体材料原子大小相同，使得晶体的缺陷（Defect）更少。体内成像优化后的Er-PLNPs进行了小鼠的腹部血管成像和输尿管成像测试。在腹部血管成像测试中，相对于荧光成像，余辉发光成像获得了更高的肿瘤/正常组织亮度比（T/N ratio），尤其在注射后的5 min时，可达到荧光成像信噪比的3.7倍。而在输尿管成像测试中，作者在小鼠肾盂部位注射后，肾盂、输尿管和膀胱都能够在NIR-II成像中观察到，其T/N比相对于荧光成像达到了4.1倍。图3 余辉发光纳米粒子（上）与荧光纳米粒子（下）分别在注射后 5、10、20 min 得到的NIR-II成像图4 余辉发光纳米粒子（红）与荧光纳米粒子（蓝）注射后的肿瘤与正常组织信号强度比（T/N ratio）小结凭借可调谐的NIR-II成像波长、高信噪比、高分辨率、低细胞毒性等特点，Peng Pei等人的成果大大拓展了现有X光激发的余辉发光材料的种类和应用场景。但同时，发光效率仍有待提高，降低用于激发的X光剂量使其达到安全门槛也是今后拓展研究的重要方向。参考文献[1] Pei, P., Chen, Y., Sun, C. et al. X-ray-activated persistent luminescence nanomaterials for NIR-II imaging. Nat. Nanotechnol. 16, 1011–1018 (2021).锘海 SWIR 1.0 近红外二区活体荧光成像系统采用低噪声和高灵敏度的进口InGaAs 红外探测器，结合动物气体麻醉装置及便捷的操作界面，实现实时荧光信号成像。通过镜头切换，可分别完成宽场和局部放大成像，具有非常高的荧光信号采集能力。超高帧频不仅可以实现单幅图片采集，更可以完成视频拍摄，帮助您捕获整个实验过程。● 近红外二区小动物活体成像——高信噪比双成分造影剂协助肿瘤手术成像● 近红外二区小动物活体成像 —— 呼吸速率监控● 近红外二区小动物活体成像 —— 稀土纳米颗粒协助肿瘤切除手术联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

2022年4月18日，国际学术期刊Chinese Medicine在线发表了复旦大学基础医学院中西医结合学系冯异团队的研究成果“Three-dimensional visualization of electroacupuncture-induced activation of brown adipose tissue via sympathetic innervation in PCOS rats”。多囊卵巢综合征 (PCOS) 是一种复杂且异质性的女性生殖内分泌和代谢紊乱性疾病，与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、肝损害等密切相关。在所有PCOS女性患者中，约有一半存在向心性肥胖，不孕、心血管疾病、糖尿病和非酒精性脂肪肝的发生率明显高于瘦型PCOS患者。并且PCOS对后代的新陈代谢也有显著的影响。最近的研究表明，脂肪组织包括白色脂肪组织 (WAT) 和棕色脂肪组织 (BAT) 在PCOS的发生、发展和预后中发挥着重要作用。哺乳动物WAT的功能是储存和释放能量，而BAT的功能是针对不同的刺激消耗能量和产生热量。BAT的产热活性主要依赖于位于线粒体内膜的线粒体棕色脂肪解偶联蛋1 (UCP1)的功能。临床实践中，EA已被证明可改善PCOS患者的肥胖和生殖功能障碍，在PCOS大鼠模型研究中表明EA可以影响WAT。然而，BAT在PCOS和EA治疗后的功能和神经调节仍然未知。本研究应用双氢睾酮 (DHT) 或高脂饮食，分别建立PCOS和肥胖模型，并利用透明化三维成像技术探讨BAT在PCOS大鼠模型中的作用及其与EA的关系。该研究成果是本月继厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组使用锘海LS18平铺光片显微镜在Nature子刊发表 “Carbonized paramagnetic complexes of manganese (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors(点击链接看文章详情)” 研究成果后的另一佳作。该文通过对大鼠脂肪样本进行免疫染色和组织透明化处理后使用了锘海LS18平铺光片显微镜进行3D成像。原文Fig. 4A-C采用锘海LS18平铺光片显微镜对肩胛骨BAT进行3D荧光成像，结果显示肥胖和PCOS模型TH（酪氨酸氢化酶，标记交感神经）和 UCP1 （解偶联蛋白1，标记BAT活性）阳性细胞的数量减少，并且经过 EA 治疗后有所恢复（红色：UCP1;绿色：TH）。原文Fig. 4D 三维荧光成像结果层切展示TH（绿色）和 UCP1（红色）的共定位。视频链接：https://v.qq.com/x/page/g33335pmaca.html原文Video S1 视频展示对照组BAT使用UCP1（红色）和TH（绿色）抗体染色后三维荧光成像结果。文章链接锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的平铺光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜，请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务往期相关文章推荐 《Nature》子刊：锘海LS18平铺光片显微镜和组织透明化技术助力开发新型MRI造影剂用于原位肿瘤早期诊断锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

2022年4月11日，国际学术期刊Nature Communications在线发表了厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组的研究成果“Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors”。恶性肿瘤的早期诊断在临床中非常重要。磁共振成像 (MRI) 已广泛应用于恶性肿瘤，如脑瘤、肝癌的诊断。钆造影剂是临床上最广泛使用的磁共振增强造影剂，但因其较低的弛豫率、无靶向性，并且具有体内沉积、诱发导致肾病患者出现肾源性系统性纤维化等缺点，已被FDA加入黑框警告 (black box) 。脑胶质母细胞瘤 (GBM) 是最致命的原发性脑部肿瘤，其诊断后的中位生存期仅为 14 个月。主要原因是血脑屏障 (BBB) 的存在阻止了超过98%的小分子和所有大分子化疗药物进入大脑，同时也阻碍了磁共振造影剂的早期脑瘤影像诊断效果。针对临床磁共振造影剂减毒增效的临床需要和技术需求，本研究设计以食品添加剂锰葡萄糖酸盐和氨基酸为前体，开发出了锰 (II) 碳化顺磁性配合物(Mn@CCs)。研究发现，与临床最广泛使用的马根维显 (Gd-DTPA) 相比，Mn2+密封在碳化壳中实现了超高的Mn2+稳定性和r1弛豫率 (22.1mM−1s−1, 9.4T) ，且同时具备优良的光学性能。种种优点表明Mn@CCs具有很高的潜力，为早期的分子诊断和生物医学成像提供了新的选择。该研究成果是继2021年中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌研究组使用锘海LS18平铺光片显微镜在国际学术期刊Science发表“Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors（点击链接看详情文章）”研究成果后的另一力作。该文中的小鼠脑样本采用了锘海自主研发的组织透明化试剂盒进行组织透明化，并使用锘海LS18平铺光片显微镜对样品进行3D成像。原文Fig. 7d 表达RFP胶质母细胞瘤小鼠的完整鼠脑透明化前后（黄色箭头表明肿瘤所在位置）原文Fig. 7e 3D 荧光成像采用锘海 LS 18 平铺光片显微镜以单细胞分辨率对全脑及肿瘤进行3D荧光成像（灰色：全脑轮廓；红色：表达RFP胶质母细胞；绿色：Mn@CCs）查看清晰视频请搜索链接：https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41467-022-29586-w/MediaObjects/41467_2022_29586_MOESM6_ESM.pptx论文采用锘海透明化方法及LS18平铺光片显微镜采集、处理数据点击此处下载阅读全篇论文Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors锘海组织透明化试剂盒 Cat#：NH210701锘海自主研发的组织透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。锘海透明化试剂盒（Cat#：NH210701）锘海组织透明化试剂盒，详细信息请点击链接：锘海组织透明化试剂盒锘海LS18平铺光片显微镜专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。自主研发生产新型平铺光片显微镜锘海LS18平铺光片显微镜，请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜锘海一站式科研服务让科研变得更简单组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。锘海一站式科研服务，详细信息请点击链接：锘海一站式科研服务联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

随着我国人民的生活水平逐渐提高，动脉粥样硬化在中老年疾病中变得越来越常见。其对应于体内的具体表现，是在动脉壁上堆积脂质和坏死组织，形成斑块（plaque）。目前，有多种成像技术应用在动脉粥样硬化斑块的发现上，如正电子发射断层扫描（positron emission tomography，pet）、核磁共振成像（magnetic resonance imaging，mri）等。但此类单纯的解剖学成像只能判断有无斑块，却无法评估每一处的风险——动脉粥样硬化始发于儿童时期且持续进展，因而大部分成年人或多或少有些损伤，却并不是每一处都会造成诸如中风等严重后果。因此我们仍需开发新的诊断方法，用于评估每一处斑块存在的风险。其中一个方法，就是检测斑块附近的单核细胞（monocyte）。循环单核细胞（circulating monocyte）主要分为ly-6chi与ly-6clo两类。研究发现只有ly-6chi及其分化的泡沫巨噬细胞与动脉粥样硬化炎症反应相关，并将导致动脉粥样硬化斑块。因此我们寻找的方法，需能够检测ly-6chi和巨噬细胞的分布情况。在此之前，已经有诸多对巨噬细胞成像的方法。但这些方法对ly-6chi单核细胞及其分化的泡沫巨噬细胞均没有很好的选择性。甚至会因为对其他种类细胞的成像而降低诊断准确性。因此在该文章中，作者开发了一种新的单壁碳纳米管（single-walled carbon nanotubes，swnts）。实验首先对小鼠进行为期4周的高脂肪饮食，以提供造模前提；而后多次注射链脲霉素——一种糖尿病造模试剂，可使鼠类的血糖升高；之后，于实验第6周对小鼠颈动脉进行结扎，以形成动脉粥样硬化斑块；在第8周注射单壁碳纳米管，并于注射后第6、24、48、72小时对处死小鼠的颈动脉进行光声成像与流式细胞分析。图1 实验步骤在流式细胞分析的结果（图2、3）中，可以很清楚地看出很大比例的单壁碳纳米管可高选择性地被ly-6chi单核细胞及泡沫巨噬细胞摄取。图2 流式细胞分析结果1：泡沫巨噬细胞（上二图）和ly-6chi单核细胞（下二图）分别摄取了73%和57%的单壁碳纳米管图3 流式细胞分析结果2：其他免疫细胞摄取了单壁碳纳米管的比例均非常低光声成像结果也同样表明，在注射单壁碳纳米管6h后，存在动脉粥样硬化斑块的动脉信号强度远高于正常动脉（图4、5）。之后的差距逐渐减小，主要是单壁碳纳米管被代谢所致。图4 光声信号结果对比图5 实验组（c）与对照组（d）的成像对比（图c有红白色信号，为强烈的光声信号；图d仅有黑白信号，为超声信号，无光声信号）文章的这一发现，无疑可以为之后的动脉粥样硬化斑块检测提供思路。正如作者在文章中所言：“对那些促进斑块不稳定和致病的细胞进行成像，可以辨识炎症、高风险血管区域；预测和评估板块脱落风险；指导治疗方向。”参考文献：[1] gifani m, eddins d j, kosuge h, et al. ultraselective carbon nanotubes for photoacoustic imaging of inflamed atherosclerotic plaques[j]. advanced functional materials, 2021, 2101005美国photosound 小动物3d光声/荧光成像系统 (paft)美国photosound小动物全身3d光声/荧光成像系统(paft)为小动物活体成像和表征提供了完整的解决方案。该系统集成了三种互补的三维成像模式：光声成像(pat)、荧光成像(fmt)、生物发光成像(blt)，可同时实现小动物的3d光声、3d荧光和3d生物发光成像,该系统可为生物组织提供高分辨率、高对比的解剖学成像效果。可实现近红外一区和近红外二区（670-2600 nm）小鼠全身3d光声/荧光成像系统，采用opo可调式激光器，提供670-2600 nm连续脉冲激光、完全3d光声成像(具有100 um等向分辨率的完全三维成像，非切片叠加成像)、高通量 (256个电子通道)、灵敏度高(60 nm icg )、桌面式设计，方便使用、成像速度快 (完成一次3d扫描需30秒)。● 美国photosound小动物全身3d光声/荧光成像系统● 小鼠解剖应用笔记 —— 美国photosound小动物全身3d光声/荧光成像系统联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

在疫情仍未停歇的当下，做好个人防护对每个人来说既是简单的，又是必要的。而群体防护的顺利实施，则要归功于抵抗新冠的各类疫苗了。这其中，就有免疫效果不错的mRNA疫苗。mRNA疫苗具有广泛的应用领域和显著的治疗优势，因而成为诸多药企竞相追逐的热点。本期，小编就带大家了解一下mRNA疫苗开发的工艺流程。01DNA原液供应质粒 DNA (pDNA) 是mRNA疫苗生产不可或缺的原材料，可用作 mRNA 的模板。在制备时，第一步是要提取病毒刺突蛋白的DNA序列，然后构建带有该序列的DNA质粒，接着经过扩增、纯化、质检等诸多过程形成我们最终所需的DNA原液。在mRNA疫苗开发应用方面，质粒生产也面临着诸多的压力，尤其是 GMP的压力。02mRNA原液制备体外转录（IVT）是mRNA原液制备的主要手段。pDNA 可作为IVT的模板，合成所需的 mRNA 分子。IVT的工艺比较复杂，除使用pDNA外，还需要添加合成mRNA的必要成分，如核苷酸和mRNA聚合酶。为提高mRNA稳定性，降低其免疫原性，还需在 mRNA的5'末端添加加帽试剂。除此之外，合理设计5'或3'非翻译区(UTR)也可以调整mRNA的稳定性及蛋白质的翻译效率。mRNA的纯度影响着翻译后蛋白的效力，因此，mRNA原液制备后的纯化过程也是必不可少的，可采用TFF（切向流过滤）或SEC（尺寸排阻色谱）等方法来去除少量残留杂质。03mRNA包封为防止疫苗有效成分mRNA进入细胞前被降解，可采用脂质纳米颗粒(LNP)对其进行包裹。具体过程为：将各种脂质成分按一定的比例进行混合，溶解在乙醇或其他有机溶剂中；将mRNA溶解于水中，并用酸性缓冲液稀释至合适浓度。配置好的两相溶液在微流控设备上进行均匀混合，快速制备包裹mRNA的核酸脂质纳米颗粒。与微流控设备匹配的核心耗材为微流控芯片，图1即为芯片内部通道示意图。图1.微流控芯片通道示意图04后处理mRNA包封后需要进一步的纯化。可通过超滤去除有机相以及未包封的游离成分。超滤过程中可以进行溶剂缓冲体系的置换，以及PH值的调节，最终复合物的浓度根据需求进行灵活控制。图2.超滤管至于细菌、微生物的清除，一般采用0.22μm的除菌级过滤器即可。纯化后的mRNA-LNP溶液还可以添加必要的辅料成分，以提升产品长期保存的稳定性。05储存运输mRNA疫苗布局开发过快也带来了些不可避免的问题，即需要低温来保持疫苗稳定，这大大的提升了对储存和运输的要求。在储存运输过程中需进行持续的温度监测，以确保产品始终处于规定的温度范围，否则很难保证最终患者给药时产品的安全性和有效性。总结：mRNA疫苗有着广阔的应用前景，其开发过程也必然充满挑战。了解开发的各个工艺流程，方能锁定难点，各个击破，向疫苗的成功开发更进一步。纳米药物制备系统应用范围：● 核酸药物发展的前沿方向● mRNA疫苗的开发与挑战● 核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响● 核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格● 核酸脂质纳米粒科普——后处理联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

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锘海招聘职等你来锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质。总部位于上海漕河泾开发区松江园区内，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。并提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。另外，锘海还为您提供纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务——从处方筛选到制剂表征全线过程。适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。招聘岗位技术销售工程师北京/郑州/青岛/西安/成都/武汉/南京/苏州/沈阳/长沙岗位职责：1、 负责公司光片显微镜系列服务及耗材在该区域的推广2、 开发及维护新老客户，并完成业绩及收款3、 维护指定区域内客户，为客户提供全面的解决方案及服务岗位要求：1、 生物相关专业，细胞，病理，脑科学，血管，神经等方向尤佳2、 有出色的沟通和表达能力以及独立工作的能力销售工程师西安/成都/济南  岗位职责：1、 负责公司药物制备系列产品在该区域的推广2、 开发及维护新老客户，并完成业绩及收款3、 维护指定区域内客户，为客户提供全面的解决方案及服务岗位要求：1、 药学相关专业，制药工程等方向尤佳2、 有出色的沟通和表达能力以及独立工作的能力产品应用工程师上海岗位职责：1、 负责公司光片显微镜系列在销售过程中的技术支持及样本分析2、 协助维护指定区域内客户，为客户提供全面的解决方案及服务3、 及时了解行业信息，能够给产品的CRO服务提供更多的建议与方向选择4、 负责仪器的安装调试及培训验收工作，并能积极配合各学术会议及讲座岗位要求：1、 神经生物学、免疫学、细胞学、肿瘤学、生物学、发育学、医学等专业相关领域硕士及以上2、 有出色的沟通和表达能力以及独立工作的能力实验室测样工程师上海岗位职责：1、 按照仪器要求对组织样本进行处理，并进行后续的成像及数据处理分析2、 及时了解行业信息，能够给产品的CRO服务提供更多的建议与方向选择岗位要求：1、 生物相关专业，细胞，病理，脑科学等方向尤佳2、 有出色的沟通和表达能力以及独立工作的能力研发工程师（软/硬件）上海岗位职责：1、 负责公司现有研发产品的优化维护及后改进2、 负责公司新产品线的开发及验证，并能满足要求3、 对结构，机械，电路，软件（C++，C#）等某一部分有比较深入的了解岗位要求：1、 光学、机械、电子、软件等相关专业2、 有精密医疗器械研发工作经验科研助理西湖大学高亮实验室岗位职责：1. 根据实验要求，对非活体大样本组织进行透明化、染色、三维荧光成像等工作2.分析、处理相关成像数据，学习三维数据分析软件，如amira等3.熟悉实验室仪器设备性能，做好相关仪器设备的维护与保养4.及时整理实验室各种记录，并定期归档报告岗位要求：1、本科学历，动物医学、生物相关专业2、可独立完成小鼠灌流、解剖等手术操作，基因型鉴定等分子生物学实验及协助完成动物实验3、工作认真负责，有良好的沟通能力和团队协作精神福利待遇/ 五险一金 / 定期体检 /专业培训// 员工旅游/年终奖金 / 商业保险 // 节假福利 / 出国机会/ 联系方式发送简历王女士：xiaoxia.wang@nuohailifescience.com电话咨询王女士：15216816364地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室END锘海生物科学仪器（上海）有限公司上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室www.nuohailifescience.com021-37827858扫码关注我们查看更多精彩内容

神经系统是机体内对生理功能活动的调节起主导作用的系统。近年来，随着显微成像技术的快速发展，神经细胞和神经网络的研究已成为学术科研领域的热门研究。为寻求对神经组织更好的染色方案，锘海LS18测样服务中心对小鼠多个器官的神经组织进行透明化TH染色预实验，并通过LS18平铺光片显微镜上的快速扫描成像，得到了以下结果。在神经科研领域中，对神经走向的研究，离不开对神经细胞和神经网络的观察。锘海LS18测样服务部，致力于为客户带来优质的服务，团队对小鼠的多个器官组织都进行了神经TH（Tyrosine Hydroxylase）染色，总结得到更好的染色方法，对客户样本负责，更是对自己负责！ 锘海LS8平铺光片显微镜如今，我们已完成多种小鼠器官组织在LS18平铺光片显微镜上的快速扫描成像，现分享近期成像结果。小鼠肺神经染色，3.2x快速成像结果展示，如图1及图2所示：图1 小鼠肺神经成像-volume展示图2 小鼠肺神经成像-200um层切局部高清展示小鼠肺神经成像视频链接小鼠肝脏神经染色，3.2x快速成像结果展示，如图3及图4所示：图3 小鼠肝脏神经成像-volume展示图4 小鼠肝脏神经成像-200um层切局部高清展示小鼠肝脏神经成像-视频链接小鼠心脏神经染色，3.2x快速成像结果，如图5及图6所示：图5 小鼠心脏神经成像-volume展示图6 小鼠心脏神经成像-200um层切局部高清展示小鼠心脏神经成像视频链接小鼠肾脏神经染色，3.2x快速成像结果，如图7及图8所示：图7 小鼠肾脏神经成像-volume展示图8 小鼠肾脏神经成像-200um层切局部高清展示小鼠肾脏神经成像视频链接锘海生命科学凭借平铺光片专利技术，自主研发生产LS18平铺光片显微镜 (Tiling Light sheet Microscope) 是一款适用于各类透明化大组织样品及活体模式生物长时程动态监测的选择性平面照明显微镜，可在细胞级甚至亚细胞级水平上快速、低光毒性获得多色荧光标记结构的3D空间分布。作为生产商，我们不仅提供成像仪器，亦提供科研服务平台。为各地高校、科研院所、医院及企业提供从 组织透明化 → 免疫荧光染色 → 大样品高分辨3D显微成像 → 大数据分析一体化服务。另依托公司测样服务中心丰富的实验经验和LS18平铺光片显微镜的成像优势，现已推出自主研发的锘海透明化试剂盒。除此之外，免疫荧光染色试剂盒也即将问世，敬请期待！锘海旨在通过快速、多样化的研发服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化解决方案。往期推荐:锘海LS18-平铺光片显微镜锘海LS18平铺光片显微镜高分辨成像案例-小鼠脑神经成像锘海生物科学“平铺光片显微镜3D荧光成像”发文章赢奖金LS18光片显微镜成像案例--超长脊柱样本3D重构锘海LS18平铺光片显微镜高分辨率血管成像重磅来袭！联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

         在上一期的内容中（mRNA疫苗的开发与挑战），我们从四个方面谈了一下对mRNA疫苗开发的了解。相信大家对mRNA疫苗已经更加的熟悉。关于LNPs合成设备 —— 微流控设备，在实际应用中已长期证明其在合成方面的优异性能。为发掘其更多的使用价值，我们聚焦在了核酸药物发展更前沿的领域。本期，小编将从四个方面介绍核酸药物发展的前沿方向。分别为：CAR-T细胞治疗、靶向mRNA治疗、自扩增mRNA治疗和环状RNA治疗。CAR-T细胞治疗CAR-T细胞—嵌合抗原受体（CAR）细胞，是将免疫T细胞在体外进行基因重编程，使其表达能够识别病变细胞上特定抗原的受体蛋白。此外，也可将T细胞靶向抗体修饰在LNPs表面，在体内产生短暂有效的CAR - T细胞。两种制备方式有着相同的优异特性，即大大提升了T细胞的靶向性。CAR-T细胞治疗对于多种疾病的医治都有了实质性的突破，如白血病（1）、心脏纤维化（2）。图1.CAR-T细胞靶向过程图因其技术难度高、治疗风险大、费用昂贵，CAR-T治疗仍然作为其他常规治疗方法无效后的最后手段。靶向mRNA治疗mRNA治疗的诸多优势在上期内容中我们已经介绍过，然而，在其优势背后还存在着一个较大的难题：靶向性。负载mRNA的LNPs被各种类型的细胞(特别是静脉注射的肝细胞)内吞，对于除肝脏以外的器官几乎没有靶向能力等问题，成为了mRNA药物多器官治疗较大的障碍。有研究表示，可以将PV1（3）作为靶点，将表面修饰的LNPs靶向肺部。检测结果表明，肺部的mRNA得到了预期的有效表达，这也证实了靶向递送mRNA到肺部是一种治疗肺部疾病的有效方法。同样的靶向肺部，改变递送方式是否可行呢？答案是肯定的。有肺纤维化小鼠模型研究表明，mRNA-LNP的肺部吸入（4），成功的改善了小鼠的肺部功能。因此，肝脏外器官的靶向功能并非不可实现，找准位点、用对方式则可逐步攻破这一难题。图2.小鼠肺部靶向检测图自扩增mRNA治疗自扩增mRNA（sa-mRNA）疫苗与普通mRNA疫苗的区别在于，其包含单链RNA的基因工程复制子，不仅能提供制造蛋白质的指令，还可以提供扩增mRNA 的指令。这也就这意味着，在同等条件下，使用更低的剂量，便可达到相同的免疫效果。经过多年的科学探索，早期迹象表明sa-mRNA可用于预防和治疗包括流感在内的多种传染病。使用剂量小，免疫原性低等特点也吸引着更多的企业进行布局和研究。环状RNA治疗环状mRNA是近年来新兴的研究领域。与线性mRNA不同，环状RNA是高度稳定的，共价闭合的环状结构可以保护它免受外切酶介导的降解。有研究表明，SARS-CoV-2（5）环状RNA疫苗可以在小鼠脾脏内诱导强烈的T细胞免疫应答，而进一步的研究更是显示，该环状RNA疫苗能够对恒河猴产生有效保护。尽管环状RNA疫苗具有热稳定性好、编码抗原表达量高以及适用性广泛等优点，但仅有少数的环状RNA被证明可以作为蛋白质翻译模板，这也给其未来的研发及应用增添了较大的难度。结论：专注于行业及市场的前沿方向，方能尽早行动，占据未来的主动优势。以上四个前沿方向药物的制备，我们的微流控设备皆能起到助力作用，为科研直至生产的全流程提供优质服务。参考文献1. Melenhorst JJ, Chen GM, Wang M, Porter DL, Chen C, Collins MA, Gao P, Bandyopadhyay S, Sun H, Zhao Z, Lundh S, Pruteanu-Malinici I, Nobles CL, Maji S, Frey NV, Gill SI, Tian L, Kulikovskaya I, Gupta M, Ambrose DE, Davis MM, Fraietta JA, Brogdon JL, Young RM, Chew A, Levine BL, Siegel DL, Alanio C, Wherry EJ, Bushman FD, Lacey SF, Tan K, June CH. Decade-long leukaemia remissions with persistence of CD4+ CAR T cells. Nature. 2022 Feb 2. doi: 10.1038/s41586-021-04390-6. Epub ahead of print. PMID: 35110735.2. Rurik JG, Tombácz I, Yadegari A, Méndez Fernández PO, Shewale SV, Li L, Kimura T, Soliman OY, Papp TE, Tam YK, Mui BL, Albelda SM, Puré E, June CH, Aghajanian H, Weissman D, Parhiz H, Epstein JA. CAR T cells produced in vivo to treat cardiac injury. Science. 2022 Jan 7;375(6576):91-96. doi: 10.1126/science.abm0594. Epub 2022 Jan 6. PMID: 34990237.3. Li Q, Chan C, Peterson N, Hanna RN, Alfaro A, Allen KL, Wu H, Dall'Acqua WF, Borrok MJ, Santos JL. Engineering Caveolae-Targeted Lipid Nanoparticles To Deliver mRNA to the Lungs. ACS Chem Biol. 2020 Apr 17;15(4):830-836. doi: 10.1021/acschembio.0c00003. Epub 2020 Mar 13. PMID: 32155049.4. Zhang R, Jing W, Chen C, Zhang S, Mohamed M, Sun P, Wang G, You W, Yang Z, Zhang J, Tang C, Du W, Liu Y, Li X, Liu J, You X, Hu H, Cai L, Xu F, Dong B, Liu M, Qiang B, Sun Y, Yu G, Wu J, Zhao K, Jiang X. Inhaled mRNA nanoformulation with biogenic ribosomal protein reverses established pulmonary fibrosis in a bleomycin-induced murine model. Adv Mater. 2022 Feb 11:e2107506. doi: 10.1002/adma.202107506. Epub ahead of print. PMID: 35146813.5. Qu, Liang, Zongyi Yi, Y. Shen, Liangru Lin, Feng Chen, Yiyuan Xu, Zeguang Wu, Hongxia Tang, Xiaoxue Zhang, Feng Tian, Chunhui Wang, Xia Xiao, Xiaojing Dong, Li Guo, Shuaiyao Lu, Chengyun Yang, Cong Tang, Yun Yang, Wenhai Yu, Junbin Wang, Yanan Zhou, Qingrui Huang, Ayijiang Yisimayi, Yunlong Cao, Youchun Wang, Zhuo Zhou, Xiaozhong Peng, Jianwei Wang, Xia Xie and Wensheng Wei. “Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants.” bioRxiv (2021): n. pag.纳米药物制备系统应用范围往期推荐:mRNA疫苗的开发与挑战核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算联系我们:电话：021-37827858、13818273779（微信同号）邮箱：info@nuohailifescience.com地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室

3D生物打印是增材制造的一种形式，通过使用生物兼容性墨水或在其中添加细胞，使该墨水能够应用于三维组织工程……或许我们已经看过多次这样的生物3D打印定义。但细究打印过程的细节、步骤、原理，乃至延申到打印前的细胞培养和打印后的组织培养，或许都只有一个模糊的概念。因而，Jeremy M. Crook于2020年出版了3D Bioprinting: Principles and Protocols一书，旨在将生物3D打印前后相关的操作标准化，使科研工作者能够更为方便地开展工作。书的内容正如书名，分为Principle与Protocol两大块，前者介绍相关概念，以理论内容为主；后者则提供实验步骤，以器官作为章节分类介绍。 书的内容以生物3D打印的历史作为起始。介绍了两类生物3D打印公司：以设备和应用起家、以耗材即生物墨水的开发起家。前者以瑞士regenHU作为代表，也包括德国Envision Tec（现为美国Desktop Metal全资子公司）、日本Cyfuse等；后者则以瑞典Cellink为代表（由公司名称也能看出），包括美国Allevi、Se3D。他们能够在领域发展初期，就看到生物墨水与传统材料的区别，并开发合适的方法予以转变。在书中，相对于传统材料而言，生物墨水有一下几个特点：1、 以可控的方式被挤出，形成柱状或能维持形状的液滴等。2、 在应力作用下能够因剪切稀变特性而发生流动，但在没有负载时则保持形状。3、 可以通过交联或自组装避免被溶解，同时可以在多层结构或堆叠时维持形状。图1：生物3D打印中常见的两种方式——挤出式与喷墨式针对这些特点，需要通过以下方法使原有的传统材料转变为生物墨水：1、 加入增稠剂以提高墨水的黏度，并赋予剪切稀变的特性。2、 控制温度：某些材料在一定范围内复合生物墨水的性质3、 使用支撑材料辅助另外，作者也提到，使用生物3D打印的一个较为现实且迫切的目的，是绕开传统2D组织培养、异体组织移植、器官捐献等种种带来的限制。除了使用细胞进行常规生物3D打印解决上述几个问题外，作者也提到多个正在引起关注的研究方向：1、4D生物打印：打印后的组织仍具有一定的活动性，可随时间或在刺激物的促进下改变性质2、仿生机器人（Soft Robotics）：打印肌细胞和导电材料制作人工肌肉模型，在给予适当刺激后，可使细胞发生收缩，成为生化机器人。3、器官芯片（Organ-on-a-Chip）：在体外进行器官小型化，打印出模拟器官，以研究其独立或与其他器官之间的功能、活动、反应或机理，如药理学、毒理学研究。4、血管组织（Vascularized Tissues）：弥补传统器官培养中缺乏血管网络，难以真实模拟体外器官的缺陷。图2：得益于生物3D打印，科学家可以在体外构建更贴近真实情况的复杂血管网同时，生物3D打印也较为适合在GLP（good laboratory practice，药物非临床研究质量管理规范，在生物3D打印领域可译为良好实验质量管理规范）甚至GMP（Good Manufacturing Practice，药物生产质量管理规范，在生物3D打印领域可译为良好生产质量管理规范）规范下进行标准化，从而可控地完成组织构造。 参考文献：[1] Estermann M., Bisig C., Septiadi D., Petri-Fink A., Rothen-Rutishauser B. (2020) Bioprinting for Human Respiratory and Gastrointestinal In Vitro Models. In: Crook J. (eds) 3D Bioprinting. Methods in Molecular Biology, vol 2140. Humana, New York, NY.https://doi.org/10.1007/978-1-0716-0520-2_13.[2] Luo Y, Elumalai A, Humayun A, et al. Understanding Cancer Cell Behavior Through 3D Printed Bone Microenvironments[M] 3D Bioprinting in Medicine, 2019, 163-189.REGENHU生物3D打印机具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点，欢迎大家咨询！联系电话021-37827858 或 13818273779（微信同号）。REGENHU生物3D打印机 R-GEN100 的样机已经到锘海啦！欢迎各位老师前来测样！点击以下链接，查看往期回顾生物3D打印应用 | 电极心肌贴片生物3D打印应用 | 缓释复合成分药片生物3D打印应用 | 打印高载药量速释片剂生物3D打印应用 | 构建体外肝毒性模型生物3D器官打印——人工角膜生物3D器官打印——肠道体外模型生物3D器官打印——喉部软骨

神经科学是一门神秘的科学，也一直是生命科学研究的热点。如果有一天，我们可以搞明白神经细胞是怎么一回事，神经细胞之间是如何协作的，或许我们就能明白意识是如何产生的了？明白了我们为什么要睡觉？明白了男人和女人的大脑有什么不一样？为了明确神经元的结构和功能连接，需要对整个大脑和脊髓中的神经元及突触进行成像和追踪。组织透明化技术的发展使生物样本变得透明，为生物组织结构的三维可视化研究打开了大门，并为进一步探索人类疾病的复杂性提供了崭新的平台，近年来组织透明化技术在生物医学研究领域得到了广泛应用。BRADKE等利用3DISCO透明化技术和光片显微镜成像技术识别、追踪和评估脊髓损伤后的轴突再生，确定了轴突再生能力及再生轴突轨迹，有助于解释轴突再生机制，同时定量测定了脊髓损伤后神经胶质的活动反应。Imaging large regions of the spinal cord of GFP-M mice(a) Entire spinal cord of a GFP-M mouse cut into 3- to 4-mm-long segments, cleared and imaged with ultramicroscopy. (b) Drawing of the ultramicroscopy setup showing tissue positioning and the light path. (c) A spinal cord segment (length 4 mm, T12 to L2 spine level) of a GFP-M mouse scanned with ultramicroscopy shown in a horizontal view. (d) Cross-view projection (50-µm thickness) of the indicated region in c. White arrows in c,d mark individual axons in the white matter; red arrows mark cell bodies in the gray matter. (e) Traced white and gray matter boundaries and axon bundles (yellow arrows).阿尔兹海默症（AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损坏、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征，细胞外β淀粉样蛋白沉积和细胞内tau蛋白磷酸化是AD的主要病理特征。Liebmann等人利用iDISCO技术对阿尔兹海默症模型小鼠脑进行透明化阐明了β淀粉样蛋白沉积和小胶质细胞及脉管系统之间的空间分布关系，这将对阿尔兹海默症的科学研究和治疗产生重大意义。Double Labeling of β-Amyloid Plaques and Reactive Microgliosis, Axonal Dystrophy, or Vasculature in Cleared AD Brains with Volume Imaging（A）confocal image of β-amyloid plaques and cell nuclei double staining in a 17-month-old2xTg AD cleared mouse brain. (B) Confocal optical slices of microglia stained with anti-Iba1 antibody. (C) 3D surface rendering of four isolated β-amyloid plaques and neighboring microglia cells from the AD brain described in (B). (D)Maximum intensity projection of β-amyloid plaques and neuro filament H staining in a10-month-old 2xTgAD cleared mouse cortex(500mmthick). (E)Magnified region from (D) showing labeled axons in absence of β-amyloid plaques. (F) Magnified region from (D) showing dystrophic axons surrounding labeled β-amyloid plaques. (G) Maximum intensity projection of optical section (1mm) from the cortex of an 11-month-old 2xTgAD mouse brain labeled for plaques (anti-b amyloid anti-bodies) and vasculature. (H)Maximum intensity projection of optical section (1mm) from the cortex and hippocampus of an 8-month-old 2xTgAD mouse brain labeled for plaques (Congored) and vasculature.Chung等人通过CLARITY技术获得透明而完整的小鼠大脑，利用Thy1–eYFP信号实现了对小鼠大脑神经元进行远距离投射、神经回路、细胞关系、亚细胞结构、蛋白质复合物、 核酸和神经递质的成像。展现了大脑中复杂的精细连接和分子结构。Intact adult mouse brain imaginga, Cajal quote before CLARITY. b, Cajal quote after CLARITY: Thy1–eYFP line-H mouse brain after hydrogel–tissue hybridization, ETC and refractive-index matching. c, Fluorescence image of brain depicted in b. d, Dorsal aspect is imaged, then brain is inverted and ventral aspect imaged. e, Three-dimensional rendering of clarified brain imaged；f, Non sectioned mouse brain tissue showing cortex, hippocampus and thalamus；g–l, Optical sections from f showing negligible resolution；m, Cross-section of axons in clarified Thy1–channelrhodopsin2 (ChR2)–eYFP striatum；n, Dendrites and spines of neurons in clarified Thy1–eYFP line-H cortex.MURAKAMI等人应用CUBIC-X透明并膨大小鼠大脑，在亚细胞水平对整个小鼠大脑进行成像，并绘制出了一张小鼠大脑图谱。他们采用化学方法标记了大脑中的每个细胞，然后在大脑透明化的同时将其尺寸扩大了十倍，利用精密成像技术对神经元进行了三维重建，总计约7200万个细胞。Construction of a single-cell-resolution mouse brain atlas (CUBIC-Atlas)a, Overview of construction of the CUBIC-Atlas. b, The CUBIC-Atlas. Horizontal, sagittal and coronal view of single-plane images (left) and volume-rendered images (right) of the CUBIC-Atlas. c–j, Major anatomical areas in the CUBIC-Atlas. k, Overview of whole-brain cell counting in C57BL/6N 8-week-old male mice. l, Cell numbers in each brain area.总之，组织透明技术结合显微成像技术，极大推动了全身或全器官成像的进程，有助于加强对完整生物系统的综合理解，为神经科学研究提供了更加细致的信息，是神经科学研究领域强有利的工具。目前组织透明化方法有油性，基于水凝胶和水性的组织透明化方法。其中油性组织透明化方法主要有BABB, 3DISCO, uDISCO，FDISCO和 PEGASOS等，基于水凝胶的透明化方法有CLARITY和SHIELD，水性组织透明化方法有CLearT/CLearT2,SeeDB, FRUIT, Scale和CUBIC等方法。而锘海研发的透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能，是研究神经科学的不二之选。                                                        锘海组织透明化试剂盒参考文献：1. Ertürk A, Mauch CP, Hellal F, Förstner F, Keck T, Becker K, Jährling N, Steffens H, Richter M, Hübener M, Kramer E, Kirchhoff F, Dodt HU, Bradke F. Three-dimensional imaging of the unsectioned adult spinal cord to assess axon regeneration and glial responses after injury. Nat Med. 2011 Dec 25;18(1):166-71. doi: 10.1038/nm.2600. PMID: 22198277.2. Liebmann T, Renier N, Bettayeb K, Greengard P, Tessier-Lavigne M, Flajolet M. Three-Dimensional Study of Alzheimer's Disease Hallmarks Using the iDISCO Clearing Method. Cell Rep. 2016 Jul 26;16(4):1138-1152. doi: 10.1016/j.celrep.2016.06.060. Epub 2016 Jul 14. PMID: 27425620; PMCID: PMC5040352.3. Chung K, Wallace J, Kim SY, Kalyanasundaram S, Andalman AS, Davidson TJ, Mirzabekov JJ, Zalocusky KA, Mattis J, Denisin AK, Pak S, Bernstein H, Ramakrishnan C, Grosenick L, Gradinaru V, Deisseroth K. Structural and molecular interrogation of intact biological systems. Nature. 2013 May 16;497(7449):332-7. doi: 10.1038/nature12107. Epub 2013 Apr 10. PMID: 23575631; PMCID: PMC4092167.4. Murakami TC, Mano T, Saikawa S, Horiguchi SA, Shigeta D, Baba K, Sekiya H, Shimizu Y, Tanaka KF, Kiyonari H, Iino M, Mochizuki H, Tainaka K, Ueda HR. A three-dimensional single-cell-resolution whole-brain atlas using CUBIC-X expansion microscopy and tissue clearing. Nat Neurosci. 2018 Apr;21(4):625-637. doi: 10.1038/s41593-018-0109-1. Epub 2018 Mar 5. PMID: 29507408.5. Tian T, Yang Z, Li X. Tissue clearing technique: Recent progress and biomedical applications. J Anat. 2021 Feb;238(2):489-507. doi: 10.1111/joa.13309. Epub 2020 Sep 16. PMID: 32939792; PMCID: PMC7812135.锘海一站式科研服务，让科研变得更简单！锘海生命科学为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多组织透明化染色、3D荧光成像等相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

2021年是不断进步、稳步发展的一年。感恩客户朋友们的鼎力支持，感谢锘海人的汗水与辛劳。2022年是乘风破浪、不断超越的一年，我们整装出发一起开创更辉煌的未来！1月18日，我们满怀着对未来的憧憬与期待迎来锘海生物科学仪器（上海）有限公司2021总结年会，公司全体员工欢聚一堂、喜迎新年！年会上殷总对锘海在2021年整体情况做出总结回顾，并诚挚送出暖心祝福。之后，对十年如一日的优秀员工进行表彰颁奖。更有紧张刺激的抽奖活动，活泼又有趣的游戏过程令在座的领导和同事时而捧腹大笑，时而阵阵喝彩。整个年会精彩纷呈，充满欢声笑语！回顾2021这一年，锘海有收获，有喜悦，也有不易！这次年会不仅仅是对过去2021年度总结，更是展望2022宏伟蓝图。在未来的征程中，锘海会继续努力奋斗，顽强拼搏，为客户提供匠心、高品质的产品和更专业、更用心的服务！坚持致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供完善的一站式科研服务及整体解决方案。2022新的一年，我们一起虎虎生威！春节放假通知：农历春节将至，根据《国务院办公厅公布 2022 年放假安排》，春节期间放假时间，具体安排如下： 2022年1月29日（周六）——2022年2月6日（周日），放假9天。 2022年2月7日（周一）正式上班。        锘海生物提前恭祝各位福虎新年吉祥如意！阖家幸福！

在前几期的内容当中，我们重点介绍了设备的参数调控，样品的后处理等。相信广大用户对我们的设备已经越来越熟悉了。本期，我们暂不谈纳米药物制备系统本身，而是介绍一下其应用最多的一个方向——mRNA疫苗。下面，小编将从（mRNA治疗优势、mRNA疫苗开发过程、LNP系统有效递送需克服的障碍及mRNA治疗面临的挑战）四个方面浅谈一下对mRNA疫苗开发的了解。mRNA治疗优势：1、增强靶向性，对传统药物疗效不佳的疾病产生突破性的进展。 2、RNA药物不需要核递送和转录，使mRNA成为基因治疗的简单解决方案。3、mRNA的作用是短暂的，其本质上比整合到基因组中的系统更安全。4、mRNA不会改变基因本身，而是调节表达。基因治疗过程mRNA疫苗开发过程：1、拿到一定数量的感染对象抗体｡2、抗体基因测序,从成千上万个抗体中挑出潜在的优良抗体基因｡(针对熟知的特定疾病，可从已有的抗体数据库直接挑选潜在优良基因，节省抗体取得及基因测序步骤。)3、抗体基因回溯到蛋白质,完成排位后,进行病毒表面蛋白的识别与结合,观察每一个抗体之间结合能力､阻断能力｡4、分离出抗病毒较好的单克隆抗体及其编码基因｡更高的目标：利用晶体学等方法，解析出病毒表面刺突与细胞表面蛋白（“钥匙”和“锁”）之间的结构基础｡LNP系统有效递送需克服的障碍：（LNP核酸递送系统在以往的推文中已有详细的介绍，简单回顾一下其脂质载体包含的四种成分：阳离子脂质，胆固醇，中性脂质，PEG脂质。）1、在体液中保护mRNA以防止其被核酸酶降解。阳离子脂质以静电吸附的方式将有效成分mRNA进行包裹，保护其不被降解。2、在给药后LNP应避免被吞噬细胞清除。PEG分子的修饰可有效避免LNP被肾脏､巨噬细胞清除｡3、LNP递送系统必须能够到达目标细胞并且被细胞摄入。胆固醇的加入增强LNP膜的稳定性与融合性,促进mRNA胞内摄入和胞质进入｡ 4、在被摄入细胞后,载运的mRNA需要能够被释放出内体进入细胞质并翻译。mRNA的释放和蛋白表达过程，严重依赖于LNP颗粒大小和细胞类型。在制备样品时，可通过调节微流控设备的流速及流速比等参数有效控制颗粒直径，加速蛋白表达。mRNA治疗面临的挑战1、除肝脏以外器官的靶向能力成为mRNA药物研发市场较难越过的门槛。PEG分子易于修饰,可通过连接特定配体的方式使得LNP具有靶向性，但靶向配体的探索需耗费大量时间。2、多抗原mRNA疫苗的制备需要大量的LNPs,而LNPs具有佐剂特性，其安全性和耐受性有待长期验证。 3、外源mRNA产生强烈的免疫应答，抑制抗原的表达。需要通过LNP粒径调控或mRNA中碱基比例调控来降低免疫原性。结论：mRNA行业拥有巨大的科研与市场前景，其供应链平台，修饰、递送平台仍处于发展阶段。具有“先发优势”的企业少之又少，尽早布局有望弯道超车。纳米药物制备系统：应用范围：了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒mRNA-LNP的结构到底是怎样的？

论坛背景：2021国际疫情持续蔓延，面对新冠肺炎疫情这一全球公共卫生危机，需要采取积极卫生防疫措施，加强疫苗及药物研发，推动新型疫苗及技术发展，凝聚战胜疫情的团结力！会议对现有的新冠病毒预防与治疗还有哪些亟待解决的难题，小分子药的出现存在哪些机遇与挑战，新冠疫苗及药物审评政策将有哪些变化，新一代疫苗及药物又该如何立项等问题进行研讨。会议还围绕由疫情催生的“超新星”mRNA疫苗药物研制。深度探讨mRNA技术升级与创新，突破递送技术壁垒，聆听mRNA疫苗CMC工艺生产、质控、产业链建设等解决方案，旨在切实推进新型疫苗研发与产业化进程。大会结构：锘海展台：锘海提供纳米药物递送系统、生产与分析检测服务。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。纳米药物制备系统应用范围了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒科普——浅谈仪器参数对结果的影响核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒mRNA-LNP的结构到底是怎样的？

我国高端光学显微镜市场长期处于被国外产品垄断的局面，许多关键核心部件依赖进口。令人欣喜的是，近五年来，市场上涌现出多种国产光学显微镜，逐渐打破当前市场格局。基于此，仪器信息网特别制作“破局：国产高端光学显微镜技术‘多点开花’”专题，向国产光学显微镜企业广泛征稿。本篇为锘海生物科学仪器（上海）有限公司（以下简称“锘海”）供稿，锘海成立于2017年，2019年推出公司核心产品——锘海LS18平铺光片显微镜。来源：仪器信息网（点击文章尾部“阅读原文”查看原文）问题1: 请回顾一下贵公司关于光学显微镜技术的发展历程。答：随着医疗卫生和生命科学领域的快速发展，光学显微镜市场规模持续增长，对显微成像技术不断产生新的需求。由于传统光学显微镜空间分辨率、放大倍数和成像视野的性能水平逐渐无法满足生物组织结构分析的需求，光学显微镜的市场需求正快速增加。2019年，正式推出锘海LS18平铺光片显微镜。这款设备的技术创新主要体现在平铺光片技术，它解决了传统光学显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，能够满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求。同时，也是一款为离体透明化大组织样品以及活体模式生物长时程动态监测而设计的高分辨率3D显微成像仪器。可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现，亦可展示诸如斑马鱼等活体生物的发育进程，可广泛应用于脑科学、发育生物学、肿瘤学、药物研发和筛选、干细胞研究、组织胚胎学、植物生理学等各个领域。2020年，公司凭借平铺光片技术专利和各项发明软著，获得国家高新技术企业资质。作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，锘海将致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系，为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单高效。 锘海LS18光学显微技术的发展主要包括两个阶段。第一阶段，动态虚拟光片技术的研发。不同于由柱透镜产生的静态实体光片，该技术是先由照明物镜产生光束，再通过扫描的方式形成光片，因此光束形态以及扫描方式的多样性直接为产生不同形态的光片提供了先决条件。第二阶段，平铺光片技术的研发。基于动态虚拟光片技术，可以在空间光调制器中导入不同的相位图，产生不同长度、宽度及不同聚焦位置（相位）的光束，由这些光束形成的光片对样品进行单个视野内的分段成像，再将所有图像组合，从而构造整个视野内的图像，即为平铺光片技术。用户可根据不同研究需求，灵活运用该技术。只需将光片物理形态的调整转变为在计算机上输入参数的简易可视化过程，使得光片在三维成像时实现多通道自动校准以及针对不同折射率进行实时优化等功能。问题2: 当前贵公司主推的产品和技术有哪些。贵公司在光学显微镜方面有哪些特别优势？答：锘海LS18平铺光片照明显微镜采用了动态虚拟平铺光片技术，克服传统光片显微镜3D空间分辨率、Z轴层析能力和成像视野之间的矛盾，摒弃原有选择性平面照明显微镜中的单光片照明的方式，利用多个纤薄的光片分段照明，能在不损失成像视野的情况下，获得高分辨率的3D图像。锘海LS18平铺光片显微镜与其他光学显微镜品牌相比，锘海LS18平铺光片照明显微镜具有以下优势：1）和传统的光片显微镜相比，相同的成像时间里，采用平铺光片显微镜成像样本可提高空间分辨率以及成像效率。2）通过变换不同NA的检测物镜，放大倍数，以及调整激发光片，平铺光片显微镜可以实现对厘米级的组织样本从微米级到亚微米级空间分辨率的成像，且结合组织膨胀技术可以进一步提高成像分辨率。3）通过空间光调制器对激发光片进行相位调制，用于创建和优化样品照明的平铺光片。4）具有独特的半自动校准功能，保证了成像的准确性、可靠性和易用性；5）与所有的组织透明化方法兼容，适用于不同形状，不同机械强度的组织成像；6）不同的透明化组织样本可以在几分钟内快速更换成像；7）可以对透明化组织进行多分辨率级别、各向同性、多色三维成像。锘海LS18-平铺光片显微镜在6次平铺后卓越的Z轴分辨率实现微米级及亚微米级空间分辨率的3D组织成像具有近乎各向同性的微米级空间分辨率的3D组织成像能力可以辅助了解整脑不同脑区的血管网络分布。3小时内获取小鼠脑血管网络几乎识别到所有毛细血管。再提取大脑皮层中穿透性的血管，通过毛细血管与位于胼胝体区域的海马内小静脉或小动脉相连接。不同透明化方法的小鼠器官在微米级空间分辨率下的三维成像为观察亚细胞组织结构，将平铺光片显微镜的检测物镜提升至1.0NA，照明物镜提升至0.28NA，产生1um薄光片对样本进行成像。成像结果呈现出高倍显微镜具有很好的亚细胞神经元结构的分辨能力，可观察到兴奋性锥体神经元、神经元轴突上清晰可辨的树突棘和单个神经元的形态。亚微米级空间分辨率的3D组织成像组织膨胀技术实现亚微米级空间分辨率3D组织成像组织膨胀技术提供一种比显微镜更高的空间分辨率来分辨组织结构的解决方案。采用平铺光片显微镜与组织膨胀技术相结合的成像方式，用0.8NA的检测物镜以及更薄的激发光片展示更精细的神经结构。研究结果表明，大脑神经网络极其复杂，纳米尺度空间分辨率的3D成像对完全解析大脑神经网络非常必要。100nm以下空间分辨率的3D组织成像实现多分辨率尺度的三维组织成像平铺光片显微镜的优势是可以为其他生物组织的研究提供帮助。整体成像结果展示干细胞在真涡虫内的整体分布，而局部高空间分辨率成像结果展示真涡虫内干细胞组织以及细胞与细胞之间的相互作用关系。因此，平铺光片显微镜有助于研究真涡虫干细胞的分布和功能。类似的优点同样适用于其他生物研究，例如秀丽隐杆线虫，黑腹果蝇，斑马鱼等。100nm以下空间分辨率的3D组织成像注：以上图片和素材引用自西湖大学高亮博士发表在Cell Reports-A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues文中内容。 锘海LS18平铺光片显微镜，具有优异的多色3D成像能力，能够以微米级至100nm以下的空间分辨率对厘米级的透明化样本组织进行快速3D成像。仪器兼容所有的组织透明化方法，灵活适应不同的应用。同时还拥有独特的半自动校准能力，操作简单可靠。因此，平铺光片显微镜使得3D透明化组织成像在生物医学研究中更加可靠及可行。问题3: 请介绍一下贵公司主推的光学显微镜技术当前的市场现状如何（是否出现主流品牌）？整体技术发展趋势如何？答：根据恒州博智--《2020-2026全球及中国光片显微镜行业研究及十四五规划分析报告》，锘海是单独被列入专业市场调研报告的国内企业。从市场竞争来看，几家进口品牌虽然也有相关光片显微镜业务，但是主要还是以小样品成像为主，大样品成像研究鲜有，因此尚未形成主流品牌。相比进口品牌，锘海作为年轻国产品牌，具有重点业务资本聚焦及研发投入灵活、本地市场需求熟悉等先天优势。另外，针对透明化样品高分辨率三维成像的锘海LS18平铺光片照明显微镜已完成科研市场中仪器、试剂、工具的研发和技术外包服务系统的建立，服务多家医院、科研单位，并获得了成功的市场反馈。从整体技术发展趋势上看，伴随着以日本、中国、印度等为代表亚太地区的医疗、科研、生命科学等领域的快速发展，对光学显微镜的需求将会保持较快的增速发展。随着近年来全球AI技术的不断发展，人工智能的跨越式发展也为光学显微镜降低劳动强度、提高数据采集效率提供了新思路，相信未来光学显微镜将会与人工智能技术更紧密地结合。客户使用锘海LS18平铺光片显微镜-现场装机培训问题4: 贵公司光学显微镜在生命科学研究中有哪些应用？答：锘海 LS18平铺光片照明显微镜可以广泛应用脑科学、发育生物学、肿瘤学、药物研发和筛选、干细胞研究、组织胚胎学、植物生理学等各个领域，致力于探索大脑，内脏，腺体，肿瘤，骨骼等多种完整器官的高分辨率、高信噪比的多色荧光3D定位细胞微结构。如视频所示。 另外，2021年2月26日国际学术期刊Science在线发表了中国科学院分子细胞科学创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）研究组的研究成果：“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。研究组建立了一种检测细胞增殖的新技术--ProTracer（Proliferation Tracer），并通过锘海LS18平铺光片照明显微镜对经过透明化的肝脏样本进行观察，揭示成体肝细胞来源，为肝脏再生及疾病临床治疗研究提供了新思路。LS18 light-sheet microscopic image showing donut-like tdTomato signals in liver该文中的肝脏样本采用了SHIELD方法进行组织透明化，并使用锘海LS18光片显微镜对样品进行3D成像。由此可见平铺光片显微技术与生物组织透明化的结合，能实现可视化状态下对生物组织的三维结构的完整观察，具有非常高的科研和医学价值。问题5: 从整个行业的角度，对于目前的光学显微技术，您比较看好哪些？还有哪些问题亟待解决？答：光学显微镜从诞生至今已有400多年的历史，商品产业化已有近200年的历史。随着人民生活水平的提高、生命科学研究及精密检测的需求，光学显微镜市场（实验室级及研究用级显微镜）需求仍以较大幅度增长。历史上曾先后产生4次与显微镜相关的诺贝尔奖，最近一次是“超分辨荧光显微镜”获得2014年度诺贝尔奖。目前，全球光学显微镜产业主要分布在德国和日本，国内高端光学显微镜市场长期处于被国外产品垄断的局面。对中国企业而言，如果能够制造出高性能、高可靠性的光学显微镜，无疑会面临较大的市场机遇。但我国在高端显微镜的研制过程中，仍然面临从设计、加工到装配和检测等多方面，没有现成标准经验可循的困难，另外进口光学器件的价格也十分高昂，对专业人才在核心技术的掌握能力方面要求较高。要想改善我国高端光学显微镜基本依赖进口的状况，实现高质量的国产替代，就得突破国产化仪器“用得少，反馈少”的瓶颈。问题6: 从整个行业的角度，您如何评价目前光学显微镜的应用情况？应用过程中还有哪些亟待解决的问题？未来光学显微镜应用将会如何发展？（请结合具体光学显微镜类型回答）答：光学显微镜的科研价值在于帮助国内生命科学研究工作者保持和前沿科学技术发展的紧密接触。因为对生物组织进行高分辨率三维荧光成像，获取生物组织高分辨率三维结构信息，是在亚细胞、细胞、和组织尺度上研究生物基因表达、细胞形态和细胞分布等信息的重要手段，具有重要科研和临床应用意义。在科研方面，可用于生物基础科学研究、疾病研究和神经科学研究的透明化生物组织三维成像系统；在医疗方面，可用于临床疾病诊断的完整技术方案、设备和服务；在医药方面，可用于药物临床前安全性评价（DSA）的具有更强针对性、更高通量和完全自动化的应用于模式动物的相关试剂、设备、和服务。但由于生物组织的不均匀性，如各层组织中含有的水、脂质和蛋白质等各种分子造成光散射，以及细胞中的各类色素成分造成的光吸收，不仅限制了成像深度而且大大降低了图像对比度，想要对组织进行三维成像仍是个很大的挑战。因此组织透明化技术是开启当今光学切片显微镜全部潜能的关键！锘海自主研发透明化试剂盒是基于各种透明化方法测试和比较后，以及依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，经过精心优化的配方，可以穿透细胞而不损伤自身及蛋白质结构，有效地进行脱色脱脂，采用亲水性温和环境的设计，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能，轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。问题7：您如何看待国产光学显微镜生产商和进口品牌厂商的差距？答：近几年，国产光学显微镜行业发展迅速，每年显微镜产量超过300万，超过50%用于出口，在世界显微镜市场中已经占有一席之地。因受行业技术水平和产业化水平的限制，我国对外出口的显微镜产品基本集中在中低端，利润远不及高端的光学显微产品；而国内高端光学显微镜近90%都依赖于进口。但若对进口仪器依赖过强，一是有风险，科研技术和进展会受制于人；二是仪器用户要花费大量资金购入进口高价产品，相对而言财务压力较大。对中国企业而言，如果能够制造出高性能、高可靠性的光学显微镜，必定会迎来较大的市场机遇。作为国内光片显微仪器制造商，锘海时刻谨记需用心钻研仪器的性能与提升服务质量来赢得用户的信任。加上开发新市场和摸索用户需求，开拓、采用新型的商业模式共同发力。才有可能在进口品牌竞争中生存并占据上风。此外，国产品牌公司和中国市场的用户接触更密切，互动更有效，在国产公司能够获得足够支持的前提下，紧抓高质量产品和服务，长此以往才能缩短与进口品牌厂商的差距，逐步提高与国际品牌的竞争力。问题8: 您认为，未来几年光学显微镜的热点市场需求有哪些？答：未来几年的热点市场需求将会集中于生物基础科学、疾病和神经科学等研究的高速、高分辨、高通量的光学显微镜。除了仪器本身以外，配套的自动化处理工具、成像、数据管理和分析的全套相关产品及订制服务，在科研市场也有着较大需求。而锘海除了在平铺光片高分辨显微成像上有专利技术和配套新研发的组织透明化试剂盒，还具有从组织前期透明化处理到数据分析一站式科研服务，旨在简化、解决科研流程问题，实现闭环式科研服务。了解更多锘海LS18平铺光片显微镜相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

在前几期的内容当中，我们分别介绍了实验前后相对重要的背景知识。本期终于轮到了整个实验中最为重要的步骤——合成。合成会涉及到相应的仪器，即纳米药物制备系统。该系统操作简单、制备快速，深受广大用户的喜爱。同时，也得益于相对较少的参数，使得客户能够在培训短短几个小时后，就可以上手进行熟练操作。下面将对较为重要的参数如流速比、总流速等对结果的影响进行介绍。需要注意的是结论以以往实验结果作为依据，不一定具有普遍性，在实际实验中仍可能得到与结论不同的结果。流速比：通常水相比例越高，粒径越小 合成纳米粒子的原料通常根据溶剂的种类分为有机相和水相。通常而言，水相比例越高，意味着同时流经的有机相更少，因而能够形成纳米粒子的“原料”——脂质——的数量就越少，因而围成球状后的体积也相应更小。但在不断增加水相比例后，有机相含量变化变得不那么剧烈，因而对粒径的影响也逐渐减弱。图1：常规脂质体（liposome）在使用纳米药物制备系统时，通过调整流速比得到的不同粒径结果[1]。总流速：通常流速越高，粒径越小，但不可无限制缩小相对于总流速，上文提到的流速比的影响相对明显且直接，在摸索条件的过程中会被定下来。之后如果想要调整粒径，可部分依靠总流速的调节。在纳米药物制备系统的芯片中，用于合成反应的流道长度是固定的，越高的流速意味着更为短暂的反应时间，两相形成层流进行成分交换、反应的时间也更为短暂，可以理解为用于包裹的脂质数量更少，导致粒径更小。之所以称为“部分依靠”，是因为再少的脂质，都有自组装的趋势，最终都需要形成稳定的球状结构，形成稳态，因而对于固定的配方，在流速较小的时候提升流速，粒径变化相对明显，而流速越快，则粒径变化越不明显。图2：常规脂质体（liposome）在使用纳米药物制备系统时，通过调整总流速得到的不同粒径结果[1]。前后废液：过多则浪费原料，过少则影响粒径，需不断摸索 前后废液的形成，是因为纳米药物制备系统在运行初期，会有一段加速过程；运行终止前则又有一段减速过程。在速度变化期间，液体的流动速度不稳定，导致粒径持续变化，影响最终结果。为了保证最终成品的粒径均一，就需要剔除这两段液体。更大的废液体积固然能够保证粒径均一，却也使得原料浪费的比例更大。因而对于一个首次合成的配方，我们建议根据仪器说明书来设置。在说明书建议体积下合成后对废液也进行粒径测定，如粒径也相对均一，则可以在下次实验中酌情减少废液，提升成品比例。图3：纳米药物制备系统中的废液设置参考资料：[1] Andrew B., Anitha T., Mina O., et al.[R]Liposomes size tuning with formulation parameters, 2017纳米药物制备系统应用范围了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒科普——超滤管规格核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒mRNA-LNP的结构到底是怎样的？

光学显微镜至今已有三百多年的历史，从观察细胞的初代显微镜发展到如今打破分辨率极限的超分辨显微镜。近年来，生命科学领域蓬勃发展，对显微成像技术不断产生新的需求，光学显微镜不断向更高分辨率、快速成像、3D成像等高端技术方向发展。  我国高端光学显微镜市场长期处于被国外产品垄断的局面，许多关键核心部件依赖进口。令人欣喜的是，近五年来，市场上涌现出多种国产高端光学显微镜，包括超分辨显微镜、双光子显微镜、共聚焦显微镜、光片显微镜等，逐渐打破当前市场格局。基于此，仪器信息网特别制作“破局：国产高端光学显微镜技术‘多点开花’”专题，并向国产光学显微镜企业广泛征稿（投稿邮箱：lizk@instrument.com.cn），了解各企业主要高端光学显微镜产品技术特点和发展进程。本篇为锘海生物科学仪器（上海）有限公司（以下简称“锘海”）供稿，锘海成立于2017年，2019年推出公司核心产品——锘海LS18平铺光片显微镜。仪器信息网: 请回顾一下贵公司关于光学显微镜技术的发展历程。随着医疗卫生和生命科学领域的快速发展，全球光学显微镜市场规模持续增长，对显微成像技术不断产生新的需求。由于传统光学显微镜空间分辨率、放大倍数和成像视野的性能水平逐渐无法满足生物组织结构分析的需求，全球高端光学显微镜的市场需求正快速增加。2019年3月，我司正式推出锘海LS18平铺光片显微镜。这款设备的技术创新主要体现在平铺光片技术，它解决了传统光学显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，能够满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求。同时，也是一款为离体透明化大组织样品以及活体模式生物长时程动态监测而设计的高分辨率3D显微成像仪器。可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现，亦可展示诸如斑马鱼等活体生物的发育进程，可广泛应用于脑科学、发育生物学、肿瘤学、药物研发和筛选、干细胞研究、组织胚胎学、植物生理学等各个领域。2020年，公司凭借平铺光片技术专利和各项发明软著，获得国家高新技术企业资质。锘海LS18光学显微技术的发展主要包括两个阶段。第一阶段，动态虚拟光片技术的研发。不同于由柱透镜产生的静态实体光片，该技术是先由照明物镜产生光束，再通过扫描的方式形成光片，因此光束形态以及扫描方式的多样性直接为产生不同形态的光片提供了先决条件。第二阶段，平铺光片技术的研发。基于动态虚拟光片技术，可以在空间光调制器中导入不同的相位图，产生不同长度、宽度及不同聚焦位置（相位）的光束，由这些光束形成的光片对样品进行单个视野内的分段成像，再将所有图像组合，从而构造整个视野内的图像，即为平铺光片技术。用户可根据不同研究需求，灵活运用该技术。只需将光片物理形态的调整转变为在计算机上输入参数的简易可视化过程，使得光片在三维成像时实现多通道自动校准以及针对不同折射率进行实时优化等功能。仪器信息网: 当前贵公司主推的产品和技术有哪些。贵公司在高端光学显微镜方面有哪些独具优势的技术？锘海LS18平铺光片照明显微镜采用了动态虚拟平铺光片技术，克服传统光片显微镜3D空间分辨率、Z轴层析能力和成像视野之间的矛盾，摒弃原有选择性平面照明显微镜中的单光片照明的方式，利用多个纤薄的光片分段照明，能在不损失成像视野的情况下，获得高分辨率的3D图像。锘海LS18平铺光片显微镜与其他高端光学显微镜品牌相比，锘海LS18平铺光片照明显微镜具有以下优势：1）和传统的光片显微镜相比，相同的成像时间里，采用平铺光片显微镜成像样本可提高空间分辨率以及成像效率。2）通过变换不同NA的检测物镜，放大倍数，以及调整激发光片，平铺光片显微镜可以实现对厘米级的组织样本从微米级到亚微米级空间分辨率的成像，且结合组织膨胀技术可以进一步提高成像分辨率。3）通过空间光调制器对激发光片进行相位调制，用于创建和优化样品照明的平铺光片。4）具有独特的半自动校准功能，保证了成像的准确性、可靠性和易用性；5）与所有的组织透明化方法兼容，适用于不同形状，不同机械强度的组织成像；6）不同的透明化组织样本可以在几分钟内快速更换成像；7）可以对透明化组织进行多分辨率级别、各向同性、多色三维成像。锘海LS18-平铺光片显微镜在6次平铺后卓越的Z轴分辨率实现微米级及亚微米级空间分辨率的3D组织成像具有近乎各向同性的微米级空间分辨率的3D组织成像能力可以辅助了解整脑不同脑区的血管网络分布。3小时内获取小鼠脑血管网络几乎识别到所有毛细血管。再提取大脑皮层中穿透性的血管，通过毛细血管与位于胼胝体区域的海马内小静脉或小动脉相连接。不同透明化方法的小鼠器官在微米级空间分辨率下的三维成像为观察亚细胞组织结构，将平铺光片显微镜的检测物镜提升至1.0NA，照明物镜提升至0.28NA，产生1um薄光片对样本进行成像。成像结果呈现出高倍显微镜具有很好的亚细胞神经元结构的分辨能力，可观察到兴奋性锥体神经元、神经元轴突上清晰可辨的树突棘和单个神经元的形态。亚微米级空间分辨率的3D组织成像组织膨胀技术实现亚微米级空间分辨率3D组织成像组织膨胀技术提供一种比显微镜更高的空间分辨率来分辨组织结构的解决方案。采用平铺光片显微镜与组织膨胀技术相结合的成像方式，用0.8NA的检测物镜以及更薄的激发光片展示更精细的神经结构。研究结果表明，大脑神经网络极其复杂，纳米尺度空间分辨率的3D成像对完全解析大脑神经网络非常必要。100nm以下空间分辨率的3D组织成像实现多分辨率尺度的三维组织成像平铺光片显微镜的优势是可以为其他生物组织的研究提供帮助。整体成像结果展示干细胞在真涡虫内的整体分布，而局部高空间分辨率成像结果展示真涡虫内干细胞组织以及细胞与细胞之间的相互作用关系。因此，平铺光片显微镜有助于研究真涡虫干细胞的分布和功能。类似的优点同样适用于其他生物研究，例如秀丽隐杆线虫，黑腹果蝇，斑马鱼等。100nm以下空间分辨率的3D组织成像注：以上图片和素材引用自西湖大学高亮博士发表在Cell Reports-A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues文中内容。锘海LS18平铺光片显微镜，具有卓越的精准多色3D成像能力，能够以微米级至100nm以下的空间分辨率对厘米级的透明化样本组织进行快速3D成像。仪器兼容所有的组织透明化方法，灵活适应不同的应用。同时还拥有独特的半自动校准能力，操作简单可靠。因此，平铺光片显微镜使得3D透明化组织成像在生物医学研究中更加可靠及可行。仪器信息网: 请介绍一下贵公司主推的光学显微镜技术当前的市场现状如何？整体技术发展趋势如何？根据恒州博智--《2020-2026全球及中国光片显微镜行业研究及十四五规划分析报告》，锘海是唯一被列入专业市场调研报告的国内企业。从市场竞争来看，几家进口品牌虽然也有相关光片显微镜业务，但是主要还是以小样品成像为主，大样品成像研究鲜有，因此尚未形成主流品牌。相比进口品牌，锘海作为年轻国产品牌，具有重点业务资本聚焦及研发投入灵活、本地市场需求熟悉等先天优势。另外，针对透明化样品高分辨率三维成像的锘海LS18平铺光片照明显微镜已完成科研市场中仪器、试剂、工具的研发和技术外包服务系统的建立，服务多家医院、科研单位，并获得了成功的市场反馈。从整体技术发展趋势上看，伴随着以日本、中国、印度等为代表亚太地区的医疗、科研、生命科学等领域的快速发展，对光学显微镜的需求将会保持较快的增速发展。随着近年来全球AI技术的不断发展，人工智能的跨越式发展也为光学显微镜降低劳动强度、提高数据采集效率提供了新思路，相信未来光学显微镜将会与人工智能技术更紧密地结合。客户使用锘海LS18平铺光片显微镜-现场装机培训仪器信息网: 贵公司高端光学显微镜在生命科学研究中有哪些应用？锘海 LS18平铺光片照明显微镜可以广泛应用脑科学、发育生物学、肿瘤学、药物研发和筛选、干细胞研究、组织胚胎学、植物生理学等各个领域，致力于探索大脑，内脏，腺体，肿瘤，骨骼等多种完整器官的高分辨率、高信噪比的多色荧光3D精准细胞微结构。如视频所示。另外，2021年2月26日国际学术期刊Science在线发表了中国科学院分子细胞科学创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）研究组的研究成果：“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。研究组建立了一种检测细胞增殖的新技术--ProTracer（Proliferation Tracer），并通过锘海LS18平铺光片照明显微镜对经过透明化的肝脏样本进行观察，揭示成体肝细胞来源，为肝脏再生及疾病临床治疗研究提供了新思路。LS18 light-sheet microscopic image showing donut-like tdTomato signals in liver该文中的肝脏样本采用了SHIELD方法进行组织透明化，并使用锘海LS18光片显微镜对样品进行3D成像。由此可见平铺光片显微技术与生物组织透明化的结合，能实现可视化状态下对生物组织的三维结构的完整观察，具有非常高的科研和医学价值。仪器信息网: 从整个行业的角度，对于目前的高端光学显微技术，您比较看好哪些？还有哪些问题亟待解决？光学显微镜从诞生至今已有400多年的历史，商品产业化已有近200年的历史。随着人民生活水平的提高、生命科学研究及精密检测的需求，高端光学显微镜市场（实验室级及研究用级显微镜）需求仍以较大幅度增长。历史上曾先后产生4次与显微镜相关的诺贝尔奖，最近一次是“超分辨荧光显微镜”获得2014年度诺贝尔奖。目前，全球高端光学显微镜产业主要分布在德国和日本，国内高端光学显微镜市场长期处于被国外产品垄断的局面。对中国企业而言，如果能够制造出高性能、高可靠性的高端光学显微镜，无疑会面临极大的市场机遇。但我国在高端显微镜的研制过程中，仍然面临从设计、加工到装配和检测等多方面，没有现成标准经验可循的困难，另外进口光学器件的价格也十分高昂，对专业人才在核心技术的掌握能力方面要求较高。要想改善我国高端光学显微镜基本依赖进口的状况，实现高质量的国产替代，就得突破国产化仪器“用得少，反馈少”的瓶颈。仪器信息网: 从整个行业的角度，您如何评价目前高端光学显微镜的应用情况？应用过程中还有哪些亟待解决的问题？高端光学显微镜的科研价值在于帮助国内生命科学研究工作者保持和最前沿科学技术发展的紧密接触。因为对生物组织进行高分辨率三维荧光成像，获取生物组织高分辨率三维结构信息，是在亚细胞、细胞、和组织尺度上研究生物基因表达、细胞形态和细胞分布等信息的重要手段，具有重要科研和临床应用意义。在科研方面，可用于生物基础科学研究、疾病研究和神经科学研究的透明化生物组织三维成像系统；在医疗方面，可用于临床疾病诊断的完整技术方案、设备和服务；在医药方面，可用于药物临床前安全性评价（DSA）的具有更强针对性、更高通量和完全自动化的应用于模式动物的相关试剂、设备、和服务。但由于生物组织的不均匀性，如各层组织中含有的水、脂质和蛋白质等各种分子造成光散射，以及细胞中的各类色素成分造成的光吸收，不仅限制了成像深度而且大大降低了图像对比度，想要对组织进行三维成像仍是个很大的挑战。因此组织透明化技术是开启当今光学切片显微镜全部潜能的关键。为此，锘海自主研发了透明化试剂盒，该试剂盒基于各种透明化方法测试和比较，以及依托测样服务中积累到的经验，经过配方优化，可以穿透细胞而不损伤自身及蛋白质结构进行脱色脱脂，采用亲水性温和环境的设计，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能，实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化。仪器信息网: 您如何看待国产光学显微镜生产商和进口品牌厂商的差距？答：近几年，国产光学显微镜行业发展迅速，每年显微镜产量超过300万，超过50%用于出口，在世界显微镜市场中已经占有一席之地。因受行业技术水平和产业化水平的限制，我国对外出口的显微镜产品基本集中在中低端，利润远不及高端的光学显微产品；而国内高端光学显微镜近90%都依赖于进口。但若对进口仪器依赖过强，一是有风险，科研技术和进展会受制于人；二是仪器用户要花费大量资金购入进口高价产品，相对而言财务压力较大。作为国内光片显微仪器制造商，锘海时刻谨记需用心钻研仪器的性能与提升服务质量来赢得用户的信任，加上开发新市场和摸索用户需求，开拓、采用新型的商业模式共同发力，才有可能在进口品牌竞争中生存并占据上风。此外，国产品牌公司和中国市场的用户接触更密切，互动更有效，在国产公司能够获得足够支持的前提下，紧抓高质量产品和服务，长此以往才能缩短与进口品牌厂商的差距，逐步提高与国际品牌的竞争力。仪器信息网:您认为，未来几年高端光学显微镜的热点市场需求有哪些？答：未来几年的热点市场需求将会集中于生物基础科学、疾病和神经科学等研究的高速、高分辨、高通量的光学显微镜。除了仪器本身以外，配套的自动化处理工具、成像、数据管理和分析的全套相关产品及订制服务，在科研市场也有着巨大的需求。而锘海除了在平铺光片高分辨显微成像上有专利技术和配套新研发的组织透明化试剂盒，还具有从组织前期透明化处理到数据分析一站式科研服务，旨在简化、解决科研流程问题，实现闭环式科研服务。

前文《锘海LS18平铺光片显微镜高分辨率血管成像重磅来袭！》说到，锘海LS18光片显微镜既可以对透明化小鼠脑样本的血管组织进行快速3D成像，又可以进行亚微米级的高分辨成像。锘海LS18平铺光片显微镜如今，我们也成功实现了对小鼠脑样本神经信号的亚微米级高分辨成像。下面就跟着小编一起来开启小鼠脑神经信号高分辨成像的神奇之旅！小鼠脑样本的神经信号局部高分辨率成像图1 整脑神经信号成像首先，我们的LS18光片显微镜对整脑神经信号进行整体3D快速扫描成像，如图1所示，完全可以实现对整脑神经信号全方位采集及完整3D重构。其次，我们可以选取感兴趣的目标区域进行高分辨率的成像。目标区域如图2所示。图2 目标区域整体三维视图那么，接下来我们分别从不同的层切厚度来观察神经信号成像结果。1、 100um光学层切及局部放大图3  100um层切及局部放大2、200um层切及局部放大图4  200um层切及局部放大3、 500um光学层切图5   500um层切及局部放大综上所述， LS18光片显微镜操作简便快捷，不仅可以灵活应用于不同分辨率的成像，而且能够根据科研工作者的不同应用需求，来实现微米到亚微米级空间分辨率对大样本组织进行快速成像。此外，锘海生命科学亦建立起一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多锘海LS18平铺光片显微镜相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

近日，上海推进科技创新中心建设办公室对2021年张江专项资金拟支持项目公示完成。锘海生命科学凭借在平铺光片显微镜专利技术和组织透明化领域丰富经验和业内良好的口碑，经过严格的申报、审核、评选，从多家参选公司中脱颖而出，成功获得“高增长资助”专项资金支持。据悉，上海张江国家自主创新示范区专项发展资金由上海市政府和各分园所在区政府共同设立，主要用于支持高新区在建设国家自主创新示范区过程中的科技创新综合环境建设、战略性新兴产业及其创新集群培育以及激发企业创新活力的举措，是上海支持自主创新的重要措施之一。此次专项资金的获得，标志着锘海生命科学在平铺光片显微镜和组织透明化领域的成熟技术获得业内专家的认可，得到各级政府部门的支持，也证明锘海生命科学是一家具有研发与创新实力并存的高新技术企业。锘海LS18-平铺光片显微镜关于锘海锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质。总部位于上海漕河泾开发区松江园区内，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。公司提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。锘海组织透明化试剂盒锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。 了解更多锘海LS18平铺光片显微镜相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）