分子生物学方法

目前所有公认的细胞因子的基因均已克隆化，故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样，常使用斑点杂交、Northern blot、逆转录PCR，细胞或组织原位杂交等。实验的关键在于制备高质量的核酸探针和获得合格的待测物（提取的mRNA样品或细胞/组织标本）。核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物（如生物素、地高辛等）标记并与ELISA试剂盒目的基因互补的DNA单链DNA、RNA。根据其来源可分为cDNA探针、寡核核苷酸探针、基因组基因探针及DNA探针等。其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northern blot，而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化，近年来出现的RT-PCR检测特异性mRNA的方法也广泛用于细胞因子研究领域。该法具有灵敏、快速等优点，甚至从1～10个细胞中就可检出其中的特异mRNA。

上述三种方法，各有优缺点，可互相弥补，在实际应用中，可根据各自的实验目的和实验室条件进行选择。生物学检测法比较敏感，又可直接测定生物学功能，是ELISA试剂盒最可靠的方法，适用于各种实验目的，是科研部门最常用的技术，但需要长期培养依赖性细胞株，检测耗时长，步骤繁杂，影响因素多，不容易熟练掌握。免疫学检测法比较简单，迅速，重复性好，但所测定的只代表相应细胞因子的量而不代表活性，同时敏感度也低于生物活性检测法（约低10～100倍）。分子生物学法只能检测基因表达情况，不能直接提供有关因子的浓度及活性等资料，主要用于机制探讨。在检测细胞因子时，必须考虑到细胞因子的作用具有网络性的特点，人们需明确检测方法所测定的细胞因子成分，并考虑其抑制剂和可溶性受体的水平，将各种结合使用，有可能得到较为可靠的结果。

DAT1 神经细胞特异性转录因子DAT1抗体

DOK3 对接蛋白3抗体

DCUN1D2 DCN1样蛋白2抗体

DNAJB6 热休克蛋白J2抗体

Dyrk1B 双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B抗体

DGKE 二酰基甘油激酶5抗体

DNA PKcs DNA依赖蛋白激酶催化亚基抗体

DUX4 双同源框蛋白4抗体

DAZ1 无精症缺失基因1抗体

Phospho-CHK2 (ser516) 磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体

Kv2.1 钾通道蛋白DRK1抗体

DRG1 GTP发育调控结合蛋白1抗体

DAL1 细胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗体

DRAK2 DAP凋亡诱导蛋白激酶2抗体

DAB2 信号转导功能磷蛋白DAB2抗体

DACH1 细胞命运决定因子DACH1抗体

DAB2IP Dab2相互作用蛋白抗体

DECR1 线粒体2,4-双烯酰辅酶A还原酶1抗体

DCTN3 动力蛋白激活蛋白亚基3抗体

DCTN6 动力蛋白激活蛋白6抗体

DIO2 脱碘酶2抗体