CohesionBio  CohesionBio的介绍：Cohesion Biosciences specializes in the production of novel antibodies, peptides, siRNA, ELISA kits, Assay kits and Biological reagents used in basic science research. Our vision is to prepare comprehensive, wide research tools and technology platforms to enable scientists to study complete biological pathways, thus enabling a better understanding of disease mechanisms including cancer and stem cell research.We produce all of our peptides, antibodies, siRNA in house, and perform painstaking validations for multiple applications. And the same Cohesion Biosciences scientists who produce our products also provide technical support for customers, helping them design experiments, troubleshoot, and achieve reliable results. We do this because that’s what we’d want if we were in the lab.Customer satisfaction is our highest priority. We are a company founded by scientists, with expert scientific staff dedicated to understanding your needs as a researcher. We are committed to developing only the highest quality products. Our rigorous validation process ensures the most credible and reproducible results with the least expenditure of your costly time, samples, and reagents.CohesionBio的产品类别：Primary AntibodySecondary AntibodyCatalog PeptideBlocking PeptideProteinELISA KitAssay KitGene qRT-PCR KitsiRNAshRNAReagentsCohesionBio的服务支持：Cohesion Biosciences offers custom peptide synthesis, custom polyclonal antibody, custom siRNA synthesis services to the scientific community. Providing the best possible service and highest quality peptides, antibodies, siRNA is a top priority at Cohesion Biosciences. Focus on your research and let the experts at Cohesion Biosciences produce the peptides, antibodies, siRNA that you need to run your assays. For many years, Cohesion Biosciences has specialized in the production of custom services for researchers around the world.CohesionBio Reagents产品报价单：Cat No.Product NameSourceReactivityApplicationsSize 1Price 1 (USD)CRG1001Bicinchoninic Acid Protein Assay KitProtein quantification500 Assays76CRG1002Bradford Protein Assay KitProtein quantification500 Assays30CRG1003Super Sensitive IHC Detection System Kit (Mouse/Rabbit)IH1 Kit176CRG1004AEC Chromogen KitIH1 Kit75CRG1005DAB Chromogen KitIH1 Kit75CRG1006Super Sensitive FITC IF Detection System Kit (Goat Anti-Mouse)IF1 Kit76CRG1007Super Sensitive FITC IF Detection System Kit (Goat Anti-Rabbit)IF1 Kit76CRG1008Super Sensitive FITC IF Detection System Kit (Mouse Anti-Goat)IF1 Kit76CRG1009Super Sensitive FITC IF Detection System Kit (Rabbit Anti-Sheep)IF1 Kit76CRG1010Super Sensitive TRITC IF Detection System Kit (Goat Anti-Mouse)IF1 Kit76CRG1011Super Sensitive TRITC IF Detection System Kit (Goat Anti-Rabbit)IF1 Kit76CRG1012Super Sensitive TRITC IF Detection System Kit (Mouse Anti-Goat)IF1 Kit76CRG1013Super Sensitive TRITC IF Detection System Kit (Rabbit Anti-Sheep)IF1 Kit76CRG1014DAPI Staining KitIF1 Kit30CRG1015Hoechst 33342 Staining KitIF1 Kit30CRG1016PI Staining KitIF1 Kit30CRG1017Hoechst 33342/PI Double Staining KitIF1 Kit45CRG1018Protein A Agarose IP ReagentIP2 ml76CRG1019Protein G Agarose IP ReagentIP2 ml76CRG1020Protein A&G Agarose IP ReagentIP2 ml76

Haematologic Technologies  Haematologic Technologies代理公司介绍：haemtech域名名字里 单词拆分 haem（血红素）tech（科技），Haematologic （血液学），也就说这家公司的产品都是人体血液相关蛋白以及抗体Haematologic Technologies公司是一家专门致力于高质量的人血浆蛋白的分离和特性研究、生产及高通量优质抗体的行业领导者，公司产品主要用于体外研究。该公司核心产品包括凝血级联反应以及骨代谢调控相关蛋白，全部产品线包括150多种高纯度、高性能的蛋白产品，具体有酶原、酶、协同因子、底物和抑制剂、样品收集管及抗凝管等。除高纯蛋白产品外，Haematologic Technologies是世界上蕞大的单克隆抗体和蛋白生产商之一，通过利用染色体组/蛋白质组的方法开发抗体，公司可提供上万种单/多克隆抗体，力求针对每一个人类表达基因开发至少一种抗体产品。此外，公司还提供部分技术服务，如：蛋白定制、纯化、修饰检测、定制生产与科研合作等。公司使命：为全球凝血研究领域提供高品质的高纯高活性蛋白及相关试剂，同时持续改进我们的蛋白生产和质控标准，以及通过挖掘内部潜力及与血栓/止血研究领域的顶级研究机构和企业进行战略合作以确保公司前沿领军地位。公司核心竞争力：Haematologic Technologies通过以下三方面优势从众多竞争者中脱颖而出：优质的技术服务、智力资源、定制生产与研究。优质的技术服务部是公司的蕞大优势，可为使用本公司产品的客户提供无与伦比的服务，为客户提供完善的实验设计、实验方法及常见问题等方面的详尽建议，使使用产品的科学家无形中参与公司产品的生产和研发。公司主要产品系列：一、人血浆产品系列：该产品系列包括凝血因子及抑制剂、血小板和骨代谢调控相关蛋白质。1、酶原：包括：Factor VII、Factor IX、Factor X、Factor X (修饰)、Factor XI、Factor XII、Factor XIII、glu-Plasminogen、lys-Plasminogen、Protein C、Prothrombin。2、酶类：包括：、Activated Protein C*、Thrombin (alpha)*、Thrombin (beta, gamma)、Factor VIIa、Factor IXa*、Factor Xa* (gla-domainless available)、Factor XIa、Factor XIIIa、Plasmin、(*可提供封闭活性位点产品)。3、辅酶因子：包括：Factor V、Factor Va、Fibronectin、Protein S、von Willebrand Factor（vWF）、von Willebrand Factor (无VIII 因子)、Thrombomodulin (兔)、Protein Z。4、蛋白酶抑制剂：包括：Antithrombin III、Heparin Cofactor II、TAFI、Angiostatin、Alpha-2-Plasmin Inhibitor。5、蛇毒蛋白酶：包括：RVV-X Activator、RVV-V Activator、E. Carinatus II Protease6、人血小板和其它血浆蛋白产品：包括：Fibrinogen & Fragments、Beta-2-Glycoprotein-1、Human Platelet Osteonectin、Platelet Factor 4、Beta-Thromboglobulin、Thrombospondin、Vitronectin、Recombinant Tissue Factor7、骨相关蛋白酶：Osteocalcin二、牛血浆产品系列：该产品系列包括凝血因子及抑制剂、血小板和骨代谢调控相关蛋白质。1、酶原：包括：Bovine Factor IX、Bovine Factor X、Bovine Plasminogen、Bovine Protein C、Bovine Prothrombin。2、酶类：包括：Bovine Activated Protein C、Bovine Thrombin、Bovine Factor IXa、Bovine Factor Xa，均可提供封闭活性位点产品。3、辅酶因子：包括：Bovine Factor V、Bovine Factor Va。4、骨代谢相关蛋白：Osteocalcin。5、蛇毒蛋白酶：包括RVV-X Activator、RVV-V Activator及E. Carinatus II Protease。6、新产品：Bovine Lactadherin三、小鼠血浆产品系列：1、酶原：包括：Mouse Factor X、Mouse Plasminogen、Mouse Prothrombin、Mouse Prothrombin Frag-1 (please call)、Mouse Prethrombin-2 (please call)。2、酶类：包括：Mouse Thrombin、Mouse Factor Xa、Mouse Plasmin。3、部分血液蛋白相关抗体：（1）单克隆抗体：包括：Rat anti-Mouse Protein C、Rat anti-Mouse Prothrombin Rat anti-Mouse Plasminogen、Rat anti-Mouse Factor X、Rat anti-Mouse Factor VIII。（2）多克隆抗体：包括：Sheep anti-Mouse Factor X、Sheep anti-Mouse Factor X - Immuno Adsorbed、Sheep anti-Mouse Prothrombin、Sheep anti-Mouse Plasminogen、Sheep anti-Mouse Protein C、Sheep anti-Mouse ATIII、Sheep anti-Mouse Fibrinogen、Sheep anti-Rat Factor IX。4、其它产品：Mouse Antithrombin III、Mouse Fibrinogen、Rat Factor IX (please call)、Rat Factor IXa (please call)、Rat Factor X (please call)、Rat Thrombin (please call)、Rat Prethrombin-2 (please call)、Rat Fibrinogen (please call)、Rabbit Thrombomodulin。四、抑制剂产品系列：1、氯基甲酮产品：包括：FPR-chloromethylketone (PPACK)、EGR-chloromethylketone (GGACK)、Biotinylated EGR-chloromethylketone、Fluorescein EGR-chloromethylketone、Biotinylated FPR-chloromethylketone、Fluorescein FPR-chloromethylketone。  2、人蛋白酶抑制剂：Antithrombin III、Heparin Cofactor II、TAFI、Angiostatin、Alpha-2-Plasmin Inhibitor。3、其它产品：包括玉米胰蛋白酶抑制剂(CTI)和DAPA。Catalog NumberDescriptionUnit Quantity HCVII-0030 Human Factor VII20 μg1351 mg151020100HCIX-0040Human Factor IX100 μg1351 mg51050100500BCIX-1040Bovine Factor IX100 μg1351 mg51050100500MCIX-5040Mouse Factor IX50 μg135RATIX-9040Rat Factor IX50 μg135HCX-0050Human Factor X100 μg1351 mg51050100HCX-GDHuman Gla-domainless 100 μg1Factor X351 mg11050MCX-5050Mouse Factor X100 μg1351 mg510BCX-1050Bovine Factor X100 μg1351 mg51050100500RATX-9050Rat Factor X100 μg135HCXI-0150Human Factor XI  50 μg1351 mg352550250HCXII-0155Human Factor XII100 μg1351 mg51050100500HCXIII-0160Human Factor XIII100 μg1351 mg51050100500HCPG-0130Human glu-Plasminogen  1 mg135501005001,000HCPG-0131Human glu-Plasminogen  1 mg1(affinity form I)35501005001,000HCPG-0132Human glu-Plasminogen  1 mg1(affinity form II)35501005001,000HCPG-0133Human lys-Plasminogen  1 mg135501005001,000BCPG-1130Bovine Plasminogen  1 mg13550100MCPG-5130Mouse Plasminogen100 μg135HCPC-0070Human Protein C100 μg1351 mg151050100250BCPC-1070Bovine Protein C100 μg1351 mg51050100500HCP-0010Human Prothrombin  2 mg1351 mg1002001,0002,000HCP1-0010Human Prothrombin  1 mg1 Fragment 1351050100500HCP12-0010Human Prothrombin  1 mg1 Fragment 1 - 2351050100500HCP2-0010Human Prothrombin  1 mg1 Fragment 2351050100500HCP1-0011Human Prethrombin-1  1 mg1351050100500HCP2-0011Human Prethrombin-2  1 mg1351050100500BCP-1010Bovine Prothrombin  2 mg1351 mg1002001,0002,000MCP-5010Mouse Prothrombin100 μg135ENZYMESHCAPC-0080Human APC50 μg1351 mg151050100HCAPC-DEGRHuman APC-DEGR50 μg1351 mg151050100BCAPC-1080Bovine APC50 μg1351 mg35102550BCAPC-DEGRBovine APC-DEGR50 μg13535102550HCT-0020Human alpha-thrombin100 μg1351 mg1351050100500HCT-DFPHuman alpha-thrombin-DFP100 μg1351 mg1351050100HCT-FPRCKHuman alpha-thrombin-100 μg1FPRCK351mg1351050100HCT-BFPRCKHuman alpha-thrombin-100 μg1BFPRCK351 mg1351050100BCT-1020Bovine alpha-thrombin200 μg1351 mg1351050100500BCT-DFPBovine alpha-thrombin-DFP200 μg1351 mg1351050100BCT-FPRCKBovine alpha-thrombin-FPRCK200 μg1351 mg1351050100BCT-BFPRCKBovine alpha-thrombin-200 μg1BFPRCK351 mg1351050100HCBT-0022Human beta-thrombin100 μg1351 mg51050100500HCGT-0021Human gamma-thrombin100 μg1351 mg51050100500MCT-5020Mouse Thrombin50 μg1351 mg1525HCVIIA-0031Human Factor VIIa20 μg1351 mg151020100HCIXA-0050Human Factor IXa100 μg1351 mg51050100500HCIXA-EGRHuman Factor IXa-EGR100 μg1351 mg51050100HCIXA-DEGRHuman Factor IXa-DEGR100 μg1351 mg51050100BCIXA-1050Bovine Factor IXa100 μg1351 mg51050100BCIXA-EGRBovine Factor IXa-EGR100 μg1351 mg51050100BCIXA-DEGRBovine Factor IXa-DEGR100 μg1351 mg51050100MCIXA-5050Mouse Factor IXa50 μg135RATIXA-9050Rat Factor Ixa50 μg1351 mg HCXA-0060Human Factor Xa100 μg1351 mg51050100HCBXA-0061Human beta-Factor Xa100 μg1351 mg51050100HCXA-GDHuman Gla-domainless 100 μg1beta Factor Xa351 mg11050HCXA-EGRHuman Factor Xa-EGR100 μg1351 mg151050100500HCXA-DEGRHuman Factor Xa-DEGR100 μg1351 mg51050100500HCXA-BEGRHuman Factor Xa-BEGR100 μg1351 mg51050100500BCXA-1060Bovine Factor Xa100 μg1351 mg51050100500BCXA-EGRBovine Factor Xa-EGR100 μg1351 mg51050100500BCXA-DEGRBovine Factor Xa-DEGR100 μg1351 mg51050100500MCXA-5060Mouse Factor Xa50 μg135HCXIA-0160Human Factor XIa50 μg1351 mg51050100500HCXIIIA-0165Human Factor XIIIa50 μg1351 mg352550250HCPM-0140Human Plasmin500 μg1351 mg25502505002,500MCPM-5140Mouse Plasmin50 μg1RVVV-2000RVV-V Activator100 μg1351 mg10201002001,000RVVX-2010RVV-X Activator100 μg1351 mg10201002001,000ECVVII-2011E. Carinatus II Protease100 μg1351 mg10201002001,000COFACTORSHCV-0100Human Factor V50 μg1351 mg51050100500BCV-1100Bovine Factor V100 μg1351 mg51050100500HCVA-0110Human Factor Va50 μg1351 mg51050100500BCVA-1110Bovine Factor Va100 μg1351 mg51050100500HCFN-0170Human Fibronectin2 mg1351 mg1002001,0002,000HCPS-0090Human Protein S100 μg1351 mg51050100500RABTM-4202Rabbit Thrombomodulin50 μg1351 mg352550250HCVWF-0190Human von Willebrand 100 μg1Factor351 mg51050100500HCVWF-0191Human von Willebrand100 μg1 Factor (Factor VIII free)351 mg51050100500INHIBITORS AND SUBSTRATESSN-XANSN -based fluorogenic 1 mg1substrates 35501005001,000HCATIII-0120Human Antithrombin III1 mg135501005001,000MCATIII-5120Mouse Antithrombin III100 μg135BEGRCK-06Biotinylated EGR-1 mg1chloromethylketone35501005001,000FEGRCK-06Fluorescein EGR-1 mg1chloromethylketone35501005001,000BFPRCK-06Biotinylated FPR-1 mg1chloromethylketone35501005001,000FFPRCK-06Fluorescein FPR-1 mg1chloromethylketone35501005001,000FPRCK-01Phe-Pro-Arg-chloromethylketone5 mg1(PPACK)25 mg1100 mg 1EGRCK-01Glu-Gly-Arg-chloromethylketone5 mg1(GGACK)25 mg1100 mg 1CTI-01Corn Trypsin Inhibitor1 mg1310350310031000DAPAdansylarginine-N-(3-ethyl-1 mg11,5-pentanediyl)amide35501005001,000HCII-0190Human Heparin Cofactor II100 μg1351 mg51050100500SCAT I & IISample Collection/each1(3 ml or 5 ml)Anticoagulant Tubes31000SCAT I & IISample Collection/each1(10 ml)Anticoagulant Tubes31000SCAT-875BSample Collection/each1(3 or 5 mL)Anticoagulant Tubes3100010 mLeach131000SCAT-ACTPack of 10TAFI-01Thrombin-Activatable 50 μg1 Fibrinolysis Inhibitor351 mg1510ANG-01Angiostatin500 μg1351 mg2550250500HA2AP-0230Human alpha-2 Antiplasmin100 μg1351 mg51050100500HCPZ-0220Human Protein Z100 μg1351 mg51050PLATELET AND OTHER PLASMA DERIVED PROTEINSHCI-0150RHuman Fibrinogen2 mg1351 mg1001 gram135HCI-0150DHuman Fibrinogen 200 μg1Fragment D351 mg10HCI-0150EHuman Fibrinogen 100 μg1Fragment E351 mg10MCI-5150Mouse Fibrinogen1 mg13550B2GI-0001Beta2-Glycoprotein I100 μg1351 mg51050100HON-0303Human Osteonectin50 μg1351mg352550250HPF4-0180Human Platelet Factor 4100 μg1351 mg51050100500HBTG-0210Human Beta-Thromboglobulin100 μg1351 mg352550250HCTP-0200Human Thrombospondin100 μg1351 mg51050100500HVN-0230Human Vitronectin100 μg1351 mg51050100500RTF-0300Recombinant Tissue Factor10 ug1100 ug1RTLF-0350Relipidated Tissue Factor2 ug1BLAC-1200Bovine Lactadherin50 ug1BLAC-FITCFITC-Labeled Lactadherin (1.6 uM)1 mL1PCPS-025 uMol135>20>50>100BONE RELATED PROTEINSHOC-0302Human Osteocalcin20 μg135BOC-3020Bovine Osteocalcin100 μg1351 mg51050100500BON-3010Bovine Osteonectin50 μg1351 mg352550250MURINE MONOCLONAL ANTIBODIESAHV-5101Anti-Human Factor V100 μg135AHV-5102Anti-Human Factor V100 μg135AHV-5108Anti-Human Factor V100 μg135AHV-5110Anti-Human Factor V100 μg135AHV-5112Anti-Human Factor V100 μg135AHV-5146Anti-Human Factor V100 μg135ABV-5103Anti-Bovine Factor V100 μg135ABV-5104Anti-Bovine Factor V100 μg135ABV-5105Anti-Bovine Factor V100 μg135ABV-5106Anti-Bovine Factor V100 μg135ABV-5107Anti-Bovine Factor V100 μg135AHVII-5031Anti-Human Factor VII100 μg135AMVII-9031Rat anti-mouse Factor VII100 μg135AMVII-9032Rat anti-mouse Factor VII100 μg135AHVIII-5025Anti-Human Factor VIII100 μg135AMVIII-9035Rat anti-mouse Factor VIII100 μg135AHIX-5041Anti-Human Factor IX100 μg135AMIXA-9041Rat anti-Mouse Factor Ixa100 μg135AMIXA-9042Rat anti-Mouse Factor Ixa100 μg135AHX-5050Anti-Human Factor X100 μg135ABX-5051Anti-Bovine Factor X100 μg135AMX-9050Rat Anti-Mouse Factor X100 μg135AMX-9051Rat Anti-Mouse Factor X100 μg135AHPC-5071Anti-Human Protein C100 μg135AHPC-5072Anti-Human Protein C100 μg135AMPC-9071Rat anti-Mouse Protein C100 μg135AMPC-9072Rat anti-Mouse Protein C100 μg135AHPS-5091Anti-Human Protein S100 μg135AHPS-5092Anti-Human Protein S100 μg135AHT-5020Anti-Human Thrombin100 μg135AHP-5013Anti-Human Prothrombin100 μg135AMP-9013Rat anti-Mouse Prothrombin100 μg135AMPG-9130Rat anti-Mouse Plasminogen100 μg135AHXI-5061Anti-Human Factor XI100 μg135AHXII-5155Anti-Human Factor XII100 μg135AHTAFI-5024Anti-Human TAFI100 μg135AHTAFI-5026Anti-Human TAFI100 μg135AHTAFI-5065Anti-Human TAFI100 μg135AHTAFI-5081Anti-Human TAFI100 μg135AON-5031Anti-Human Osteonectin100 μg135ABOC-5021Anti-Bovine Osteocalcin100 μg135AHTFPI-5138Anti-Tissue Factor Pathway Inhibitor (monoclonal)100 ug135AHTF-5264Anti-Tissue Factor (monoclonal)100 ug135See catalogAnti-Human Monoclonal Antibodies1 mg51050100500Anti-Mouse Monoclonal Antibodies1 mg51050100500POLYCLONAL ANTIBODIESPAHFII-SSheep anti-Human1 mg1 Prothrombin5 mg1PAHFII-SAPSheep anti-Human100 μg1 Prothrombin Affinity35 PurifiedPAHFII-BUBurro anti-Human1 mg1 Prothrombin5 mg1PAMFII-SSheep anti-Mouse Prothrombin1 mg15 mg1PAHT-SSheep anti-Human 1 mg1Thrombin5 mg1PAHFV-SSheep anti-Human Factor V1 mg15 mg1PABFV-SSheep anti-Bovine Factor V1 mg15 mg1PAHFV-HHorse anti-Human Factor V1 mg15 mg1PAHFVA-SSheep anti-Human Factor Va1 mg15 mg1PAHFVII-SSheep anti-Human Factor1 mg1 VII5 mg1PAHFVIIA-RABRabbit anti-Human Factor VIIa1 mg15 mg1PAHFVIII-SSheep anti-Human Factor1 mg1 VIII5 mg1PAHFIX-SSheep anti-Human Factor IX1 mg15 mg1PAHFIX-CChicken anti-Human Factor IX1 mg1PAHFIX-SAPSheep anti-Human Factor IX, 100 μg1Affinity Purified35PARFIX-SSheep anti-Rat Factor IX1 mg15 mg1PAHFX-SSheep anti-Human Factor X1 mg15 mg1PAMFX-SSheep anti-Murine Factor X1 mg15 mg1PAMFX-SIASheep anti-Murine Factor X100 μg1(Immuno adsorbed)PAHFXI-SSheep anti-Human Factor XI1 mg15 mg1PAHFXI-SAPSheep anti-Human Factor XI, 100 μg1Affinity Purified35PAHFXII-SSheep anti-Human Factor XII1 mg15 mg1PAHFXIII-SSheep anti-Human 1 mg1Factor XIII5 mg1PAHPC-SSheep anti-Human Protein C1 mg15 mg1PAHPC-CChicken anti-Human Protein C1 mg1PAHPC-HHorse anti-Human Protein C1 mg15 mg1PAMPC-SSheep anti-Mouse Protein C1 mg15 mg1PAHPS-SSheep anti-Human Protein S1 mg15 mg1PAHPG-SSheep anti-Human 1 mg1Plasminogen5 mg1PAMPG-SSheep anti-Mouse Plasminogen1 mg15 mg1PAHAT-SSheep anti-Human 1 mg1Antithrombin III5 mg1PAMAT-SSheep anti-Mouse 1 mg1Antithrombin III5 mg1PAHCII-SSheep anti-Heparin Cofactor II1 mg15 mg1PATAFI-SSheep anti-Human TAFI1 mg15 mg1PAHTF-SSheep anti-Human Tissue 1 mg1Factor5 mg1PAHVWF-SSheep anti-Human vWF1 mg15 mg1PAHTFPI-SSheep anti-Tissue Factor Pathway Inhibitor1 mg15PAHPZ-SSheep anti-Human Protein Z1 mg15PAPFGN-SSheep anti-Porcine Fibrinogen1 mg151005001000Factor Deficient Plasmas - 2015ProductCatalog (-1, -50, or -B depending on size)1 mL tube50 mL vialProthrombin deficient plasmaFII-IDFactor V deficientFV-IDFactor VII deficientFVII-IDFactor VIII deficientFVIII-CDFactor IX deficientFIX-IDFactor X deficientFX-IDFactor XI deficientFXI-IDFactor XII deficientFXII-IDATIII deficient plasmaATIII-ID品牌链接：http://www.shijichina.com/goodsid/ziliaoview/271640.htmlHaematologic Technologies,Haematologic Technologies代理,Haematologic Technologies销售,Haematologic Technologies公司,Haematologic Technologies产品,Haematologic Technologies价格部分列表| HCVII-0030    | Human Factor VII                                 |     | Haematologic Technologies || ABOC-5021     | Anti-Bovine Osteocalcin                          |     | Haematologic Technologies || ABV-5103      | Anti-Bovine Factor V                             |     | Haematologic Technologies || ABV-5104      | Anti-Bovine Factor V                             |     | Haematologic Technologies || ABV-5105      | Anti-Bovine Factor V                             |     | Haematologic Technologies || ABV-5106      | Anti-Bovine Factor V                             |     | Haematologic Technologies || ABV-5107      | Anti-Bovine Factor V                             |     | Haematologic Technologies || ABX-5051      | Anti-Bovine Factor X                             |     | Haematologic Technologies || AHIX-5041     | Anti-Human Factor IX                             |     | Haematologic Technologies || AHP-5013      | Anti-Human Prothrombin                           |     | Haematologic Technologies || AHPC-5011     | Anti-Human Protein C                             |     | Haematologic Technologies || AHPC-5071     | Anti-Human Protein C                             |     | Haematologic Technologies || AHPC-5072     | Anti-Human Protein C                             |     | Haematologic Technologies || AHPS-5091     | Anti-Human Protein S                             |     | Haematologic Technologies || AHPS-5092     | Anti-Human Protein S                             |     | Haematologic Technologies || AHT-5020      | Anti-Human Thrombin                              |     | Haematologic Technologies || AHTF-5264     | Anti-Human Tissue Factor                         |     | Haematologic Technologies || AHTFPI-5138   | Anti-Human Tissue Factor Pathway Inhibitor       |     | Haematologic Technologies || AHV-5101      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHV-5102      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHV-5108      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHV-5110      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHV-5112      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHV-5146      | Anti-Human Factor V                              |     | Haematologic Technologies || AHVII-5031    | Anti-Human Factor VII                            |     | Haematologic Technologies || AHVIII-5025   | Anti-Human Factor VIII                           |     | Haematologic Technologies || AHX-5050      | Anti-Human Factor X                              |     | Haematologic Technologies || AHXI-5061     | Anti-Human Factor XI                             |     | Haematologic Technologies || AHXII-5155    | Anti-Human Factor XII                            |     | Haematologic Technologies || AMP-9013      | Rat anti-Mouse Prothrombin                       |     | Haematologic Technologies || AMPC-9071     | Rat anti-Mouse Protein C                         |     | Haematologic Technologies || AMPC-9072     | Rat anti-Mouse Protein C                         |     | Haematologic Technologies || AMPG-9130     | Rat anti-Mouse Plasminogen                       |     | Haematologic Technologies || AMVII-9031    | Anti-Mouse Factor VII                            |     | Haematologic Technologies || AMVIII-9035   | Anti-Mouse Factor VIII                           |     | Haematologic Technologies || AMX-9050      | Rat Anti-Mouse Factor X                          |     | Haematologic Technologies || AMX-9051      | Rat Anti-Mouse Factor X                          |     | Haematologic Technologies || ANG-01        | Angiostatin                                      |     | Haematologic Technologies || AON-5031      | Anti-Human Osteonectin                           |     | Haematologic Technologies || B2GI-0001     | β2 Glycoprotein I                               |     | Haematologic Technologies || BCAPC-1080    | Bovine APC                                       |     | Haematologic Technologies || BCAPC-DEGR    | Bovine APC-DEGR                                  |     | Haematologic Technologies || BCIX-1040     | Bovine Factor IX                                 |     | Haematologic Technologies || BCIXA-1050    | Bovine Factor IXa                                |     | Haematologic Technologies || BCIXA-DEGR    | Bovine Factor IXa-DEGR                           |     | Haematologic Technologies || BCIXA-EGR     | Bovine Factor IXa-EGR                            |     | Haematologic Technologies || BCP-1010      | Bovine Prothrombin                               |     | Haematologic Technologies || BCPC-1070     | Bovine Protein C                                 |     | Haematologic Technologies || BCPG-1130     | Bovine Plasminogen                               |     | Haematologic Technologies || BCT-1020      | Bovine α-thrombin                               |     | Haematologic Technologies || BCT-BFPRCK    | Bovine α-thrombin-BFPRCK                        |     | Haematologic Technologies || BCT-DFP       | Bovine α-thrombin-DFP                           |     | Haematologic Technologies || BCT-FPRCK     | Bovine α-thrombin-FPRCK                         |     | Haematologic Technologies || BCV-1100      | Bovine Factor V                                  |     | Haematologic Technologies || BCVA-1110     | Bovine Factor Va                                 |     | Haematologic Technologies || BCX-1050      | Bovine Factor X                                  |     | Haematologic Technologies || BCXA-1060     | Bovine Factor Xa                                 |     | Haematologic Technologies || BCXA-DEGR     | Bovine Factor Xa-DEGR                            |     | Haematologic Technologies || BCXA-EGR      | Bovine Factor Xa-EGR                             |     | Haematologic Technologies || BEGRCK-06     | Biotinylated EGR-chloromethylketone              |     | Haematologic Technologies || BFPRCK-06     | Biotinylated FPR-chloromethylketone              |     | Haematologic Technologies || BLAC-1200     | Bovine Lactadherin                               |     | Haematologic Technologies || BLAC-FITC     | FITC-conjugated Bovine Lactadherin (1.6 uM)      |     | Haematologic Technologies || BOC-3020      | Bovine Osteocalcin                               |     | Haematologic Technologies || BON-3010      | Bovine Osteonectin                               |     | Haematologic Technologies || CTI-01        | Corn Trypsin Inhibitor                           |     | Haematologic Technologies || DAPA          | dansylarginine-N-                                |     | Haematologic Technologies || ECVVII-2011   | E. Carinatus II Protease                         |     | Haematologic Technologies || EGRCK-01      | Glu-Gly-Arg-chloromethylketone                   |     | Haematologic Technologies || FEGRCK-06     | Fluorescein EGR-chloromethylketone               |     | Haematologic Technologies || FFPRCK-06     | Fluorescein FPR-chloromethylketone               |     | Haematologic Technologies || FPRCK-01      | Phe-Pro-Arg-chloromethylketone                   |     | Haematologic Technologies || HA2AP-0230    | Human α-2 Plasmin Inhibitor                     |     | Haematologic Technologies || HBTG-0210     | Human β-Thromboglobulin                         |     | Haematologic Technologies || HCAPC-0080    | Human APC                                        |     | Haematologic Technologies || HCAPC-DEGR    | Human APC-DEGR                                   |     | Haematologic Technologies || HCATIII-0120  | Human Antithrombin III                           |     | Haematologic Technologies || HCBT-0022     | Human b-thrombin                                 |     | Haematologic Technologies || HCBXA-0061    | Human β-Factor Xa                               |     | Haematologic Technologies || HCFN-0170     | Human Fibronectin                                |     | Haematologic Technologies || HCGT-0021     | Human g-thrombin                                 |     | Haematologic Technologies || HCI-0150D     | Human Fibrinogen Fragment D                      |     | Haematologic Technologies || HCI-0150E     | Human Fibrinogen Fragment E                      |     | Haematologic Technologies || HCI-0150R     | Human Fibrinogen                                 |     | Haematologic Technologies || HCII-0190     | Human Heparin Cofactor II                        |     | Haematologic Technologies || HCIX-0040     | Human Factor IX                                  |     | Haematologic Technologies || HCIXA-0050    | Human Factor IXa                                 |     | Haematologic Technologies || HCIXA-DEGR    | Human Factor IXa-DEGR                            |     | Haematologic Technologies || HCIXA-EGR     | Human Factor IXa-EGR                             |     | Haematologic Technologies || HCP-0010      | Human Prothrombin                                |     | Haematologic Technologies || HCP1-0010     | Human Prothrombin Fragment 1                     |     | Haematologic Technologies || HCP1-0011     | Human Prethrombin-1                              |     | Haematologic Technologies || HCP12-0010    | Human Prothrombin Fragment 1 - 2                 |     | Haematologic Technologies || HCP2-0010     | Human Prothrombin Fragment 2                     |     | Haematologic Technologies || HCP2-0011     | Human Prethrombin-2                              |     | Haematologic Technologies || HCPC-0070     | Human Protein C                                  |     | Haematologic Technologies || HCPG-0130     | Human glu-Plasminogen                            |     | Haematologic Technologies || HCPG-0131     | Human glu-Plasminogen (affinity form I)          |     | Haematologic Technologies || HCPG-0132     | Human glu-Plasminogen (affinity form II)         |     | Haematologic Technologies || HCPG-0133     | Human lys-Plasminogen                            |     | Haematologic Technologies || HCPM-0140     | Human Plasmin                                    |     | Haematologic Technologies || HCPS-0090     | Human Protein S                                  |     | Haematologic Technologies || HCPZ-0220     | Human Protein Z                                  |     | Haematologic Technologies || HCT-0020      | Human α-thrombin                                |     | Haematologic Technologies || HCT-BFPRCK    | Human α-thrombin-BFPRCK                         |     | Haematologic Technologies || HCT-DFP       | Human α-thrombin-DFP                            |     | Haematologic Technologies || HCT-FPRCK     | Human α-thrombin-FPRCK                          |     | Haematologic Technologies || HCTP-0200     | Human Thrombospondin                             |     | Haematologic Technologies || HCV-0100      | Human Factor V                                   |     | Haematologic Technologies || HCVA-0110     | Human Factor Va                                  |     | Haematologic Technologies || HCVIIA-0031   | Human Factor VIIa                                |     | Haematologic Technologies || HCVWF-0190    | Human von Willebrand Factor                      |     | Haematologic Technologies || HCVWF-0191    | Human von Willebrand Factor (Factor VIII free)   |     | Haematologic Technologies || HCX-0050      | Human Factor X                                   |     | Haematologic Technologies || HCXA-0060     | Human Factor Xa                                  |     | Haematologic Technologies || HCXA-BEGR     | Human Factor Xa-BEGR                             |     | Haematologic Technologies || HCXA-DEGR     | Human Factor Xa-DEGR                             |     | Haematologic Technologies || HCXA-EGR      | Human Factor Xa-EGR                              |     | Haematologic Technologies || HCXA-GD       | Human Gla-Domainless β-Factor Xa                |     | Haematologic Technologies || HCX-GD        | Human Gla-domainless Factor X                    |     | Haematologic Technologies || HCXI-0150     | Human Factor XI                                  |     | Haematologic Technologies || HCXIA-0160    | Human Factor XIa                                 |     | Haematologic Technologies || HCXII-0155    | Human Factor XII                                 |     | Haematologic Technologies || HCXIII-0160   | Human Factor XIII                                |     | Haematologic Technologies || HCXIIIA-0165  | Human Factor XIIIa                               |     | Haematologic Technologies || HOC-0302      | Human Osteocalcin                                |     | Haematologic Technologies || HON-0303      | Human Osteonectin                                |     | Haematologic Technologies || HPF4-0180     | Human Platelet Factor 4                          |     | Haematologic Technologies || HVN-0230      | Human Vitronectin                                |     | Haematologic Technologies || MCAPC-5080    | Mouse APC                                        |     | Haematologic Technologies || MCATIII-5120  | Mouse Antithrombin III                           |     | Haematologic Technologies || MCI-5150      | Mouse Fibrinogen                                 |     | Haematologic Technologies || MCIX-5040     | Mouse Factor IX                                  |     | Haematologic Technologies || MCIXA-5050    | Mouse Factor IXa                                 |     | Haematologic Technologies || MCP-5010      | Mouse Prothrombin                                |     | Haematologic Technologies || MCPC-5070     | Mouse Protein C                                  |     | Haematologic Technologies || MCPG-5130     | Mouse Plasminogen                                |     | Haematologic Technologies || MCPM-5140     | Mouse Plasmin                                    |     | Haematologic Technologies || MCT-5020      | Mouse Thrombin                                   |     | Haematologic Technologies || MCX-5050      | Mouse Factor X                                   |     | Haematologic Technologies || MCXA-5060     | Mouse Factor Xa                                  |     | Haematologic Technologies || PABFV-S       | Sheep anti-Human Factor V                        |     | Haematologic Technologies || PAHAT-S       | Sheep anti-Human Antithrombin III                |     | Haematologic Technologies || PAHCII-S      | Sheep anti-Heparin Cofactor II                   |     | Haematologic Technologies || PAHF4-RAB     | Rabbit anti-Human Platelet Factor 4              |     | Haematologic Technologies || PAHFII-BU     | Burro anti-Human Prothrombin                     |     | Haematologic Technologies || PAHFII-S      | Sheep anti-Human Prothrombin                     |     | Haematologic Technologies || PAHFII-SAP    | Sheep anti-Human Prothrombin, Affinity Purified  |     | Haematologic Technologies || PAHFIX-C      | Chicken anti-Human Factor IX                     |     | Haematologic Technologies || PAHFIX-S      | Sheep anti-Human Factor IX                       |     | Haematologic Technologies || PAHFIX-SAP    | Sheep anti-Human Factor IX, Affinity Purified    |     | Haematologic Technologies || PAHFVA-S      | Sheep anti-Human Factor Va                       |     | Haematologic Technologies || PAHFV-H       | Horse anti-Human Factor V                        |     | Haematologic Technologies || PAHFVIIA-RAB  | Rabbit anti-Human Factor VIIa                    |     | Haematologic Technologies || PAHFVIII-S    | Sheep anti-Human Factor VIII                     |     | Haematologic Technologies || PAHFVII-S     | Sheep anti-Human Factor VII                      |     | Haematologic Technologies || PAHFV-S       | Sheep anti-Human Factor V                        |     | Haematologic Technologies || PAHFXIII-S    | Sheep anti-Human Factor XIII                     |     | Haematologic Technologies || PAHFXII-S     | Sheep anti-Human Factor XII                      |     | Haematologic Technologies || PAHFXI-S      | Sheep anti-Human Factor XI                       |     | Haematologic Technologies || PAHFXI-SAP    | Sheep anti-Human Factor XI, Affinity Purified    |     | Haematologic Technologies || PAHFX-S       | Sheep anti-Human Factor X                        |     | Haematologic Technologies || PAHPC-C       | Chicken anti-Human Protein C                     |     | Haematologic Technologies || PAHPC-H       | Horse anti-Human Protein C                       |     | Haematologic Technologies || PAHPC-S       | Sheep anti-Human Protein C                       |     | Haematologic Technologies || PAHPG-S       | Sheep anti-Human Plasminogen                     |     | Haematologic Technologies || PAHPS-S       | Sheep anti-Human Protein S                       |     | Haematologic Technologies || PAHPZ-S       | Sheep anti-Human Protein Z                       |     | Haematologic Technologies || PAHTFPI-S     | Sheep anti-Human Tissue Factor Pathway Inhibitor |     | Haematologic Technologies || PAHTF-S       | Sheep anti-Human Tissue Factor                   |     | Haematologic Technologies || PAHT-S        | Sheep anti-Human Thrombin                        |     | Haematologic Technologies || PAHVWF-S      | Sheep anti-Human vWF                             |     | Haematologic Technologies || PAMFII-S      | Sheep anti-Mouse Prothrombin                     |     | Haematologic Technologies || PAMFX-S       | Sheep anti-Murine Factor X                       |     | Haematologic Technologies || PAMFX-SIA     | Sheep anti-Murine Factor X - Immuno adsorbed     |     | Haematologic Technologies || PAMPC-S       | Sheep anti-Murine Protein C                      |     | Haematologic Technologies || PAMPG-S       | Sheep anti-Mouse Plasminogen                     |     | Haematologic Technologies || PAPFGN-S      | Sheep anti-Porcine Fibrinogen                    |     | Haematologic Technologies || PATAFI-S      | Sheep anti-Human TAFI                            |     | Haematologic Technologies || RABTM-4202    | Rabbit Thrombomodulin                            |     | Haematologic Technologies || RTF-0300      | Recombinant Tissue Factor                        |     | Haematologic Technologies || RVVV-2000     | RVV-V Activator                                  |     | Haematologic Technologies || RVVX-2010     | RVV-X Activator                                  |     | Haematologic Technologies || SCAT-27-4.5/5 | CTI/Citrate Blood Collection Tube                |     | Haematologic Technologies || TAFI-01       | Thrombin-Activatable Fibrinolysis Inhibitor      |     | Haematologic Technologies |Haematologic Technologies 中国代理, Haematologic Technologies 上海代理， Haematologic Technologies 北京代理，Haematologic Technologies 广东代理， Haematologic Technologies 江苏代理Haematologic Technologies 湖北代理,Haematologic Technologies 天津,Haematologic Technologies黑龙江代理,Haematologic Technologies 内蒙古代理,Haematologic Technologies 吉林代理,Haematologic Technologies 福建代理, Haematologic Technologies 江苏代理, Haematologic Technologies 浙江代理,Haematologic Technologies 四川代理,Haematologic Technologies Inc. (HTI) 公司是一家专门致力于高质量的人血浆蛋白的分离和特性研究的重要生产商， 其产品非常适用于体内研究。在公司发展的第二个十年里，HTI将目光投向参与血液凝集和纤维蛋白溶解，以及骨代谢调节的蛋白的研究。HTI产品系列含有超 过100种高纯度和特异性的蛋白，包括：酶原、酶、协同因子和抑制剂，同时还提供补体系列的单克隆和多克隆抗体。另外，HTI还提供一些技术服务，如：蛋 白定制、纯化、修饰、科研合作等。Human Coagulation Factor XIIIa人凝血因子XIIIa纤维蛋白的稳定可溶性纤维蛋白转化为不溶性纤维蛋白凝块由转座酰胺酶XIIIa催化。纤维蛋白的α-和γ-链的赖氨酸和谷氨酰胺侧链交联以形成均聚物。HCXIIIA-0165 人体因子XIIIa尺寸 50μg公式 50％甘油/ 500uM EDTA（v / v）存储 -20℃下纯度 > 95％通过SDS-PAGE活动确定 光度测定保质期（妥善储存） 12个月样品凝胶信息：凝胶 Novex 4-12％Bis-Tris加载 人因子XIIIa，每泳道1μg缓冲 MOPS标准 SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191kDa），磷酸化酶B（97kDa），BSA（64kDa），谷氨酸脱氢酶（51kDa），醇脱氢酶（39kDa），碳酸酐酶（28kDa），肌红蛋白红（19kDa），溶菌酶kDa的）特别说明 在未还原的样品中，A链在活化后朝向B链向下移动。概述因子XIIIa（FXIIIa）（纤维蛋白溶血素，血浆转谷氨酰胺酶，纤维蛋白稳定因子，EC 2.3.2.13）是在凝血级联的蕞后阶段起作用的谷氨酰胺酰基γ-谷氨酰转移酶，通过交联α和γ链稳定纤维蛋白凝块的纤维蛋白以形成均聚物（1-4）。FXIIIa的几个独特功能使其与通常与之相关的蛋白质分开。因子XIIIa是凝血级联的唯壹非蛋白水解酶。与其他转座酰胺酶不同，它完全以酶原形式存在，是唯壹在细胞外起作用的巯基酶。血浆FXIIIa是由2对不相同亚基（A2B2）（4-7）组成的四聚体（Mr = 312,000）。血小板FXIII是二聚体（Mr = 46,000），仅由一对相同的A亚基（A2）组成，如来自所有细胞内源的因子XIII（7-11）。A亚基含有6个游离的巯基，其中之一是活性中心（12）。血浆FXIII（A2B2）转化为活性转谷氨酰胺酶FXIIIa（A2'）是由A亚基（13）的NH2-末端的Arg36-Gly37肽键的凝血酶催化水解产生的。由该切割诱导的构象变化导致活性位点半胱氨酸的暴露。完全活性仅在B亚基二聚体从A2'二聚体（14-16）的Ca2 +依赖性（Kd = 10-3M）解离之后才实现。通过结合含有Aa链残基242-424（14-16）的纤维蛋白（ogen）区域，可增强A2'B2复合物的解离。因此，在FXIII（90nM），纤维蛋白原（8μM）和Ca 2+（2.5mM游离）的正常血浆浓度下，产生的所有FXIIIa将处于完全活化（A2'）分子形式。由FXIIIa产生的其他与生理相关的交联复合物包括纤维蛋白纤维蛋白原（17），纤维蛋白 - 纤连蛋白（18），纤维蛋白-vWF（19），纤维蛋白-α2-抗血纤蛋白（20），纤维蛋白 - 肌动蛋白（21），纤维蛋白 - 血小板反应蛋白纤连蛋白胶原（19），vWF胶原（19），肌动蛋白肌球蛋白（21,22），因子V因子V（23）。除了凝块稳定之外，FXIIIa被认为在涉及细胞增殖的各种过程中起作用，例如伤口愈合，组织重塑，动脉粥样硬化和肿瘤生长。血浆FXIIIa通过α-淀粉酶在EDTA存在下裂解均质血浆FXIII产生。通过离子和亲和层析纯化A2'B2亚基，并在50％甘油0.5mM EDTA中提供，以在-20℃下储存。OverviewHaematologic Technologies, Inc. (HTI), an ISO 9001:2015 registered company, is a primary manufacturer that specializes in the isolation and characterization of high quality, plasma proteins which are intended for in vitro research use. HTI’s emphasis is focused on proteins involved in the coagulation cascade, as well as the regulation of bone metabolism. The HTI product line consists of over 150 highly purified and well-characterized proteins including zymogens, enzymes, cofactors, and inhibitors as well as a complementary line of monoclonal and polyclonal antibodies. Also available are factor deficient plasmas and customized, blood collection tubes made-to-order for clinical research. Services available include custom protein purification, protein modification, assay development, contract manufacturing and contract research. Please view our 3-minute video above.MissionThe mission of Haematologic Technologies, Inc. is to supply the international coagulation research community with the highest quality proteins and reagents attainable. We strive to make continuous advancements in our manufacturing and quality control processes to ensure the superiority of our products to those of our competitors. HTI also endeavors to be on the cutting edge of coagulation research through in-house efforts and the formation of strategic relationships with firms at the top of thrombosis and hemostasis research.DifferentiationHaematologic Technologies differentiates itself from its competitors by three main factors: excellent technical service, intellectual resources and custom manufacturing and research. HTI’s marquee difference is its technical service department, which strives to give customers unparalleled service for our products and their uses. When customers and distributors call with technical concerns, they can speak to a Ph.D. scientist that is actually involved with the manufacture of the product. Often, our technical service personnel go above and beyond the expected to provide customers with recommendations for their experimental problems, experimental design and procedural assistance. HTI feels that this type of relationship with its customers is the key to our success, and we will always provide this level of service to any of our customers. What’s more, HTI’s consultants are always at hand to provide an extra level of assistance if needed.Quality Policy"HTI is committed to achieving the highest level of customer satisfaction, and to the continual improvement of its products, services and quality management system." For a copy of our ISO certificate please click here.Coagulation ProductsHuman ProteinsHuman ZymogensFactor VIIFactor IXFactor XFactor XIFactor XIIFactor XIIIPlasminogenProtein CProthrombinHuman EnzymesActivated Protein CThrombin (alpha)Thrombin (beta, gamma)Factor VIIaFactor IXaFactor XaFactor XIaFactor XIIIaPlasminHuman CofactorsFactor VFactor VaFibronectinProtein Svon Willebrand FactorProtein ZHuman Protease InhibitorsHuman Antithrombin IIIHeparin Cofactor IITAFIAngiostatinAlpha-2-Plasmin InhibitorHuman Platelet & Other Plasma ProteinsFibrinogenBeta-2-Glycoprotein 1Platelet Factor 4Beta-ThromboglobulinThrombospondinVitronectinRecombinant Tissue FactorHuman Bone Related ProteinsOsteocalcinBovine ProteinsBovine ZymogensFactor IXFactor XPlasminogenProtein CProthrombinBovine EnzymesActivated Protein CThrombin (alpha)Factor IXaFactor XaBovine CofactorsFactor VFactor VaBovine Bone Related ProteinsOsteonectin (SPARC)OsteocalcinNew Bovine ProductsLactadherin / MFG-E8Mouse ProteinsMouse ZymogensFactor XPlasminogenProthrombinMouse EnzymesFactor XaPlasminOtherHuman Antithrombin IIIFibrinogenOther SpeciesRabbitThrombomodulinSnake Venom ProteasesInhibitorsOtherCorn Trypsin Inhibitor (CTI)DAPAHuman Protease InhibitorsHuman Antithrombin IIIHeparin Cofactor IITAFIAngiostatinAlpha-2-Plasmin InhibitorChloromethylketonesChloromethylketonesFluorogenic SubstratesAntibodiesFactor Deficient PlasmasBlood Collection TubesCustom Collection TubesCustom Blood / Sample Collection TubesCorn Trypsin Inhibitor TubesCorn Trypsin Inhibitor TubesActivated Clotting Time TubesActivated Clotting Time Tubes

缺氧条件下NRF-1基因过表达的大鼠心肌细胞增殖和凋亡变化构建核呼吸因子-1（NRF-1）过表达的大鼠心肌细胞,观察缺氧条件下细胞增殖和细胞凋亡的变化。方法将大鼠心肌细胞H9C2分为NRF-1过表达组、空载体组和正常对照组,NRF-1过表达组和空载体组分别用NRF-1过表达慢病毒及空载体病毒进行转染,正常对照组不做处理。将三组细胞置于缺氧用三气培养箱中进行缺氧培养（37℃、1%O2+5%CO2+94%N2）24 h。采用实时无标记分析（RTCA）技术观察缺氧6、12、24 h时的细胞增殖水平,流式细胞仪检测缺氧24 h时细胞凋亡率,qRT-PCR法检测缺氧24 h时半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）mRNA的相对表达量。结果缺氧12、24 h时,NRF-1过表达组细胞增殖水平高于正常对照组和空载体组;缺氧24 h时,与空载体组和正常对照组比较,NRF-1过表达组细胞凋亡水平降低,且caspase-3 mRNA表达水平较低（P均

重组人p53腺病毒注射液治疗口腔粘膜白斑对患者肿瘤坏死因子TNF-α的影响重组人p53腺病毒注射液治疗口腔粘膜白斑的临床效果分析及对患者肿瘤坏死因子TNF-α的影响。方法选取我院收治的口腔粘膜白斑患者116例,随机分为两组,对照组患者应用常规的治疗方法,研究组患者应用重组人p53腺病毒注射液进行治疗。对比两组患者的临床效果以及对患者肿瘤坏死因子TNF-α的影响。结果治疗后研究组患者的复发时间明显短于对照组(P

宣肺通腑汤辅助治疗中老年重症肺炎合并胃肠功能障碍的临床观察宣肺通腑汤治疗中老年重症肺炎合并胃肠功能障碍的疗效及对胃肠功能的保护作用及对炎症因子的影响。方法:将104例符合要求的患者随机分为对照组和观察组各52例。对照组给予抗感染治疗、抗炎治疗、对症治疗及支持治疗,给予枸橼酸莫沙必利口服溶液,10 m L/次,3次/d,口服;双歧杆菌三联活菌散,2 g/次,3次/d,口服。观察组在对照组治疗的基础上给予宣肺通腑汤,1剂/d。两组疗程均连续治疗14 d。记录治疗前后CURB65,SMART-COP,临床肺部感染评分(CPIS),中医证候评分、胃肠功能障碍(GIDF),急性病生理和长期健康Ⅱ评分(APACHEⅡ)和多器官功能障碍综合征(MODS)评分,检测治疗前后血清胃动素(MTL),胃泌素(GAS),D-乳酸,二胺氧化酶(DAO),降钙素原(PCT),白细胞介素-6(IL-6),IL-8,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;记录ICU病死率(2周内),ICU住院日、机械通气时间。结果:观察组患者临床疗效愈显率为59.62%,高于对照组愈显率38.46%(χ2=4.6564,P

复明地黄汤辨证加减对中老年干眼症患者泪膜功能及泪液IL-1β、TSLP的影响复明地黄汤辨证加减对中老年干眼症患者泪膜功能及泪液白介素(IL)-1β、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响。方法:选择2015年9月至2017年9月收治的60例中老年干眼症患者(120眼),按随机数字表法分为观察组和对照组,每组30例。对照组患者以0.2%的卡波姆眼液滴眼治疗,观察组患者在对照组基础上采用复明地黄汤辨证加减进行治疗。观察治疗前及治疗2个月后患者泪膜破裂时间(BUT)、基础泪液分泌试验(SIT)、角膜荧光素染色(FL)评分及泪液IL-1β、TSLP水平。结果:观察组治疗总有效率为96.7%,明显高于对照组的83.3%(P

丹参注射液对兔软骨细胞增殖与凋亡的影响观察丹参注射液对兔软骨细胞增殖与凋亡的影响。方法:取健康4周龄新西兰大白兔24只,取膝关节软骨组织并建立兔膝软骨细胞体外培养体系,采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT)检测软骨细胞2-5代的增长曲线;采用梯度时间法优化丹参注射液干预软骨细胞活性的时效及量效关系;采用RT-PCR法检测各组软骨细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax的表达。结果:第2-5代细胞的增殖曲线趋势:第1天各代细胞光密度值(OD值)没有显著差异(P>0.05),第2天增殖缓慢,第3天增殖逐渐加快,第4天进入生长期,第5、6天增殖变慢,第7、8天增殖进入平台期,第9、10天增殖抑制。OD值随细胞传代,呈减低趋势,第1、3代OD值高于第4、5代,但没有显著差异(P>0.05)。时效关系:2组干预24小时OD值没有显著差异(P>0.05),干预48小时OD值中剂量组大于对照组(P0.05);干预72小时后,400、200、100、50、25μg/L浓度细胞的OD值显著大于0μg/L浓度的OD值(P0.05)。Bcl-2、Bax表达:诱导凋亡的第3代软骨细胞,加丹参注射液干预24小时后,细胞Bax表达中、高剂量组小于模型组(P

丹皮酚逆转卵巢癌SKOV3/DDP细胞多药耐药性的机制本文在卵巢癌耐药性SKOV3/DDP细胞中,检测丹皮酚（paeonol,PL）逆转卵巢癌耐药的作用,探讨其逆转耐药的机制。结果显示,PL对SKOV3/DDP细胞具有耐药逆转作用。流式细胞术检测发现,PL可浓度依赖性地抑制P糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）功能;采用荧光定量PCR和细胞免疫荧光技术,检测发现15、30和60μmol·L-1PL对MDR1/P-gp和异黏蛋白（metadherin,MTDH）的抑制作用,及对磷酸酶和张力蛋白类似物（phosphataseandtensinhomolog,PTEN）的诱导作用均逐渐增强（P -1 PL组,但其诱导PTEN蛋白和抑制MTDH蛋白的作用仅与15μmol·L-1 PL组相当。本研究表明, PL对SKOV3/DDP细胞的逆转耐药作用可能与抑制P-gp功能和MDR1/P-gp、MTDH表达,诱导PTEN表达有关,为PL作为耐药逆转剂应用于卵巢癌耐药治疗提供了理论依据。

18年国庆节放假安排的通知 亲爱的客户朋友们及各部门同事们： 您们好！2018年国庆临近，上海钰博生物科技有限公司全体员工预祝大家事业顺利步步高升，国庆节团圆永平安！根据国家法定假期规定，并结合公司实际情况，现将上海钰博生物科技有限公司放假安排通知如下：2018年10月1日（周一）至10月7日（周日）放假，共计7天，10月8日（周一）正常上班。放假期间我司将不再发货，如您有需求请提前做好备货，或有什么问题也可直接QQ或微信留言，由此给您带来的不便，敬请谅解.                             上海钰博生物科技有限公司2018年9月28日

益智仁联合乌药对高糖培养肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其机制探讨益智仁联合乌药对高糖培养肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其机制。方法取益智仁10 g、乌药10 g及益智仁10 g+乌药10 g分别加10倍量水煎煮过滤制备成浓度分别为0、25、50、100、200、400μg/mL的药液。选取肾小球系膜细胞培养后分为正常对照组、高糖组、高糖+益智仁组、高糖+乌药组、高糖+益智仁+乌药组,采用以上药物进行相应干预,并检测各组细胞增殖抑制率、miRNA-21表达及磷酸酶张力蛋白同源基因(PTEN)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白表达。结果益智仁、乌药、益智仁+乌药对高糖培养的肾小球系膜细胞均有抑制作用,且抑制作用呈浓度依赖性;药物浓度相同情况下,高糖+益智仁+乌药组系膜细胞增殖抑制率最高(P均

慢性萎缩性胃炎胃黏膜免疫相关指标变化研究目的了解慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)胃黏膜免疫相关指标变化规律。方法117例CAG患者(轻度萎缩22例、中度59例、重度36例)为观察组,118例健康者为对照组。采用化学发光方法定量测定血清胃蛋白酶原(PG)水平,ELISA法检测胃黏膜免疫球蛋白IgG、IgA、IgM和分泌型IgA(sIgA)及IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α水平,流式细胞术检测胃黏膜NK细胞、CD3+和CD4+水平及计算CD4+/CD8+值。结果 CAG患者PGI水平(63.61±8.97)μg/L和PGR(2.94±1.71)均较对照组降低(t=67.955、25.341,均P

miR-27a在老年急性髓系白血病骨髓单个核细胞中表达及与预后的关系探讨miR-27a在老年急性髓系白血病(AMI)患者骨髓单个核细胞中表达及与预后的关系。方法选取初治老年AMI患者95例,以行骨髓标本检查的非白血病老年人35例作为对照组,所有患者采取小剂量MA方案治疗,利用实时荧光定量PCR技术检测骨髓单个核细胞中miR-27a表达。所有患者均随访至2016年4月30日,以miR-27a相对表达量的P25值为界值,将患者分为低表达组(n=24)和高表达组(n=71),利用Kaplan-Meier法对miR-27a相对表达量对患者总体生存时间的影响进行分析。结果老年AMI患者骨髓单个核细胞中miR-27a相对表达量高于对照组,且单核系高于非单核系(P

早期输注高氧液对重症烧伤患者脂质过氧化反应的影响及注意事项探讨早期输注高氧液对重症烧伤患者脂质过氧化反应的影响。方法将2010年7月~2015年7月我院收治的80例严重烧伤患者按照随机数字表法分为实验组40例和对照组40例,两组患者均给予常规救治方案,对照组常规补液,1次/6h;实验组在常规治疗基础上以等量高氧液代替常规液体输注,1次/6h;两组患者均治疗3d。分别于高氧液输注前(T0)、输注24h(T1)、输注48h(T2)、输注72h(T3)检查患者血流动力学指标,评价两组急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ),采用血气分析仪检查两组患者动脉血氧饱和度(SpO2)和动脉氧分压(PaO2),酶联免疫吸附试验检测两组患者血清丙二醛(MDA)含量。结果两组患者治疗后中心静脉压(CVP)、心率(HR)有上升趋势,但T1、T2、T3与T0时点比较,差异无统计学意义(均P>0.05),两组治疗前后各时段CVP、HR比较,差异亦无统计学意义(均P>0.05)。两组患者治疗后APACHEⅡ评分、血清MDA水平均呈降低趋势,与T0时点比较,T1、T2、T3时点APACHEⅡ评分、血清MDA水平显著降低,其中实验组APACHEⅡ评分、血清MDA水平降低得更明显,两组治疗前后各时段APACHEⅡ评分、血清MDA比较,差异均有统计学意义(P

S100B蛋白结合影像学在急性非特异性脊髓炎患者病情评估中的意义探讨S100B在急性非特异性脊髓炎患者脑脊液中的表达变化及S100B对急性非特异性脊髓炎(ANM)患者病情评估的意义。方法选取2015年8月至2016年8月武装警察部队后勤学院附属医院脑科中心收治的8例ANM患者为研究对象,选取脑脊液检测未发现异常的正常脑脊液作为对照组,采用蛋白质组学技术检测脑脊液中S100B的表达变化,并通过酶联免疫吸附测定方法验证对照组及ANM患者治疗前后脑脊液中S100B的表达情况。结果 ANM患者急性期磁共振成像检查可发现多发性高密度影,经治疗后患者症状改善,弥散性高密度病灶消失。蛋白质组学技术及酶联免疫吸附测定方法均可以检测到脑脊液中S100B的存在,其中蛋白质组学为S1∶S2=0.33;S1∶N=9.60;放射免疫测定S100B:与对照组比较,ANM患者中脑脊液中S100B明显升高[(0.111±0.009)μg比(1.761±0.121)μg](P

环孢素A对难治性免疫性血小板减少性紫癜的辅助治疗探讨环孢素A辅助治疗难治性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的临床疗效及对患者血小板计数和细胞因子的影响。方法选择2013年1月至2016年12月期间浙江省金华市人民医院收治的难治性ITP患者78例。按照随机数字表分为观察组39例与对照组39例。对照组患者给予利妥昔单抗治疗,观察组在对照组基础上结合环孢素A辅助治疗,两组患者疗程均为3个月。比较两组患者的疗效,治疗前后血小板计数变化,血小板恢复正常时间,治疗前后细胞因子变化及不良反应发生情况。结果观察组患者治疗总有效率(92.31%)高于对照组(69.23%),差异有统计学意义(χ2=6.6857,P0.05)。结论环孢素A辅助治疗难治性ITP患者疗效显著,且可增加患者血小板数量,降低IFN-γ水平,增加IL-4、IL-10水平,提高患者免疫力。

血清前列腺特异性抗原、前列腺特异性抗原密度和高迁移率族蛋白B1诊断老年前列腺癌的价值探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)和高迁移率族蛋白(HMG)B1用于老年前列腺癌的诊断价值。方法选择老年前列腺癌患者69例(前列腺癌组)、同期老年前列腺增生患者60例(前列腺增生组)及健康体检老年男性51例作为对照组。所有研究对象于清晨空腹采集外周静脉血,分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清PSA、PSAD和HMGB1含量。结果前列腺癌组血清PSA、PSAD和HMGB1水平明显高于前列腺增生组和对照组(前列腺增生组:t=29.674、25.212、23.665,对照组:t=35.654、36.293、30.286,均P

后腹腔镜输尿管切开取石术与经输尿管镜取石术治疗老年上尿路结石患者的疗效及对血清ET-1、PGE2、PGF2α的影响目的:探讨后腹腔镜输尿管切开取石术（RLU）与经输尿管镜取石术（URL）治疗老年上尿路结石患者的效果及对血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）、内皮素（ET-1）、前列腺素E2（PGE2）、PGF2α等指标的影响。方法:将2015年4月-2017年7月因上尿路结石于本院行手术治疗的90例患者纳入研究,并随机分为对照组与观察组,每组各45例。对照组采用URL术治疗,观察组采用RLU术,比较两组患者术前及手术5 d后hs-CRP及ET-1改善情况,PGE2、PGF2α等疼痛介质水平改善情况,及两组临床疗效差异。结果:观察组ET-1及hs-CRP等指标水平低于对照组,两组比较差异均有统计学意义（P2、PGF2α水平低于对照组（P

达英-35联合克罗米芬对多囊卵巢综合征子宫内膜容受性影响目的:探讨达英-35联合克罗米芬治疗多囊卵巢综合征(PCOS)疗效及对子宫内膜容受性影响。方法:将2015年1月-2017年1月因PCOS于我院妇科就诊的90例患者纳入研究并随机分组,对照组45例单用克罗米芬治疗,观察组45例联合达英-35治疗,3个月经周期为1个疗程。比较两组临床疗效。结果:治疗后,患者雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)升高,子宫内膜螺旋动脉血流阻力指数(RI)及搏动指数(PI)降低,观察组改善更显著(P

负性调控因子IRAKM在系统性红斑狼疮免疫调节异常中的作用目的:研究白介素-1受体相关激酶-M(IRAKM)在系统性红斑狼疮(SLE)中的表达及其与免疫调节的关系。方法:将103例SLE患者根据其疾病活动度评分(SLEDAI)分为活动期组(55例)和稳定期组(48例),另选40名体检健康者作为对照组;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测3组外周血单核细胞中IRAKM mRNA的表达量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体水平,免疫散射比浊法测定血清补体C3、C4水平;应用单因素方差分析法分析3组各观察指标的差异,Pearson或Spearman分析IRAKM与SLE自身抗体及补体的相关性。结果:活动期组和稳定期组SLE患者的IRAKM mRNA表达量均明显低于对照组(P

基于光学纳米探针的三磷酸腺苷、甲胎蛋白、microRNA和端粒酶检测付盼江南大学摘要：本论文利用功能性核酸分子将贵金属和上转换纳米材料构建成三种类型的纳米自组装生物传感器,此类传感器具有独特的圆二色性(CD)、表面增强拉曼散射(SERS)或荧光特性。基于良好的生物相容性以及适配体与目标物的特异性识别性能,将所构建的纳米生物传感器作为光学活性探针,成功建立了系列高灵敏度、高特异性的细胞内和血清中生物标志物检测的新原理和新方法。具体内容如下:1.以含有核酸适配体的DNA分子为骨架,将不同粒径的金纳米粒子构建成一种异质二聚体等离子手性传感器,实现肿瘤细胞内三磷酸腺苷(ATP)的高灵敏检测。在溶液中,异质二聚体对ATP有特异性识别,使二聚体结构发生解离,CD信号对ATP浓度的变化具有明显响应;进入细胞后,该传感器具有较高的生物相容性和稳定性,并能与细胞中ATP特异性结合进而产生CD信号的变化。对细胞内ATP的检测灵敏度达到0.2mmol/L,线性范围为1.5-4.2 mmol/L。建立了细胞内小分子生物标志物的手性传感检测方法。2.基于适配体碱基互补配对原则构建了银纳米粒子三聚体表面增强拉曼传感器,实现对血清中甲胎蛋白(AFP)的超灵敏检测。以修饰拉曼信标的银纳米粒子作为基底,可显著提高传感器的电磁场强度。实验结果证明银纳米粒子三聚体具有强烈的拉曼增强效应。成功构建了SERS传感检测AFP的体系,对AFP的最低检测限(LOD)达到0.097amol/L,线性范围为0.2-20 amol/L。该传感器有望作为一种通用的检测平台应用于其它生物标志物的定量检测。3.采用DNA驱动的金纳米棒二聚体和上转换纳米颗粒多级次卫星状纳米结构,实现了肿瘤细胞内microRNA含量和端粒酶活性的同时检测。该传感器进入细胞后,基于碱基互补配对和引物延伸原则,利用SERS和荧光信号分别实现细胞中miR-21和端粒酶同时定量分析。其中,拉曼强度与miR-21浓度之间具有良好的线性关系,线性范围是0.021-22.36 amol/ngRNA,LOD达到0.011 amol/ngRNA;荧光强度与端粒酶活性之间线性范围是0.6×10-12到31×10-12 IU,LOD达到3.2×10-13 IU。这方法实现了活细胞内双重信号介导的两种癌症标志物的同时检测。 还原关键词：纳米生物传感器; 生物标志物; 圆二色性; 表面增强拉曼散射; 荧光;导师：胥传来;分类号：TP212.3;R446.1

乳腺癌中CAFs通过旁分泌效应诱导肿瘤转移的表观遗传学分子机制研究贾欢欢天津医科大学摘要：目的肿瘤转移是导致乳腺癌患者死亡的重要原因之一。基质细胞和肿瘤细胞的相互作用在促进肿瘤生长和维持肿瘤的恶性表型中发挥重要作用。癌相关成纤维细胞(CAFs)作为基质细胞中最重要的成员之一,通过旁分泌效应,即产生多种生长因子、趋化因子等信号分子促进肿瘤发生和转移,但是,其具体的分子机制和参与这些过程的分子介体尚不明了。相关研究表明,表观遗传学机制的改变,尤其是组蛋白修饰、染色质重塑及非编码RNA调控等实现对靶基因的调控,在诱发肿瘤转移中扮演重要角色。本研究主要阐明乳腺癌中CAFs介导肿瘤细胞转移的关键作用因子,以及CAFs诱导的肿瘤细胞中表观遗传学修饰的改变及相关的分子机制,为乳腺癌的治疗提供新的靶点。方法1.以乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7为模型,分为下列五组条件培养:空白对照、TGF-β1刺激处理、CAFs-CM处理、CAFs-CM联合TGF-β1抑制剂(SB431542)处理、CAFs-CM联合吡非尼酮(PFD)处理。ELISA检测细胞上清液中TGF-β1的浓度水平;Western Blot和IF检测蛋白质的表达水平及分布;Transwell和Wound Healing Assay检测细胞侵袭和迁移能力;Real-time PCR检测对照组与CAFs-CM处理组之间多种lnc RNA的表达水平;Real-time PCR和FISH检测上述五组细胞中HOTAIR的表达水平。以乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7为模型,分为下列三组条件培养:空白对照、CAFs-CM处理、CAFs-CM联合sh HOTAIR处理。Transwell检测细胞侵袭能力;IF检测蛋白质的表达水平及分布;2.生物信息学分析预测HOTAIR启动子区域SMAD结合位点;Ch IP检测蛋白质H3K27me3、EZH2与CDK5RAP1、Egr-1及蛋白质SMAD2/3/4与HOTAIR的相互作用关系。3.构建MDA-MB-231裸鼠乳腺癌原位肿瘤模型。将上述细胞分为control组、CM组、CM-sh HOTAIR组经过转染luciferase慢病毒,接种至裸鼠乳腺脂肪垫上,建立裸鼠乳腺癌原位肿瘤模型。进行体内研究HOTAIR对CAFs诱导的肿瘤转移的影响。小动物活体成像技术检测肿瘤大小及肺转移的荧光信号;H&E染色鉴定是否发生肿瘤的肺转移;IHC检测β-catenin、EZH2、H3K27me3、p-SMAD2、p-SMAD3等表达情况;FISH检测石蜡切片组织中HOTAIR的表达水平。4.利用FISH和IHC检测59例临床获取的浸润性乳腺转移癌及原位导管癌中HOTAIR和FAP-α、α-SMA、CDK5、CDK5RAP1、EZH2、Egr-1的表达水平,研究其表达量和肿瘤转移及预后不良之间的相关性。结果1.在乳腺癌进展期间,CAFs通过分泌适宜癌细胞生长及转移的信号分子,诱导肿瘤转移。通过ELISA实验对四组细胞的上清液中TGF-β1的水平进行检测,与对照细胞相比,CAFs-CM处理组细胞的上清液中总TGF-β1水平显着升高。Western Blot结果显示,TGF-β1刺激处理组和CAFs-CM处理组的癌细胞中p-SMAD2和p-SMAD3蛋白质水平均显着升高,在TGF-β1抑制剂SB或PFD处理的细胞的中检测到p-SMAD2和p-SMAD3蛋白质水平显著降低,表明CAFs诱导TGF-β1/SMAD信号通路的活化。此外,在CAFs-CM联合SB和PFD处理的细胞中也检测到β-catenin、vimentin表达上升和E-cadherin表达下降。IF结果显示,TGF-β1刺激处理组和CAFs-CM处理组的癌细胞中观察到F-actin的重塑和极化,而在CAFs-CM联合SB或PFD处理后,应力纤维数目显著降低。另外,在CAFs-CM联合SB或PFD处理的肿瘤细胞中,CAFs对肿瘤细胞迁移和侵袭活性的促进作用显著削弱。这些结果表明TGF-β1是介导CAFs和乳腺癌细胞之间相互作用的关键分子。2.CAFs通过激活TGF-β1/SMAD通路刺激肿瘤细胞的侵袭型表型。同时lnc RNA在表观遗传学水平的调控对肿瘤细胞的发生发展同样起到重要作用。通过Real-time PCR检测肿瘤细胞中多种lnc RNA的m RNA水平,结果显示,与对照组细胞相比,CAFs-CM引起lnc RNA变化中HOTAIR的表达最高。进而对各处理组肿瘤细胞中HOTAIR的m RNA水平进行Real-time PCR检测,结果显示,与CAFs-CM处理组相似,TGF-β1刺激处理组也诱导HOTAIR表达水平的升高。然而,在CAFs-CM联合SB或PFD处理的肿瘤细胞中,CAFs对肿瘤细胞HOTAIR表达的促进作用显著削弱。FISH结果同样显示CAFs-CM联合SB或PFD削弱CAFs-CM诱导的HOTAIR的表达及转位入核。Western Blot结果显示,CAFs-CM处理组EZH2和H3K27me3蛋白质水平显著升高。此外,HOTAIR敲低细胞中观察到vimentin、β-catenin的下降和E-cadherin的上升。Transwell检测HOTAIR的敲降能够减少入侵细胞的数量。基于这些数据,我们证明CAFs通过TGF-β1激活癌细胞中的HOTAIR表达来实现转移功能。3.HOTAIR是TGF-β1/SMAD途径的转录靶标。已知TGF-β1组装激活Smads的受体复合物,Smads组装调节转录的多亚单位复合物。Real-time PCR显示用SMAD2,SMAD3,SMAD4 si RNA转染的细胞中HOTAIR m RNA显著减少。此外,免疫荧光图像表明在sh HOTAIR组中观察到降低的SMAD2/3核染色丧失。启动子分析表明HOTAIR启动子区域中的存在SMAD结合位点。Ch IP实验结果表明CAFs刺激SMAD2和SMAD3与HOTAIR启动子区的直接结合。根据这些结果,我们基于CAFs促进肿瘤转移的表观遗传机制的作用,我们阐明CAFs通过分泌TGF-β1转录激活肿瘤细胞中的HOTAIR异常表达。HOTAIR是SMAD2/3的转录靶标。4.CAFs通过靶向CDK5信号诱导EMT。我们之前的结果表明,通过激活CDK5激酶活性的形式引起肿瘤转移。与我们以前的研究一致,使用上海钰博生物科技有限公司重组TGF-β1或CAFs-CM处理的细胞中CDK5蛋白表达显着增加,而Egr-1和CDK5RAP1大大降低。此外,癌细胞中CDK5的敲低阻断CAFs或重组TGF-β1诱导的EMT。此外,sh HOTAIR治疗未能使CAFs介导的EMT在CDK5过表达的癌细胞中受到影响。通过Ch IP分析CDK5RAP1和Egr-1启动子上的组蛋白甲基化标记显示,与对照组细胞相比,CAFs-CM处理的MDA-MB-231和MCF-7细胞H3K27me3在上述两种基因的启动子上高度富集。同时HOTAIR的敲降削弱CAFs的执行功能,CDK5RAP1和Egr-1启动子的H3K27me3水平显着降低。此外,检测了EZH2对CDK5RAP1和Egr-1启动子的募集,结果表明CDK5RAP1和Egr-1启动子的PRC2成分水平显着降低。基于这些数据,我们验证了CDK5的激活是CAFs介导的EMT的重要的途径。CAFs通过H3K27三甲基化对CDK5RAP1和Egr-1的沉默进而促进激活CDK5表达。并且CAFs通过靶向CDK5信号传导HOTAIR表达诱导EMT。5.为了研究CAFs在体内诱导肿瘤生长和转移的表观遗传学机制,在裸鼠中进行MDA-MB-231原位肿瘤移植模型。每周监测生物发光成像,表明CAFs明显促进原发性肿瘤生长,而sh HOTAIR治疗诱导肿瘤体积显着降低。最重要的是,CAFs导致剧烈的肺转移,与对照细胞相比,发现了广泛的肿瘤灶,如通过定量生物发光图像所确定的。然而,当HOTAIR被敲降时,这种转移特征被减弱。H&E染色进一步证实了结果。与对照组比较,CAFs通过FISH显示,增强了HOTAIR的核染色,进一步证实了我们的体外研究。免疫组织化学染色显示,在sh HOTAIR组检测到核β-catenin的下调以及p-SMAD2,p-SMAD3,EZH2和H3K27me3阳性细胞的减少。综合来看,sh HOTAIR治疗有效地阻止了CAFs和肿瘤细胞之间的交流,从而削弱了CAFs诱导的EMT。总之,这些实验支持CAFs分泌TGF-β1在乳腺癌细胞中激活TGF-β1/SMAD途径,导致HOTAIR的转录上调和CDK5信号通路的组蛋白修饰,从而促进乳腺癌症进展和转移。6.为了进一步了解CAFs在乳腺癌临床相关中的作用,我们收集了59例乳腺癌及原位癌患者,并通过免疫组织化学法检测了CAFs的标志物FAP-α和α-SMA。我们发现与原位导管癌相比,侵袭性乳腺癌中FAP-α和α-SMA的表达水平显着上调,表明CAFs促进了乳腺癌患者的肿瘤转移。与原位导管癌相比,通过FISH图像显示,在转移性乳腺癌中观察到更高表达的HOTAIR和更多的细胞核染色,表明HOTAIR的上调与肿瘤转移密切相关。结论在这里,我们发现CAFs通过分泌细胞因子TGF-β1诱导CDK5RAP1/Egr-1基因启动子区域组蛋白3赖氨酸27位三甲基化进而激活CDK5信号通路,这与之前研究证明的CAFs促肿瘤转移特性相符。我们发现CAFs通过TGF-β1/SMAD信号激活癌细胞中长非编码RNA HOTAIR的表达和促进上皮间质转化(EMT)。并且CAFs引起的乳腺癌细胞HOTAIR的上调是其激活CDK5信号通路所必需的。CAFs通过分泌TGF-β1转录激活HOTAIR。HOTAIR的敲低能够削弱CAFs诱导的乳腺癌细胞侵袭性增强及裸鼠肺转移。HOTAIR和CDK5的表达在乳腺癌进展期间上调,并与淋巴结转移密切相关。此外,发现在FAP-α,CDK5和HOTAIR之间存在显著的相关性,进一步证实了我们的工作模型,CAFs分泌TGF-β1转录激活HOTAIR进而激活CDK5信号通路,从而行使促转移活性,使TGF-β1/SMAD/HOTAIR轴作为标靶用于乳腺癌治疗变为可能。在乳腺癌进展期间,CAFs提供适当的信号,可以形成癌细胞的侵袭性表型,建立一个复杂的环境,最终导致转移。显然,TGF-β1信号通路的过度活化有助于代谢重编程CAFs的激活。此外,TGF-β1已经与不良的临床结果相关联,并且是CAFs介导的有效转移起始所需的。与这些结果一致,我们的数据进一步认为,CAFs的关键促转移功能依赖于TGF-β1分泌。阻断TGF-β1分泌可以有效地消除CAFs的功能。在本研究中,我们证明CAFs通过诱导CDK5RAP1/Egr-1启动子中的组蛋白三甲基化促进细胞迁移和侵入,导致活性CDK5信号通路传导。并且这种修饰与EZH2,PRC2复合物的H3K27甲基转移酶催化亚基的功能密切相关。我们实验证明CAFs刺激HOTAIR表达,导致在CDK5RAP1和Egr-1启动子区域EZH2的募集和结合能力增强以及H3K27介导的三甲基化的大幅度增加,从而激活CDK5表达。此外,虽然我们的研究集中于TGF-β1,但CAFs可分泌另外的促转移因子如IL-6,IGF-II的混合物以促进癌症进展。因而,其他参与乳腺癌发展的关键Lnc RNA仍有待调查。可以想象,CAFs编排多个非编码RNA和信号通路以控制乳腺癌进展过程中的几个生物过程。我们的研究揭示CAFs诱导肿瘤生长和转移的新机制,发现TGF-β1/HOTAIR轴控制乳腺癌的发展和进展,并将这些分子作为乳腺癌治疗的目标。 还原关键词：癌相关成纤维细胞; TGF-β1; HOTAIR; CDK5; H3K27me3; 侵袭;导师：梅玫;分类号：R737.9

5-氮杂-2’-脱氧胞苷和顺铂通过去甲基化作用及增强凋亡酶激活因子1的活性协同诱导肾癌细胞凋亡的实验研究朱小军南方医科大学摘要：研究背景：肾细胞癌(RCC)在泌尿系肿瘤中较为常见,其发病率占肾恶性肿瘤的80-90%,仅次于膀胱尿路上皮癌。晚期肾癌临床治疗较为棘手。近年来在临床发病率逐年上升,其主要来源于肾实质泌尿小管上皮系统。约有25%-30%肾细胞癌患者在早期诊断时即存在局部浸润或远处转移。肾癌如早期发现无转移或转移较少,其存活率较高。肾癌对放、化疗敏感度较低,对于早期治疗,外科局部切除为首选。但对于晚期转移肾癌而言,在进行减瘤肾切除后,仍需要进行全身治疗,如靶向治疗和免疫治疗。肾癌具有多耐药性,所以化疗对肾癌疗效很差。肾癌的多耐药可能由于存在高浓度的多耐药基因MDR-1产物p糖蛋白,可以主动将化疗药物泵出癌细胞。有研究表明化疗结合免疫治疗能够达到良好的效果。近年来出现的分子靶向治疗药物为晚期肾癌患者的治疗,带来了新的希望。随着近年来对基因表观遗传学即不改变遗传的碱基序列只改变其修饰的深入研究,学术界认为表观遗传学中DNA甲基化对于肿瘤的发生发展起到重要的作用,肿瘤的产生与DNA甲基化紊乱和失衡相关,与正常细胞相比较,肿瘤细胞出现大范围的低甲基化和CpGs岛高甲基化并存,其中后者是引起肿瘤恶化和转移的关键因素。去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(DAC)可限制DNA甲基转移酶类,使DNA甲基化发生转换。因此DAC近年来被认为是对于多种恶性肿瘤均有很好疗效的药物(恶性骨髓瘤、肺癌、肝癌等),其疗效不但可以抑制原发灶浸润,更可以有效抑制肿瘤转移。而顺铂类化疗药物是细胞周期非特异性药物,主要抑制肿瘤细胞的DNA复制,抗癌范围广,但由于特异性差,所以单一用药疗效不佳,一般临床要联合用药,以提高其治疗效果。近年来有报道去甲基化化疗药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(DAC)联合顺铂类化疗药物可以提高后者的抑制肺癌的疗效,但其两者联合治疗的分子生物学机制及对其他癌细胞治疗效果尚不清楚。细胞的凋亡为细胞在基因调控下的程序性死亡,而肿瘤的的发生一般认为是细胞凋亡失衡,即促进细胞凋亡的基因减少,抑制凋亡的基因增量表达,凋亡酶激活因子1(APAF-1)是一种作用于半胱天冬酶活化过程的p53相关路径基因,在线粒体参与的凋亡途径中具有重要作用。通常认为诱导凋亡的基因p53通过诱导特异性细胞凋亡基因如APAF-1, Bax, PUMA, Noxa等的表达,来触发线粒体细胞凋亡途径。因此如果能从研究单纯DAC和单纯顺铂,及联合DAC和顺铂对肾细胞癌去甲基化的影响,及对细胞凋亡基因APAF-1表达的作用,就可以从体外细胞水平研究其两类抗癌药物的分子机制,并进一步发现两类药物对癌细胞凋亡的作用机制,并为其他药物治疗肾细胞癌提供新的抗癌靶点。本课题的研究思路是：通过体外从mRNA和蛋白水平研究去甲基化剂DAC对人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞去甲基化程度的影响,并比较去甲基化剂DAC与顺铂类(CDDP)单独或联合用药,不同药物浓度对人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞去甲基化的影响,为去甲基化剂DAC与CDDP联合用药治疗肾细胞癌提供分子机制基础。我们并进一步通过研究去甲基化剂DAC与CDDP单独或联合用药,不同药物浓度对人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞凋亡酶激活因子1(APAF-1)影响,并从通过抑制APAF-1的表达来降低半胱天冬酶9和半胱天冬酶3的活性,研究AC N细胞中去甲基化剂DAC与CDDP协同诱导的凋亡的过程,为探索肾癌细胞的抗凋亡途径及治疗提供指导,本次研究可应用于后续试验,对提高肾细胞癌的的治疗疗效,提高患者预后生存质量具有重要的意义。第一部分：5-氮杂-2’-脱氧胞苷和顺铂在肾癌细胞中去甲基化作用机制研究1.目的：研究去甲基化剂DAC对人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞去甲基化程度的影响,并比较去甲基化剂DAC与CDDP单独或联合用药,不同药物浓度对人类肾癌细胞系A CHN和Caki两类细胞去甲基化的影响,为去甲基化剂DAC与CDDP联合用药治疗肾细胞癌提供分子机制基础,并进一步验证去甲基化剂DAC与CDDP联合用药对肾癌细胞的剂量依赖性,为进一步动物和临床药理学实验提供参考。2.方法：用不同浓度的DAC与CDDP单独或联合培养人类肾癌细胞系ACHN和Caki。用甲基化特异性PCR法测定不同方法培养的肾癌细胞系ACHN和Caki甲基化水平。进行MTT细胞活性检测和细胞凋亡检测。对结果利用SPSS13.0软件进行统计学处理,实验结果用双尾t检验检验。3.结果：1).DAC与AC N和Caki细胞培养,降低了ACHN和Caki细胞DNA甲基化水平。2).DAC与CDDP的协同作用降低了肾癌细胞的活性。3).DAC与CDDP的浓度与肾癌细胞的活性相关联。第二部分：5-氮杂-2’-脱氧胞苷和顺铂在肾癌细胞中通过增强凋亡酶激活因子1的活性协同诱导细胞凋亡机制的研究1.目的 希望通过体外从mRNA和蛋白水平研究去甲基化剂DAC人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞APAF-1甲基化程度的影响,并比较去甲基化剂DAC与CDDP单独或联合用药,不同药物浓度对人类肾癌细胞系ACHN和Caki两类细胞对APAF-1的影响,为去甲基化剂DAC与CDDP联合用药治疗肾细胞癌提供分子机制基础。2.方法：1)用不同浓度的DAC与CDDP单独或联合用药培养人类肾癌细胞系ACHN和Caki,利用甲基化特异性PCR及实时反转录PCR测量甲基化CPG及APAF-1 mRNA的整体甲基化水平。2)用不同浓度的DAC与CDDP单独或联合用药培养人类肾癌细胞系ACHN和Caki,使用上海钰博生物科技有限公司免疫蛋白印迹测量APAF-1蛋白水平。3)用不同浓度的DAC与CDDP单独或联合用药培养人类肾癌细胞系ACHN和Caki,检测两类细胞的活性,并比较其对两类细胞生长影响的差异。4)用不同浓度剂量的DAC与CDDP单独或联合用药培养人类肾癌细胞系ACHN和Caki,检测两类细胞的的凋亡率,并比较其对两类细凋亡影响的差异。5)用不同浓度的DAC与CDDP单独或联合用药与沉默APAF-1表达的人类肾癌细胞系ACHN进行培养,利用LEHDase分析和DEADase分析细胞中半胱天冬酶9和半胱天冬酶3的活性,并检测细胞凋亡,分析APAF-1在甲基化剂DCA与CDDP治疗肾细胞癌的作用机制。全部数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析,多组间不同组别间差异比较采用方差分析,两组间比较采用双尾t检验,显著性水平设定为0.05,当P值小于0.05,差异具有统计学意义。结果(1)在Caki和ACHN细胞中,DAC处理降低了DNA甲基化水平,提高了APAF-1的表达水平.(2)在肾癌ACHN和Caki细胞中DAC和CDDP的协同作用诱导有效的细胞凋亡。(3)抑制APAF-1的表达阻滞了ACHN细胞中由DAC和CDDP协同诱导的细胞凋亡。结论(1)我们成功培养了人类肾癌细胞系ACHN和Caki,并沉默ACHN细胞中APAF-1表达(对APAF-1特异的siRNA转染ACHN细胞)。(2)在Caki和ACHN细胞中,DAC处理降低了DNA甲基化水平,提高了APAF-1的表达水平。(3)DAC和CDDP的协同作用降低了肾癌细胞的活性。(4)肾癌ACHN和Caki细胞中DAC和CDDP的协同作用诱导有效的细胞凋亡。(5)抑制APAF-1的表达阻滞了ACHN细胞中由DAC和CDDP协同诱导的细胞凋亡。 还原关键词：5-氮杂-2’-脱氧胞苷; 顺铂; 细胞凋亡; 肾癌细胞; 凋亡酶激活因子1活性;导师：谭万龙;分类号：R737.11

“黑胶虫”清除完全培养基（RPMI-1640，含10%FBS）产品概述“黑胶虫”及其分解复合物是一种常见的细胞污染物，与细胞共生，随细胞传代而传代，通常抗生素对其无效。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，对细胞生长不利，严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。“黑胶虫”污染的细胞常见的特征有以下几点：（1）培养液不浑浊，但在显微镜下观察细胞时，细胞周围和培养液中有很多“小黑点”，且随着细培养时间的延长“小黑点”逐渐增多，更换培养液或洗涤细胞不能将其去除；（2）“小黑点”污染的细胞，营养消耗快，需要频繁更换培养液；（3）“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，空泡化严重，甚至还可能导致细胞形态的改变。“黑胶虫”清除完全培养基是本公司开发的新一代产品，含有血清、双抗和清除“黑胶虫”的特殊成分，可以直接用于细胞培养，方便快捷。本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，对细胞无害，对清除“黑胶虫”污染效果显著，能够很好的杀灭和抑制“黑胶虫”。产品信息形态液体浓度1×规格100mLPH7.2～7.4成分RPMI-1640+10% FBS+1% P/S+“黑胶虫”清除剂细菌检查阴性真菌检查阴性支原体检查阴性内毒素含量   (EU/mL)≤10储存条件2℃～8℃，避光运输条件低温有效期3个月产品使用方法1、根据所培养细胞的特性，选择相应的“黑胶虫”清除完全培养基。2、将50～100万个细胞铺到60 mm的细胞培养皿内，加入4 ml“黑胶虫”清除完全培养基孵育细胞，（也可以与细胞正常培养方法相同，直接将“黑胶虫”清除完全培养加入到培养器皿中孵育细胞）。3、次日更换新鲜的“黑胶虫”清除完全培养基，并更换新的培养器皿；之后每2～3天更换1次培养液，换液时用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞1～2次；期间如果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要用胰酶消化）。4、使用“黑胶虫”清除培养基3天之后即可见清除效果，连续使用12～14天即可将“黑胶虫”清除，若“黑胶虫”污染较为严重，可延长处理3～5天。5、因环境中可能依然存在污染源，为避免细胞再次受到“黑胶虫”的污染，建议您在“黑胶虫”清除以后继续使用“黑胶虫”清除培养基，以达到预防的效果。注意事项1、本产品为无菌产品，使用时应注意无菌操作，避免污染；2、为保持本产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中；3、本产品仅供研究或进一步生产使用，不用于诊断或治疗。

人脐带间充质干细胞产品概述间充质干细胞无血清培养基 由技术团队精心优化的人间充质干细胞无血清培养基，经筛选配比的无血清添加物及其他辅助成分。该产品适用于人间质干细胞无血清条件的培养；可维持人间质干细胞良好的增殖速率，并保持良好的分化能力。实验数据：1.使用我司的间充质干细胞无血清培养基培养间充质干细胞，细胞表型如何？用流式细胞仪检测细胞表面抗原：cd19(0.35%)、cd34(1.23%)、cd45(1.08%)呈阴性表达；cd90(99.94%)、cd105(97.02%)呈阳性表达。2.通过脐带组织贴块法分离间充质干细胞需要几天？7-10天，可见细胞爬出；第14天，细胞可传代；之后，每2-3天细胞可传代一次。【产品用途与描述】间充质干细胞无血清培养基可用于多种来源的人类间充质干细胞的原代细胞分离及细胞传代培养，同时还能保持其多向分化的潜能，如人骨髓间充质干细胞（bm-hmsc)、人脂肪间充质干细胞（at-hmsc）、人脐带间充质干细胞（ucm-hmsc）等。使用本产品无需添加血清或血清替代物。间充质干细胞无血清培养基化学成分明确、无血清、无动物源成分。产品批间差异小，非常适用于培养哺乳类干细胞，包括脐带干细胞，骨髓干细胞，脂肪干细胞等间充质干细胞。产品严格无菌，无病毒和支原体，性能稳定，使用该培养基能使干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化（10代以内）。 【产品特点】1、可维持人类间充质干细胞良好的增值速率；2、保持良好的分化能力；3、经过微生物检测（细菌、真菌、霉菌及支原体）、ph检测、渗透压和内毒素检测；4、不含任何动物源的蛋白成分。 【产品规格与保存】产品名称包装规格保存条件保存期限间充质干细胞无血清基础培养基500ml/瓶2-8℃，避光保存12个月间充质干细胞无血清生长添加剂(mscgs)25ml/瓶-20℃，避光保存24个月庆大霉素-链霉素溶液(gen-strep)5ml/瓶-20℃，避光保存12个月 【产品稳定性】1、所有的产品都需要避光保存；2、所有产品一旦超过标签注释的有效期，必须放弃使用；3、配制成完全培养基后，避光保存在2-8℃可存放3-4周；4、为了更好的使用效果，请勿对试剂进行反复冻融。 【产品主要成份】间充质干细胞无血清培养基的主要组成成分：氨基酸，维生素、无机盐、白蛋白，转铁蛋白、胰岛素、微量元素等。【产品使用方法】1、间充质干细胞完全培养基准备将间充质干细胞无血清生长添加剂(mscgs)在2-8℃过夜融化，按1:20比例加入基础培养基中，即成为间充质干细胞完全培养基。温馨提示：间充质干细胞完全培养基2-8℃避光条件下，可保存30天。若小量、多次使用，建议您将间充质干细胞无血清生长添加剂(mscgs)分装后，保存于-20℃冰箱，可避免培养基不必要的浪费。 2、间充质干细胞复苏（以t-75瓶为例）①从冰箱中取出完全培养基，在生物安全柜或超净台中吸取适量（如t-75瓶：10-15ml)完全培养基沿上表面加入间充质干细胞培养瓶中，切勿冲到细胞培养瓶底面，即：细胞生长面。然后慢慢将细胞培养瓶平放，在37℃、恒温co2培养箱中放置5-10分钟后使用。温馨提示：请严格按照此步骤操作，否则可能会出现细胞培养瓶中细胞生长空白区域，即所谓的“生长空洞”。多数用户使用的不是专用的预包被细胞培养瓶，而是普通的细胞培养瓶或培养皿，其表面环境并不利于无血清培养环境下的间充质干细胞贴壁。37℃放置5-10分钟，可让培养基中的促贴壁物质更好地与细胞培养瓶底部结合，使得间充质干细胞的贴壁能力增强，降低“生长空洞”出现的概率。②从液氮中取出冻存的间充质干细胞，迅速将冻存管放入37℃水浴中，快速融解。温馨提示：尽可能避免水没过管帽，以减少污染的风险；要快速完成细胞复苏过程（尽量控制在1分钟内），融化过程时间过长，会造成复苏后细胞活性较差。③用70%-75%酒精消毒冻存管外壁，在生物安全柜或超净台中打开冻存管，用吸管/移液器将细胞冻存悬液缓慢移入装有5-10ml细胞完全培养基的15ml离心管中（在这一过程请尽可能避免产生气泡）。温馨提示：为了减少细胞损失，往细胞冻存管中加入1ml完全培养基，稍微吹打，用吸管/移液器将这1ml的细胞悬液吸入离心管中，再用吸管/移液器将离心管中的细胞轻轻吹打混匀。④1200rpm离心5min，弃上清，加入2ml完全培养基重悬细胞，台盼蓝染色计数，按密度2×104cells/cm2将细胞接种至步骤①中孵育完的细胞培养瓶中，添加细胞时，将细胞培养瓶竖立，细胞悬液直接加到底部，切忌冲到细胞培养瓶底面。⑤轻轻摇晃细胞培养器皿，使细胞均匀分布，混匀后，置于37℃、5%co2、饱和湿度的培养箱中静置培养。⑥24h后，更换新鲜的完全培养基（温育至37℃）。 3、间充质干细胞传代（以t-75瓶为例）①在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到80-90%，即可传代。温馨提示：细胞融合度请勿超过90%。很多传代后的细胞大比例死亡，是由于传代前细胞生长过密（融合度过高），导致细胞消化异常（细胞整片或成片脱落），加之随后的不当操作（如用移液器反复吹打成片细胞使其成为单个细胞），此机械损失过程会严重损害细胞膜，引发大比例的细胞死亡；间充质干细胞经冻存后再次使用时，尤为明显。②预处理细胞培养瓶，处理方法同细胞复苏中的步骤①。③在生物安全柜或超净台中，弃去细胞培养瓶中的培养液，加入5-10ml pbs清洗细胞后弃去，再加入2ml 0.05%胰酶-edta消化细胞。④在显微镜下观察到细胞变圆时，立即加入5ml胰酶抑制剂终止消化。⑤用移液器轻轻吹打瓶壁上还未完全脱离的细胞，并轻轻吹打混匀，使细胞完全分散。⑥将细胞悬液转移至15ml离心管中，1200rpm离心5min。弃上清，加入2ml细胞完全培养基重悬细胞，台盼蓝染色计数，按细胞密度2×104cells/cm2，将细胞接种至细胞传代②步骤中孵育完的细胞培养瓶中，添加细胞时，将细胞培养瓶竖立，细胞悬液直接加到底部，切忌冲到细胞培养瓶底面。⑦轻轻摇晃细胞培养器皿，使细胞均匀分布，混匀后，置于37℃、5%co2、饱和湿度的培养箱中静置培养。 4、间充质干细胞冻存①用0.05%胰酶-edta消化待冻存的细胞，加入胰酶抑制剂终止消化并离心，重悬后进行细胞计数。②1200rpm离心5min，弃上清。③根据细胞计数情况，缓慢加入适量冷的无血清冻存液（无血清冻存液可即拿即用或置于冰袋备用），调整细胞密度在1×106cells/ml左右。④轻轻地重悬细胞，将重悬均匀的细胞按等份加入到灭菌的冻存管中（需提前做好标记），旋紧冻存管盖。⑤迅速将冻存管放入程序降温盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃冰箱。⑥过夜放置后，将细胞从-80℃冰箱转移至液氮罐中长期保存。客户问答：1.之前一直使用dmem/f12+胎牛血清养的间充质干细胞，可以直接转到钰博的间充质干细胞无血清培养基中吗？含血清培养基培养的细胞转入无血清培养基中后可正常生长，但是无血清培养基培养的细胞一般要比含血清培养基培养的细胞偏瘦。2.之前一直用含dmem/f12(含bsa)+血清替代物养的间充质干细胞，可以直接转到钰博的间充质干细胞无血清培养基中吗？含血清替代物培养基培养的细胞转入无血清培养基中后可正常生长，无血清培养基培养的细胞与含血清替代物培养基培养的细胞相似。

                                              细胞str鉴定简介细胞str鉴定应用于生物医学研究领域的哺乳动物细胞被错误鉴定和交叉污染的问题，一直是一个普遍存在的突出问题。据统计，国外实验室有20%左右的细胞株被错误鉴定和交叉污染，nih和atcc近两年都对此发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。近年来，大量研究表明str基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一，str基因分型应用于细胞鉴定已被atcc等机构强烈推荐。美国的atcc细胞库、德国的dsmz细胞库以及日本的jcrb细胞库等为str分型提供了各细胞株的数据供比对。str（short tandem repeat，短串联重复序列）基因位点由长度为3-7个碱基对的短串连重复序列组成，这些重复序列广泛存在于人类基因组中，可作为高度多态性标记，被称为细胞的dna指纹，其可通过pcr（聚合酶链式反应）来检测。str基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分，在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法，即可根据所得的str分型结果与专业的细胞str数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。细胞系错误鉴定所造成的后果：★ 细胞系的损失；★ 时间和金钱的损失；★ 在公众领域（文献、专利等）提供错误信息；★ 造成实验结果不一致或不可重复；★ ……何时需做细胞str鉴定？1、发表文章或申请课题经费前；2、使用细胞进行临床治疗（试验）前；3、准备冻存保种或已冻存多年的细胞；4、一个涉及到细胞试验项目开始/结束时；5、新得到的细胞或实验室传5代以上的细胞；6、细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大。人源细胞str位点信息：为进一步提高鉴定的分辨率，除了包含atcc检测的8个str和1个性别决定位点amelogenin外，另新增了12个高度多态性位点，共检测21个str位点。

ELISA试剂盒实践与采选详细一、ELISA规范曲线弱的原因它们对于蛋白(抗原)的吸附才能是不同的。ELISA发生在固相表面，需求其有较强的吸附蛋白的才能，而培育细胞的96孔板，尤其是用于培育粘附细胞的板子，都是通过特别处理的，不能混用。如果换了板子标曲仍是欠好，就要考虑封闭过程，规范样品和酶连二抗的问题了。二、论试剂盒质料的重要性首要影响免疫测定技能的根底在于抗原抗体之间的特异结合反响，所以任何优质的诊断试剂离不开优质的质料，曾经用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原，而抗体则为纯化抗原免疫动物后取得的多克隆抗体和运用杂交瘤技能得到的单克隆抗体，而抗原或抗体的符号物如酶标结合物则通过各种化学合成办法制备。随着商场的快速老练，现在中国对于酶联免疫吸附剖析办法研究上的技能现已十分老练，现在由国内自主研制的试剂盒和国外的试剂盒在质量能够相等，做出来的数据现已达到相同的技能指标。 三、对试剂盒的供货商挑选，千万不要盲目跟风现在国内的试剂盒供货商不在少数，我们也不能盲目跟风挑选。能够多听听身边人的主张。其实现在国产试剂盒技能现已很老练了，甚至都快超越国外的那些试剂盒了技能水平。其实也需求我们功用尽力，确保国内产品也能够得到快速的发展。

ELISA试剂盒实验预备温育知识在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶联络物后。抗原抗体反应的结束需求有必定的温度和时间，这一保温进程称为温育(incubation)，有人称之为孵育，在ELISA 中似不恰当。ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的联络只在固相表面上发生。elisa试剂盒以抗体包被的夹心法为例，参与板孔中的标本，其间的抗原并不是都有平等的和固相抗联络的机遇，只要最靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的进程，因此需经涣散才华抵达反应的结尾。在其后参与的酶符号抗体与固相抗原的联络也相同如此。这便是为何ELISA反应老是需求必定时间的温育。ELISA试剂盒温育常选用的温度有 43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体联络的适合温度。在树立ELISA方法作反应动力学研讨时，实验标明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时，产品的生成可达高峰。为加速反应，可前进反应的温度，有些实验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中，以构成最多的沉积。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予选用。elisa试剂盒保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均选用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA 板底应贴着水面，使温度敏捷平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA 板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性出色的资料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最终将ELISA 板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规矩的温度，特别是在气温较低的时分更应如此。无论是水浴仍是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能敏捷平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严峻束缚在规矩的范围内，规范室温温度是指 20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA 板只需平置于操作台上即可。应留心温育的温度和时间应按规矩力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板一同测定。一个出色的实验操作环境可以保证ELISA试剂盒测定效果更准确。实验操作的严谨性与实验操作规范密不可分，未运用的试剂应储存于2-8℃，运用时应回温到室温（20-25℃）。切忌不一样批次的试剂混合运用，要常常检查酶标仪和微量移液器的精度盒准备度，这么才华保证实验的可操作性。

如何防止沉积的发作和解析血清的质量标准按如下操作可防止沉积的发作：（1）冻结血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉积的发作。（2）血清分装冻存时，须规矩摇晃均匀（当心勿形成气泡），使温度与成分均一。（3）勿直接由-20℃直接至37℃冻结，因温度改动太大，简单形成蛋白质凝聚而发作沉积。（4）勿将血清置于37℃太久，不然血清会变得污浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，然后影响血清的质量。（5）血清的热灭活十分简单形成沉积物的增多，若非必要，能够无须做此步骤。（6）若有必要做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，而且随时摇晃均匀。温度过高，时刻过久或摇晃不均匀，都会形成沉积物的增多。解析血清的质量标准：1.牛血清有必要来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具有恰当的监测体系。2.证明所用牛血清中不含对所出产疫苗病毒的按捺物。3.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。4.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。5.对细胞有杰出的支撑繁衍效果。6.血清要经过滤膜过滤除菌，确保无菌。 

ELISA试剂盒检测中的加样步聚ELISA试剂盒优质的试剂，出色的仪器和正确的操作是保证ELISA试剂盒检测效果准确可靠的必要条件。ELISA试剂盒检测的操作因固相载体的构成不同而有所差异，国内医学查验一般均用板式点。本文将叙说板式ELISA各个操作进程的留心要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特别仪器协作运用，严厉遵从规矩操作，必能得出准确的效果。可用作测定的标本非常广泛，体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液)，有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均对等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝结、缩短后即可获得。除特别状况外，在医学查验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可对等运用。在ELISA试剂盒检测中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留心不可溅起，不可发生气泡。加标本一般用微量加样器，按规矩的量参与板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清，可在试管中按规矩的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中参与稀释液，再在其参与血清标本，然后在微型轰动器上轰动1分钟以保证混和。加酶结合物运用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液进程灵敏结束。

ELISA中最要害的试剂---结合物结合物即酶符号的抗体（或抗原），是ELISA中最要害的试剂。杰出的结合物应该是既保有酶的催化活性，也坚持了抗体（或抗原）的免疫活性。结合物中酶与抗体（或抗原）之间有恰当的分子份额，在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的（未结合的）酶或游离的抗体（或抗原）。此外，结合物尚要有杰出的安稳性。抗原和抗体制备结合物时所用抗体一般 均为纯度较高的IgG，以免在与酶联合时其他杂蛋白的搅扰。最好用亲和层析纯的抗体，这样悉数酶结合物均具有特异的免疫活性，能够在高稀释度进行反响，实验成果本底浅淡。如用F（ab）2进行符号，则更可防止标本中RF的搅扰。在ELISA中用酶标抗原的模式不多，总的要求是抗原有必要是高纯度的。结合物的稀释液用于稀释高浓度的结合物以配成工作液。为防止结合物在反响中直接吸附在固相载体上，在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质（例如1%牛血清白蛋白），经过竞赛以按捺结合物的吸附。一般还加入具有按捺蛋白质吸附于塑料外表的非离子型外表活性剂，如吐温20，0.05%的浓度较为适合。在直接测定抗体时，血清标本需稀释后进行测定，也可应用这种稀释液。 酶用于ELISA的酶应契合以下要求：纯度高，催化反响的转化率高，专一性强，性质安稳，来历丰厚，价格不贵，制备成酶结合物后仍持续保留它的活性部分和催化才能。最好在受检标本中不存在相同的酶。别的，它的相应底物易于制备和保存，价格低廉，有色产品易于测定等。