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BV2;小鼠小胶质细胞生长特性

弘顺生物

2015/10/29 10:48

阅读:38

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细胞名:BV2;小鼠小胶质细胞生长特性

细胞别名:BV2细胞;小鼠小胶质细胞 小鼠小胶质细胞;BV2细胞

生物安全水平:1

培养基&血清:见培养条件

细胞接收后的操作流程与注意事项:

1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决

2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养

3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)

1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,BV2;小鼠小胶质细胞生长特性通常控制在1-2min)

2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散

3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养

4、注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存

特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)

1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)

2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养

3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室

相关细胞资料:

生长特性:悬浮

致癌性:否

培养条件:GIBCO(1640+10%胎牛血清)

培养环境:95%空气;5%二氧化碳(CO2)

温度:37.0℃

保存:冻存血清:95%完全培养基;5%二甲基亚砜(DMSO)

储存温度:液氮

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