革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒

D1130-10革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒 国产 10T 盒

产品简介：本试剂盒先用溶菌酶处理，再用碱裂解法裂解细胞，通过吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的特性提取质粒DNA。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。从50-100ml培养液中，可快速提取200-300μg纯净地高拷贝质粒DNA，提取率达85-90％。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学试验，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。

产品包装：

革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒试剂盒组成 D1130-10T

RNase A 1ml

溶菌酶 10ml

溶液Ⅰ 60ml

溶液Ⅱ 60ml

溶液Ⅲ 80ml

漂洗液 15ml×2

洗脱液 30ml

吸附柱 10个

收集管 20个

说明书 1份

革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒注意事项：

1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。

2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙  醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。

3、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。 

4、洗脱缓冲液体积不应少于500ul，体积过小影响回收效率；洗脱液的pH 值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其 pH值在8.0左右( 可用NaOH 将水的pH值调至此范围) ，pH值低于7.0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20 ℃，以防DNA降解。 

5、如果所提质粒为低拷贝质粒或大于 10kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用400-800ml培养物，同时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。 

6、革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒DNA浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。得到的DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰， OD260 值为1 相当于大约50 μg/ml 双链DNA、40 μg/ml 单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9 ，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。