大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体,TPO-AbELISA

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测试剂盒检测原理

　　ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗体，这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。 

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ELISA实验操作注意事项：

大部分实验室在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后操作必须规范：

A. 使用移液器加液，移液枪头不能混用。

B. 洗板要干净，避免交叉污染。

C. 严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。

D. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。

E. 不要在测量过程中关闭电源。

F. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。

G. 使用后盖好防尘罩。

H. 出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。

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