罗伊氏乳杆菌

罗伊氏乳杆菌操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，罗伊氏乳杆菌此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：罗伊氏乳杆菌取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 罗伊氏乳杆菌 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。罗伊氏乳杆菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。 

XY1091 人肺巨细胞癌(PG）的高转移亚系 PG-BE1细胞

XY1092 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 PG-LH7细胞

XY1093 人肺巨细胞癌 PG细胞

XY1094 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞

XY1095 人肺成纤维样细胞,HLF细胞

XY1096 人肺成纤维细胞,HFL1细胞

XY1097 人肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞

XY1098 人肺癌亚历山大细胞系 PLC/PRF/5细胞

XY1099 人肺癌细胞株 MSTO-211H细胞

XY1100 人肺癌细胞系（未分化）Calu-6细胞

XY1101 人肺癌细胞系 Tul-1细胞

XY1102 人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292细胞

XY1103 人肺癌细胞,PC9细胞

XY1104 人肺癌细胞,PC9-EGFP-puro细胞

XY1105 人肺癌细胞,PC14细胞

XY1106 人肺癌细胞,NCI-H1975细胞

XY1107 人肺癌细胞,LECPα-1细胞,

XY1108 人肺癌细胞,Human A549细胞

XY1109 人肺癌细胞,H125细胞

XY1110 人肺癌细胞,Calu-1细胞

XY1111 人肺癌细胞,A549细胞

XY1112 人肺癌细胞,A549-EGFP-puro细胞

XY1113 人肺癌细胞,A-427细胞

XY1114 人肺癌细胞,973细胞

XY1115 人肥大细胞白血病细胞,CHMAS细胞

XY1116 人非雄激素依赖型前列腺癌细胞,Tsu-Pr1细胞

XY1117 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H2087细胞

XY1118 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H1975细胞

XY1119 人非小细胞肺腺癌细胞,NCI-H157细胞

XY1120 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H838细胞

XY1121 人非小细胞肺癌细胞,NCI-H23细胞

XY1122 人非小细胞肺癌细胞,NCIH1650-M3细胞

XY1123 人非小细胞肺癌细胞,NCIH1299细胞

XY1124 人非小细胞肺癌细胞,HCC827细胞

XY1125 人非小细胞肺癌细胞,H322细胞