多形拟杆菌

多形拟杆菌操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，多形拟杆菌此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：多形拟杆菌取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 多形拟杆菌 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。多形拟杆菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY1267 胚肺细胞,WI-38细胞

XY1268 胚肺细胞,MRC-5细胞

XY1269 胚肺成纤维细胞,HFL-I(MEMα)细胞

XY1270 泡盛曲霉

XY1271 诺尔斯氏链霉菌

XY1272 牛肾细胞,MDBK (NBL-1)细胞,

XY1273 牛胚气管细胞,EBTr (NBL-4)细胞,

XY1274 酿酒酵母

XY1275 逆转录病毒包装用的鼠胚胎成纤维细胞,PA317细胞

XY1276 脑神经瘤细胞,Neuro-2A细胞

XY1277 脑胶质瘤 SHG-44细胞,

XY1278 耐放射异常球菌

XY1279 耐长春新碱结肠癌细胞系 HCT-8/VCR细胞

XY1280 耐DDP肺癌细胞,A549/DDP细胞

XY1281 莫格球拟酵母

XY1282 灭酵母

XY1283 米曲霉

XY1284 玫瑰褐链霉菌

XY1285 毛霉

XY1286 猫肾细胞,F81细胞

XY1287 猫肾细胞,CRFK细胞,

XY1288 盲肠腺癌细胞(未分化) Hce-8693细胞

XY1289 慢性髓原白血病细胞,K-562细胞

XY1290 马克斯克鲁维酵母

XY1291 马-达二氏犬肾细胞系 MDCK (NBL-2)细胞

XY1292 罗伊氏乳杆菌

XY1293 罗猴胎肾细胞,MA104细胞

XY1294 卵巢细胞,Lec1细胞

XY1295 卵巢透明细胞癌细胞,ES-2细胞

XY1296 卵巢癌细胞,SK-OV-3细胞

XY1297 卵巢癌细胞,NIH:OVCAR-3细胞

XY1298 卵巢癌 HO8910细胞

XY1299 绿针假单胞菌

XY1300 绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞,U14-GFP细胞

XY1301 绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞,MFC-GFP细胞

XY1302 绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞,MGC803-GFP细胞

XY1303 绿色木霉

XY1304 绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)

XY1305 绿猴肾细胞,Vero细胞