迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌

迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY1193 人膀胱癌细胞,5637细胞,

XY1194 人膀胱癌细胞,5637（HTB-9）细胞

XY1195 人瘢痕疙瘩成纤维细胞,HKF细胞,

XY1196 人白血病细胞,U937细胞

XY1197 人白血病细胞,SK细胞

XY1198 人白血病细胞,KG-1细胞

XY1199 人白血病细胞,HL-60细胞

XY1200 人白血病细胞,Daudi细胞

XY1201 人白血病阿霉素耐药株 K562/Adr细胞

XY1202 人白血病阿霉素耐药株 HL-60/Ad细胞

XY1203 人XG恶性胶质瘤细胞,SF-295细胞

XY1204 人T细胞淋巴瘤 Hurt-78细胞

XY1205 人T细胞淋巴瘤 Hat-78细胞

XY1206 人T细胞白血病细胞,T-CEM细胞

XY1207 人T细胞白血病细胞,HuT 78细胞

XY1208 人T细胞白血病细胞,A3细胞

XY1209 人T细胞白血病细胞,6T-CEM细胞,

XY1210 人T淋巴细胞系 H9细胞

XY1211 人T淋巴细胞白血病细胞,Jurkat, Clone E6-1细胞

XY1212 人T淋巴细胞白血病细胞,Hut78细胞

XY1213 人T淋巴细胞白血病细胞,A3细胞

XY1214 人T淋巴细胞白血病,CD8+ Molt-4细胞

XY1215 人T淋巴瘤转基因细胞,Jurkat D,E细胞

XY1216 人T淋巴瘤细胞系 Hut-102细胞

XY1217 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系 Jurkat77细胞

XY1218 人SV40转染成骨细胞,hFOB 1.19细胞

XY1219 人SV－40转化肺成纤维细胞, WI－38AV13细胞

XY1220 人Ph+急淋白血病细胞系 SUP-B15细胞,

XY1221 人LOVO结肠癌细胞,LOVO细胞

XY1222 人Hela细胞耐药亚株(Hela/DDP) Hela细胞

XY1223 人EB病毒转化的B细胞,CGM1细胞

XY1224 人EBV阳性B淋巴瘤细胞,P3HR1细胞

XY1225 人B细胞淋巴瘤细胞系 BJAB细胞

XY1226 人B淋巴细胞瘤细胞,Romas细胞

XY1227 人B淋巴细胞瘤细胞,RAMOS(RA.1)细胞

XY1228 人B淋巴细胞急性白血病细胞,BALL-1细胞