长双歧杆菌

长双歧杆菌操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，长双歧杆菌此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：长双歧杆菌取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 长双歧杆菌 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。长双歧杆菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY0834 人卵巢癌细胞,HO-8910细胞

XY0835 人卵巢癌细胞,EFO-27细胞

XY0836 人卵巢癌细胞,EFO-21细胞

XY0837 人卵巢癌细胞,COV644细胞

XY0838 人卵巢癌细胞,COV504细胞

XY0839 人卵巢癌细胞,COV434细胞

XY0840 人卵巢癌细胞,COV362细胞

XY0841 人卵巢癌细胞,COLO720E细胞

XY0842 人卵巢癌细胞,COLO-704细胞

XY0843 人卵巢癌细胞,COC1细胞

XY0844 人卵巢癌细胞,CaOV3细胞

XY0845 人卵巢癌细胞,A2780细胞

XY0846 人卵巢癌细胞,8910PM细胞

XY0847 人卵巢癌细胞,3AO细胞

XY0848 人卵巢癌顺铂耐药株 COC1/CDDP细胞

XY0849 人卵巢癌 C200细胞,

XY0850 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD6细胞

XY0851 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD4细胞

XY0852 人淋巴细胞瘤细胞,JK(Jurkat)细胞

XY0853 人淋巴母细胞,T2(174×CEM.T2)细胞

XY0854 人淋巴瘤细胞,CA46细胞

XY0855 人类胚胎肾脏表皮细胞,H293T细胞

XY0856 人口腔上皮癌细胞,KB细胞

XY0857 人口腔上皮癌长春新碱耐药株 KB/V细胞

XY0858 人口腔表皮样癌细胞,KB细胞,

XY0859 人口腔表皮样癌 KB细胞

XY0860 人口腔癌细胞,HB细胞

XY0861 人巨细胞性肺癌细胞,801-D细胞

XY0862 人巨细胞白血病细胞株 Mo7e细胞

XY0863 人巨核细胞保白血病细胞,Dami细胞

XY0864 人晶状体上皮细胞,HLEC细胞,

XY0865 人经典小细胞肺癌细胞,NCI-h1688细胞

XY0866 人结直肠腺癌细胞,SW620细胞