福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)

福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri) 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY0168 小鼠胚胎成纤维细胞,T6-Swiss albino细胞

XY0169 小鼠胚胎成纤维细胞,SK-MEL-1细胞

XY0170 小鼠胚胎成纤维细胞,Psi2 DAP细胞

XY0171 小鼠胚胎成纤维细胞,PA12细胞

XY0172 小鼠胚胎成纤维细胞,NIH3T3细胞

XY0173 小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞

XY0174 小鼠胚胎成纤维细胞,MC3T3-L1细胞

XY0175 小鼠胚胎成纤维细胞,C3H/10T1/2细胞

XY0176 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3clone A31细胞

XY0177 小鼠胚胎成纤维细胞,3T6-Swiss albino细胞

XY0178 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3-L1细胞,

XY0179 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3 clone A31细胞

XY0180 小鼠胚胎成纤维细胞,10T1细胞

XY0181 小鼠胚成纤维包装细胞,ψ2细胞

XY0182 小鼠胚成纤维包装细胞,PA317细胞

XY0183 小鼠逆转录病毒包装株 PT-67细胞

XY0184 小鼠脑微血管内皮细胞株 BEND.3细胞

XY0185 小鼠脑微血管内皮细胞,Bend3细胞

XY0186 小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a细胞

XY0187 小鼠脑瘤细胞,BC3H1细胞

XY0188 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 MC3T3-E1细胞,

XY0189 小鼠淋巴样瘤细胞,P388D1细胞,

XY0190 小鼠淋巴样瘤 P388细胞,

XY0191 小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞) YAC-1 细胞

XY0192 小鼠淋巴瘤细胞,Yac-1细胞,

XY0193 小鼠淋巴瘤细胞,Nb2－11细胞

XY0194 小鼠淋巴瘤细胞,L5178Y细胞

XY0195 小鼠淋巴瘤细胞,EL4细胞

XY0196 小鼠淋巴瘤细胞,EL4.IL-2细胞

XY0197 小鼠淋巴结血管上皮样细胞,SVEC4-10细胞

XY0198 小鼠巨噬细胞,ANA-1细胞,

XY0199 小鼠精母细胞

XY0200 小鼠结肠腺癌细胞,CT-26细胞,