C57小鼠黑色素瘤瘤株

C57小鼠黑色素瘤瘤株操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，C57小鼠黑色素瘤瘤株此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：C57小鼠黑色素瘤瘤株取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. C57小鼠黑色素瘤瘤株 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。C57小鼠黑色素瘤瘤株传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY0442 人正常乳腺细胞,MDA-kb2细胞

XY0443 人正常乳腺上皮细胞,MCF-10A细胞,

XY0444 人正常乳腺上皮细胞,human MCF10A细胞

XY0445 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-2细胞

XY0446 人正常前列腺上皮细胞,RWPE-1细胞

XY0447 人正常前列腺基质永生化细胞,WPMY-1细胞

XY0448 人正常皮肤细胞,Hacat细胞,

XY0449 人正常肝细胞,LO2细胞,

XY0450 人正常肝细胞,human QSG-7701细胞

XY0451 人正常肝细胞,human L02细胞

XY0452 人正常肝细胞,HL-7702细胞

XY0453 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞,HBL-100细胞

XY0454 人张氏肝细胞,Chang liver细胞,

XY0455 人原位胰腺腺癌细胞,BxPC-3细胞,

XY0456 人原位胰腺腺癌细胞,BxPc-3-EGFP-puro细胞

XY0457 人原髓细胞白血病细胞,HL-60细胞

XY0458 人原髓细胞白血病细胞,AL7P/HL-60R细胞

XY0459 人原胚肾转化细胞系 293 Ad5+细胞

XY0460 人原巨核细胞型白血病细胞,UT-7细胞

XY0461 人永生化表皮细胞,HaCaT细胞

XY0462 人永生化鼻咽上皮细胞系 NP69细胞,

XY0463 人胰腺腺泡上皮癌 HPAC细胞

XY0464 人胰腺腺癌细胞,Panc 10.05细胞

XY0465 人胰腺细胞,AR42J细胞

XY0466 人胰腺导管腺癌细胞,PL45细胞

XY0467 人胰腺癌细胞系 SW 1990细胞

XY0468 人胰腺癌细胞,SFPAC-1细胞