615小鼠乳头状肺腺癌瘤株操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,615小鼠乳头状肺腺癌瘤株此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:615小鼠乳头状肺腺癌瘤株取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 615小鼠乳头状肺腺癌瘤株 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。615小鼠乳头状肺腺癌瘤株传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY0239 小鼠肺腺癌细胞系 LA795细胞
XY0240 小鼠肺成纤维细胞,L929细胞
XY0241 小鼠肺癌细胞,LLC细胞
XY0242 小鼠肺癌细胞,LLC1[LL/2]细胞
XY0243 小鼠肺癌细胞,Lewis细胞,
XY0244 小鼠肥大细胞瘤细胞,P815细胞
XY0245 小鼠肥大细胞,P815细胞,
XY0246 小鼠单核细胞白血病细胞,Raw-Blue细胞
XY0247 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,RAW264.7细胞
XY0248 小鼠单核巨噬细胞,J774A.1细胞
XY0249 小鼠大肠癌细胞,CT-26.WT细胞
XY0250 小鼠垂体细胞,MPC细胞
XY0251 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素) AtT-20细胞
XY0252 小鼠垂体瘤细胞,GT1-1细胞
XY0253 小鼠垂体瘤细胞,AtT-20细胞
XY0254 小鼠垂体瘤 ATT-20细胞,
XY0255 小鼠成纤维细胞系 McCoy细胞
XY0256 小鼠成纤维细胞,NIH-3T3细胞
XY0257 小鼠成纤维细胞,NCTC clone 929细胞
XY0258 小鼠成纤维细胞,L929细胞
XY0259 小鼠成纤维细胞,L929-EGFP-puro细胞
XY0260 小鼠成纤维细胞,C3H 10T1/2 2A6细胞
XY0261 小鼠成纤维细胞,3T3细胞
XY0262 小鼠成纤维细胞,3T3NIH细胞
XY0263 小鼠成肌细胞,C2C12细胞,
XY0264 小鼠成骨细胞系 MC3T3-E1细胞
XY0265 小鼠成骨细胞,2T3细胞,
XY0266 小鼠表皮细胞,JB6 Cl 30-7b细胞
XY0267 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性 NFS-60细胞