上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY0034 猪肺泡巨噬细胞,3D4/21细胞
XY0035 猪鼻甲黏膜成纤维细胞,PT-K75细胞
XY0036 皱褶青霉
XY0037 中华根霉
XY0038 中国仓鼠体细胞,R 1610(细胞
XY0039 中国仓鼠肾细胞(二氢叶酸还原酶缺陷型) CHO/dhFr-细胞
XY0040 中国仓鼠卵巢细胞,CTLA4 Ig-24细胞
XY0041 中国仓鼠卵巢细胞,CHO细胞,
XY0042 中国仓鼠肺细胞,V79细胞
XY0043 中国仓鼠肺细胞,V79-4细胞
XY0044 中国仓鼠肺细胞,CHL细胞
XY0045 中国仓鼠肺细胞,CHL/IU [ CHL-11 ]细胞
XY0046 中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞,CHO/dhFr-细胞
XY0047 中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1细胞
XY0048 中国仓鼠仓鼠肺细胞,R1610细胞
XY0049 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤 MR1细胞,
XY0050 致病性大肠埃希氏菌
XY0051 植物乳杆菌
XY0052 正常小鼠睾丸Sertoli细胞,TM4细胞
XY0053 正常小鼠睾丸Leydig细胞,TM3细胞
XY0054 正常人肝细胞,L-02细胞
XY0055 正常大鼠肾细胞,NRK细胞
XY0056 整合SV40 基因的乳腺上皮细胞,HBL-100?细胞
XY0057 赭曲霉
XY0058 赭绿青霉
XY0059 沼泽红假单胞菌
XY0060 张氏肝细胞,HeLa [ Chang Liver ]细胞
XY0061 粘质沙雷氏菌
XY0062 粘质沙雷伯氏菌
XY0063 粘红酵母
XY0064 早代小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞
XY0065 暂不提供 A-kata(+)细胞
XY0066 杂色曲霉