人鼻咽癌细胞(低分化)操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,人鼻咽癌细胞(低分化)此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:人鼻咽癌细胞(低分化)取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 人鼻咽癌细胞(低分化) 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。人鼻咽癌细胞(低分化)传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1511 肺癌细胞,A549 [A-549]细胞
XY1512 肥大细胞瘤细胞,P815细胞
XY1513 菲律宾链霉菌
XY1514 非洲绿猴肾细胞,Vero细胞
XY1515 非洲绿猴肾细胞,VERO C1008 (E6)细胞
XY1516 非洲绿猴肾细胞,CV-1细胞
XY1517 非洲绿猴肾细胞,COS-6细胞
XY1518 非洲绿猴肾细胞,COS-1细胞
XY1519 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞,VERO C1008 (E6)细胞
XY1520 非洲绿猴非洲绿猴肾细胞,CV-1细胞
XY1521 非洲绿猴sv40转化的肾细胞,monkey COS-7细胞
XY1522 非洲绿猴SV40转化的肾细胞,COS-1细胞
XY1523 非雄激素依赖型前列腺癌 Tsu-Prl细胞
XY1524 非01群霍乱弧菌
XY1525 放射性根瘤菌
XY1526 恶性胚胎横纹肌瘤细胞,RD细胞
XY1527 恶性黑色素瘤细胞,A-375 [A375]细胞
XY1528 恶臭假单胞菌
XY1529 恶臭假单胞菌
XY1530 蛾微杆菌
XY1531 多粘类芽孢杆菌
XY1532 多形拟杆菌
XY1533 多黏类芽孢杆菌
XY1534 短小芽孢杆菌
XY1535 短双歧杆菌
XY1536 短乳杆菌
XY1537 短密青霉
XY1538 动物双歧杆菌
XY1539 丁香假单胞菌
XY1540 貂肺上皮细胞,Mv.1.Lu(NBL-7)细胞,
XY1541 地衣芽孢杆菌
XY1542 低转移人肝癌细胞,MHCC97-L细胞,
XY1543 低分化胃腺癌 BGC-823细胞,
XY1544 低分化鼻咽癌细胞系 SUNE-1细胞
XY1545 德式乳杆菌保加利亚亚种
XY1546 德氏乳杆菌乳酸亚种