人感染HCV肝癌细胞

人感染HCV肝癌细胞操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，人感染HCV肝癌细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：人感染HCV肝癌细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞最好，最佳消化温度是37℃。

2. 人感染HCV肝癌细胞 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。人感染HCV肝癌细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY1308 鲁氏接合酵母

XY1309 流感嗜血杆菌

XY1310 鳞癌VX-2(兔模型)

XY1311 淋病柰瑟氏菌

XY1312 淋巴细胞白血病细胞,A3细胞

XY1313 淋巴瘤细胞,YAC-1细胞

XY1314 淋巴瘤细胞,Raji人Burkitt's细胞

XY1315 淋巴瘤细胞,P388D1细胞

XY1316 淋巴瘤细胞,EL4细胞

XY1317 淋巴瘤细胞,EL4. IL-2细胞

XY1318 裂殖壶菌

XY1319 亮白曲霉

XY1320 两歧双歧杆菌

XY1321 痢疾志贺氏菌

XY1322 蛎灰链霉菌

XY1323 鲤鱼尾鳍细胞

XY1324 里氏木霉

XY1325 酪丁酸梭菌

XY1326 蜡样芽孢杆菌

XY1327 蜡蚧轮枝孢菌

XY1328 昆明链霉菌

XY1329 昆虫细胞系 SF-9细胞

XY1330 昆虫细胞系 Sf-21细胞

XY1331 宽圆羊肚菌

XY1332 枯草芽孢杆菌黑色变种

XY1333 枯草芽孢杆菌

XY1334 扣囊内孢霉

XY1335 口腔鳞状细胞癌细胞,HN13细胞

XY1336 口腔表皮样癌细胞,KB细胞

XY1337 孔雀石绿链霉菌

XY1338 空肠弯曲菌

XY1339 空肠弯曲杆菌

XY1340 克柔念珠菌

XY1341 克柔假丝酵母菌

XY1342 克雷伯肺炎杆菌

XY1343 抗生链霉菌

XY1344 抗辐射链霉菌

XY1345 康宁木霉