中文名称:人红白血病细胞
英文名称:K562
组织细胞培养技术,人红白血病细胞深入生物医学的每一个角落,其背景知识,实是渊深海阔,涉及的相关领域很多,如:组织学、胚胎学、解剖学、生理学、病理学等等;而作为研究手段和方法,组织细胞培养技术被广泛地应用于生物医学的各个领域,如:细胞生物学、微生物学、免疫学、肿瘤学、发育学以及临床医学等等。因此,组织细胞培养技术是从事生物医学的研究人员应熟悉和掌握的基本技术。
. 人红白血病细胞细胞计数
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬z液中细胞的细胞数目。
准备工作: 取一瓶传代的细胞,按照《传代细胞培养(消化法)》中的传代方法繁殖细胞,待长成单层后以被使用。
细胞悬液制备: 细胞悬液的制备方法是用0.25%的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后,加入培养液(或Hanks液或PBS等平衡盐溶液),人红白血病细胞吹打制成待测细胞悬液。
细胞计数:
1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2.制备计数用的细胞悬液:用吸管吸5滴细胞悬液到一离心管中,加入5滴台盼蓝染液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。
3.将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
4.统计四个大格的细胞数:人红白血病细胞将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有16个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。
人红白血病细胞
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