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培养液pH值变化太快
可能原因
建议解决方法
1.CO2张力不对
按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。
2.培养瓶盖拧得太紧
松开瓶盖1/4圈。
3.NaHCO3缓冲系统缓冲力不足
改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓。
4.培养液中盐浓度不正确
在CO2培养人非小细胞肺癌细胞,A549细胞环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。
5.细菌、酵母或真菌污染
丢弃培养物,或用抗生素除菌。
培养细胞死亡
1. 培养箱内无CO2
检测培养箱内CO2
2. 培养箱内温度波动太大
检查培养箱内温度
3. 细胞冻存或复苏过程中损伤
取新的保存细胞种
4. 培养液渗透压不正确
检测培养液渗透压。注意:大多数哺乳动物细胞人非小细胞肺癌细胞,A549细胞能耐受渗透压为260– 350 mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。
5. 培养液种有毒代谢产物堆积
换入新鲜培养液
细胞影响因素
1.细胞的表面积与体积之比以及细胞核与细胞质体积之间的平衡:细胞通过它的表面不断地与周围环境或邻近细胞进行物质交换,这么它就必须有足够的表面积,否则它的代谢作用就很难进行。但细胞的体积由于生长而逐渐增大时,表面积与体积的比例就会变得越来越小,物质交换适应不了细胞的需要,这可以引起细胞的分裂,以恢复适宜的比例。同样的,细胞核中的遗传信息指引和控制范围有限,细胞核对太大范围的细胞质的调控作用就会相对减少。
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企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
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公司名称: 上海信裕生物技术有限公司
公司地址: 上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室 联系人: 徐云云 邮编: 201612
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