用于培养细胞的培养基类别及成分组成分析

用于培养细胞的培养基类别及成分组成分析

缓冲系统细胞培养基

    大多数细胞需要的pH值在7.2 -至7.4。但是，不同种类的细胞需要的PH值也是不一样的。比如成纤维细胞喜欢较高pH （7.4至7.7），但是传代转化细胞系则需要偏酸pH （7.0 至7.4）。由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHCO3）与CO2进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度一致。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3加入细胞的量为1.97g/L;如果CO2浓度保持在10%，培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。需要细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换.。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH 7.2 - 7.4范围内具有较好的缓冲能力，但是价格比较贵，在高浓度时可能对一些细胞会有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g/L）共用，来消除因额外加入HEPES引起的渗透压增加。因此在这种条件下培养，细胞培养瓶的盖子要拧紧，防止培养液中少量的碳酸盐挥发到空气中。大多数培养液中是加入酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。 

维生素细胞培养基  

    在细胞培养中，尽管血清是维生素重要来源，但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。 

其它成分细胞培养基   

    在一些比较复杂的培养液中还包括其它一些成分。例如在杂交瘤技术中常用的DMEM培养液，使用时还需要补加丙酮酸钠和qiu基乙醇。2-Me对细胞生长起到很重要的作用，有人认为它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞增殖的作用。2-Me的活性部分是硫氢基，其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞的增殖，为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术。另外，也开始用于一些难以培养的细胞。2-Me是一种小分子还原剂，极易氧化。分子量为78.13纯的2-Me是一种无色有刺激味的液体，比重为1.110-1.120（Do20），常用终浓度为5×10-5M。常配制成0.1M的储存液，用时每升培养液加0.5ml。