大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒

ELISA 技术的操作要点

ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

血清标本可按常规方法采集大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒，应留意避免溶血，红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP 为标记的ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。ELISA的操纵因固相载体的形成不同而有所差异，海内医学检修一般均用板式点。

标本的采取和保留

可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保留作多次检测，宜少量分装冰存。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。如在冰箱中保留过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采集时就应留意无菌操纵，也可加入适当防腐剂。除特殊情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。本文将叙述板式ELISA各个操纵步骤的留意要点，珠式、管式及磁性球ELISA，进口ELISA试剂盒均与特殊仪器配合应用，两者均有具体的使用说明，严格遵照划定操纵，必能得出正确的结果。

优质的试剂，良好的仪器和准确的操纵是保证大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要前提。血清标本宜在新鲜时检测。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同即是血清。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP ，也会产生假阳性反应。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。大部门ELISA检测均以血清为标本。在ELISA中血浆和血清可平等应用。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。

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