Megazyme木聚糖酶检测底物（燕麦）

1.原理

该检测方法可用于特异性检测β-木聚糖酶的活力。用木聚糖酶孵育Azo-木聚糖，底物发生分解，产生低分子量染色片段，与工业甲基化酒精（IMS,95% v/v）或乙醇(95% v/v)形成反应混合物。离心去除高分子量产物，对上清液进行检测。木聚糖酶的活力可从标准曲线中获得。

2．底物

首先将燕麦木聚糖纯化（去除淀粉），然后用蓝色染料R染色，1分子染料连接30分子糖基。

3.底物溶解

将2g粉状底物加入到带加热板和磁力搅拌棒搅拌的80mL剧烈沸腾的水中，之后关闭热源，继续搅拌，直至多聚糖彻底溶解（约20min）。定容至100ml，加入0.02g叠氮化钠，并使其溶解。该溶液4℃下可保存12个月（无酶污染情况下）。使用前应振荡试剂瓶，该溶液是粘性的，应用容积式移液器移取（如Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip）。

4.沉淀剂溶液

工业甲基化酒精（95%v/v）或乙醇（95%v/v）。