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虾肉中孔雀石绿和结晶紫残留量液相色谱-串联质谱法测定

2023/05/22 13:59

阅读:96

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应用领域:
食品/农产品
发布时间:
2023/05/22
检测样品:
生食水产品
检测项目:
孔雀石绿和结晶紫残留量
浏览次数:
96
下载次数:
参考标准:
GB/T 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量测定

方案摘要:

孔雀石绿和结晶紫是人工合成的三苯甲烷类化合物,都属于工业染料,因其价格低廉且具有杀菌和驱虫的效果,曾广泛应用于水产养殖中,但孔雀石绿和结晶紫及其代谢物的生物毒性较强,在生物体内长期累积会对人体造成危害。 逗点生物结合自身产品优势,建立了固相萃取-高效液相色谱-质谱联用法测定虾肉中的孔雀石绿和结晶紫含量的方法,样品在提取后,经中性氧化铝柱固相萃取柱净化后,采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。经验证,加标回收率范围90-110%,RSD值小于5%,满足要求。

产品配置单:

前处理设备

逗点 多管涡旋混匀仪 SDC-3000-KB-50

型号: SDC-3000-KB-50

产地: 广东

品牌: Biocomma

¥2.97万

参考报价

联系电话

智能水浴氮吹

型号: BN24

产地: 深圳

品牌: Biocomma

¥5.98万

参考报价

联系电话

设备配件

针式过滤器 尼龙 有机系 Φ:13mm,孔径:0.22μm 100个/盒

型号:

产地:

品牌: Biocomma

¥128

参考报价

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方案详情:

虾肉中孔雀石绿和结晶紫残留量液相色谱-串联质谱法测定

(Copure® ALN中性氧化铝柱)

《GB/T 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量测定

一、背景介绍

孔雀石绿和结晶紫是人工合成的三苯甲烷类化合物,都属于工业染料,因其价格低廉且具有杀菌和驱虫的效果,曾广泛应用于水产养殖中,但孔雀石绿和结晶紫及其代谢物的生物毒性较强,在生物体内长期累积会对人体造成危害。

逗点生物结合自身产品优势,建立了固相萃取-高效液相色谱-质谱联用法测定虾肉中的孔雀石绿和结晶紫含量的方法,样品在提取后,经中性氧化铝柱固相萃取柱净化后,采用高效液相色谱-串联质谱仪测定。经验证,加标回收率范围90-110%,RSD值小于5%,满足要求。

2、 仪器条件

2.1 色谱条件

仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)

色谱柱:Commasil® Coreshell C18 (2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)

流动相:A-水(0.1%甲酸)  B-乙腈(0.1%甲酸

洗脱方式:梯度洗脱,见表1

表1 流动相梯度洗脱条件

时间(min)

流速(mL/min)

%B

Curve

0.0

0.3

5

5

1.5

0.3

60

5

3.0

0.3

100

5

10.0

0.3

100

5

10.5

0.3

5

5

15

0.3

5

5

流速:0.3 mL/ min

柱温:30

进样量:10 μL

2.2 质谱条件

离子源:HESI         电喷雾电压:3500 V

鞘气压力:15 arb       辅气压力:1 arb

离子传输管:360 ℃     辅气温度:380 ℃

表2 孔雀石绿和结晶紫离子对参数(*为定量离子)

Compound

Precursor(m/z)

Product(m/z)

Collision Energy(V)

RF Lens(V)

RT/min

孔雀石绿


329


208

33

168


4.27


313*

34

隐性孔雀石绿


331


239*

28

151


4.27


316

31

孔雀石绿-d5

334

318*

37

157

4.25

隐性孔雀石绿-d6


337


240

29.8

139


4.25


322.2*

19.9

结晶紫


372


251

41

134


4.21


356*

43

隐性结晶紫


374


238

36

157


4.22


358*

35

三、试验步骤

3.1样本提取

称取5.00 g已捣碎的虾肉于50 mL离心管中,加入400 μL混合内标溶液(孔雀石绿-d5和隐性孔雀石绿-d6)加入11 mL乙腈,超声波震荡提取2.0 min,2500 rpm涡旋震荡提取5.0 min,8000 r/min离心5.0 min,上清液转移至另一空50 mL离心管。重复提取一次,合并上清液,用乙腈定容至25 mL,摇匀待净化。

3.2样本净化

取Copure® 中性氧化铝柱(货号:COALN31000),加入5.0 mL乙腈活化。加入上述样品待净化液5.00 mL后再加入4.0 mL乙腈进行洗涤,合并收集全部过滤液,45℃水浴氮吹至近干。加入1.0 mL乙腈,超声震荡5.0 min,加入1.0 mL 5 mmol/L乙酸铵,超声波震荡1.0 min,过0.22 μm滤膜后上机测试。

3.3基质空白试验

称取空白试样,按上述步骤进行实验。

四、实验结果

虾肉基质中结晶紫、隐形结晶紫、孔雀石绿及其内标、隐形孔雀石绿及其内标的定量离子对提取色谱图如下所示。


image.png

虾肉中孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫、隐性结晶紫加标实验回收率结果详见表3,回收率90-110%之间偏差值均小于5%,回收率和稳定性满足测试要求。

3 虾肉中孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫、隐性结晶紫加标回收结果

基质

项目

加标浓度(μg/kg

平均回收率(%)n=3

RSD(%)(n=3

虾肉




孔雀石绿

8.00

98.4

4.74

隐性孔雀石绿

8.00

94.5

3.06

结晶紫

8.00

93.1

2.97

隐性结晶紫

8.00

106

3.29





五、订购信息

货号

描述

包装

COALN31000

Copure® 中性氧化铝柱,1g/3mL

50支/盒

SDC-3000-D

biocomma® 多管涡旋混匀仪

1台/箱

BN24

24孔智能氮吹仪

1台/箱

SF130-22-NL

针式过滤器,尼龙,直径13mm,孔径0.22μm,有机系

100个/盒

SC2-1

2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425

100个/盒

V2-AL

2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425

100个/盒




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