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3D肿瘤球成像分析技术，更快速、更高通量！
本文中，我们展示了一种快速高通量的3D肿瘤球成像分析方法，使用瑞孚迪（Revvity）Celigo全视野高通量细胞成像分析仪对3D肿瘤球进行成像，并对肿瘤球的数量、大小、迁移、侵袭、活力以及药物诱导/抑制肿瘤球生长的剂量反应进行分析，可提高肿瘤药物的研发效率。
◇ 高速：3.5-10分钟，检测整板
◇ 全面：全孔成像，无一遗漏
◇ 准确：统一标准，电子存档
Celigo全视野高通量细胞成像分析仪用于3D肿瘤球的分析：
❖
Celigo全视野高通量细胞成像分析仪是一款基于孔板的细胞成像设备，能够快速对标准微孔板进行整板全孔成像，捕获细胞的明场和荧光图像。
❖
捕获的图像通过Celigo软件分析，以测量细胞的大小、形态、细胞计数、融合度和荧光强度等参数。
❖
Celigo软件可对3D肿瘤球进行分析，获得肿瘤球数量、大小、平滑度、活性、凋亡、迁移、侵袭等形态学和功能指标。
下面是具体方法的介绍
01
肿瘤球生长过程中球体大小的测量实验
人脑星形胶质母细胞瘤细胞（U87-MG）以1000个初始细胞接种到U型孔板中进行肿瘤球的培养，生长至第4天开始进行成像及分析。
从第4天起，肿瘤球的大小在接下来的14天内呈线性增加，生长的一致性较好。
Celigo能够快速分析肿瘤球并监测其大小随时间的变化。
02
胶原蛋白（Collagen）或人脐静脉内皮细胞（HUVEC）上的肿瘤球迁移实验
肿瘤球形成培养至第4天，转移到Collagen或HUVEC层上。
转移后，添加17-AAG，诱导肿瘤细胞向胶原蛋白表面迁移。
Celigo从转移后开始进行全孔的成像和分析，可分析计算出明场或荧光下肿瘤球迁移面积在药物的作用下随时间的变化。
03
肿瘤球生长抑制实验
肿瘤球形成培养至第4天，开始进行成像及分析。
从第4天到第7天，使用了两种药物17-AAG和PI-103来抑制肿瘤生长。
从图像和数据中可以清晰地看出，随着药物浓度的增加，肿瘤球的大小逐渐减少，表明生长受到抑制。
Celigo能够快速分析肿瘤球，并监测药物诱导的生长抑制作用随时间的变化。
04
肿瘤球侵袭实验
肿瘤球在液体培养基中形成培养至第4天后，将液体培养基更换成基质胶（Matrigel），在第4到第7天，添加17-AAG诱导肿瘤细胞向基质胶中侵袭。
Celigo可以通过分析肿瘤球侵袭到基质胶（Matrigel）中的细胞融合度（confluence）百分比的变化，准确量化随着17-AAG浓度的变化肿瘤细胞在基质胶中的侵袭水平。图像显示，随着17-AAG浓度的增加，肿瘤侵袭进入基质胶中的情况受到抑制。
05
肿瘤球组织间的侵袭实验
人脑星形胶质母细胞瘤细胞（U87-MG）形成的肿瘤球和星形胶质细胞形成的3D球体分别单独培养了4天。
在第4天，它们被混合在U型板孔底部共培养20小时。
在这20小时的培养过程中，星形胶质细胞的3D球体缓慢侵入肿瘤球体中。
% Confluence = GFP区域融合度/两个3D球体明场区域融合度
（1）Celigo全视野高通量细胞成像分析仪是一款多功能的3D肿瘤球分析工具。
（2）Celigo已被证明可以进行如测量3D肿瘤球的数量、大小、迁移、侵袭、活力等实验。
（3）以前需要人工手动用显微镜观察的实验，如肿瘤球大小测量，生长抑制监测，在胶原蛋白（Collagen）或人脐静脉内皮细胞（HUVEC）上的迁移，侵袭到基质胶中的区域大小测量以及3D组织间的侵袭等，现在可以通过自动化细胞成像分析的方法轻松量化。
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