1. 用 PDQuest软件或肉眼比对，找出感兴趣的蛋白点，并做好标记和记录。 2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。 3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 Ep 管 4. 将枪头(200μl)下端剪去，使其内径略小于蛋白斑点的直径，用色谱纯甲醇和MilliQ水冲洗枪头。 5. 对准斑点中央小心将蛋白切割下来，放入Ep 管，MilliQ水漂洗 2 次，如胶块 太大，将其切成 1 x 1 mm 的胶片。 6. 将切好的点做好标记和记录，置- 80℃ 保存或冻干后- 20℃ 存放。 注意事项： 1. 尽量避免皮肤和头发的角蛋白的污染，在操作过程中应戴一次性的 PE 手套 （不用乳胶手套）和帽子。 2. 不要将胶长期存放于乙酸溶液中。 3. Ep 管及染胶的容器必须用甲醇和水充分清洗，尤其应与进行Western blotting 的容器分开，以避免 casein 或 BSA 的污染。

样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下： nH2CH2COOH+3H2SO4——2CO2+3SO2+4H2O+nH3 (1) 2nH3+H2SO4——(nH4)2SO4 (2) (nH4)2SO4+2NaOH——2H2O+Na2SO4+2nH3 (3) 反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。 为了加速消化，可以加入CuSO4作催化剂，K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。 计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。

．薄膜准备：将薄膜切成2×8cm（或2.5×7cm）的小片，在薄膜的无光泽面一端1.5cm处用铅笔轻轻划一横线，表示点样位置，将薄膜浸入巴比妥缓冲液中充分浸透（浸泡5~10分钟或预先浸泡好，随时取用）后取出，夹于滤纸中，吸去多余的溶液。 2．点样：用血清加样器于无光泽面点样（微量吸管或玻片），沾取血清后垂直轻轻接触加样处，让血清吸入膜内，再拿开加样器。 3．平衡：待血清渗入薄膜，将薄膜无光泽面向下，两端平贴在铺有滤纸或纱布的电泳槽支持板上（加血清的一端贴在电泳槽阴极端）加盖，静置10分钟，使薄膜中的液体获得平衡。 4．电泳： 电压：约110~140V（或相当于电场强度10V/cm）。 电流：0.4~0.6mA/cm宽 时间：45~60分钟。 5．染色：电泳停止，关闭电源，将薄膜从电泳槽中取出，直接浸入氨基黑染色液中，染色3~5分钟，从染色液中取出薄膜，浸入漂洗液中漂洗脱色数次，至薄膜背景完全无色为止，取出薄膜用滤纸吸干。 6．定量：将漂洗后的薄膜夹于滤纸中吸干，剪下各蛋白区带，分别置于试管中，另于空白区剪一平均大小的薄膜放入空白管中，清蛋白管中加0.4MNaOH4ml,其余各加5ml，反复振摇使其充分洗脱，放30分钟后比色（波长650nm），以空白管调光密度到0点，读记各蛋白质的光密度值。 光密度总和（T）=2A α1 α2 β γ A清蛋白%=（2A/T）×100% α1球蛋白%=（α1/T）×100% α2球蛋白%=（α2/T）×100% β球蛋白%=（β/T）×100% γ球蛋白%=（γ/T）×100% 7.透明保存：将染色漂洗后晾干的薄膜条浸入新鲜配制的透明液中经2~3分钟，贴在玻璃板上，干后即成透明薄膜，可保存或用吸光度计直接测定各区带的吸光度。 注：容易产生的几种现象

猪流感H3N2酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中流感H3N2的表达。 实验原理： 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中猪流感H3N2。用纯化的猪流感H3N2抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中猪流感H3N2抗原相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的猪流感H3N2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪流感H3N2的存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存

猪免疫球蛋白G（IgG）定量检测试剂盒（ELISA） 使用说明书 【试剂盒名称】 猪免疫球蛋白G（IgG）定量检测试剂盒（ELISA） 【试剂盒用途】 定量检测猪血清、血浆及相关液体样本中猪免疫球蛋白G（IgG）的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被猪免疫球蛋白G（IgG）抗体的透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中猪免疫球蛋白G（IgG）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中猪免疫球蛋白G（IgG）含量。

猪圆环病毒（PCV）抗体酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中圆环病毒（PCV）抗体的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪圆环病毒（PCV）抗体水平。用纯化的猪圆环病毒（PCV）抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入圆环病毒（PCV）抗体，再与HRP标记的圆环病毒（PCV）抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的圆环病毒（PCV）抗体呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪圆环病毒（PCV）抗体浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：135ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存

猪白介素2（IL-2）定量检测试剂盒（ELISA） 使用说明书 【试剂盒名称】 猪白介素2（IL-2）定量检测试剂盒（ELISA） 【试剂盒用途】 定量检测猪血清、血浆及相关液体样本中白介素2（IL-2）的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被猪白介素2（IL-2）抗体的透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中猪白介素2（IL-2）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中猪白介素2（IL-2）含量。 【试剂盒组成】 1 酶标包被板 12孔×8条 7 显色剂A液 6mL 2 标准品：48pg/mL 0.6mL 8 显色剂B液 6mL 3 20倍浓缩洗涤液 25mL 9 终止液 6mL 4 标准品稀释液 6mL 10 说明书 1份 5 样本稀释液 6mL 11 封板膜 2张 6 酶标试剂 6mL 12 密封袋 1个 备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：48、24、12、6、3、1.5pg/mL

假定你抽提 rna 时使用到的有机试剂 - 氯仿、异丙醇、无水乙醇 - 都是国产的 (这是完全可以使用的)。我的问题是：你采取了什么措施来降低或者杜绝 RNase 的污染?具体地： 你是如何选择、预处理、使用和保存氯仿和异丙醇? 你是如何配制和保存 75% 乙醇? 坦率地讲，因为有机试剂的问题导致抽提失败，我真没有听到;或许有的问题是由有机试剂导致，但使用人也多是不会怀疑到这一点的。恐怖分子的行为倒是听到过：对氯仿、75% 乙醇进行高压灭菌处理。令我无言的是，这样的恐怖行为既没有导致恐怖的后果，也没有影响实验的成功。 不过我还是想提供一些建议。我关注的是质量控制，而不是单单是简单或者方便。 RNA 抽提中涉及的有机试剂，包括苯酚、氯仿、异丙醇、乙醇。苯酚多为商品化的东西了，选择和保存都不应该有什么问题;只强调一点：尽管 Tris 饱和的苯酚也可以用于 RNA 的抽提，但使用水饱和苯酚会更好一些，因为 RNA 在 pH 7 以上的溶液中，发生降解的机率大大提高。下面是关于氯仿、异丙醇、乙醇的有关建议。 选择 国内大的化学试剂公司生产或者监制的分析纯级别试剂就完全可以满足要求。 预处理 不需要进行任何的预处理。绝对不可以高温高压灭菌：这不是该不该的问题，而是能与不能的问题。这三个试剂的沸点都低于 100C，高温高压可能导致危险。 75% 乙醇的配制 一份无菌无酶的水与 3 份 (体积)无水乙醇混匀即成。不要使用量筒等过渡容器，使用天平来秤量：水的比重为 1，无水乙醇的比重按 0.785 计算。是先将无水乙醇倒出部分后再加入水，还是往装水的瓶子中加入无水乙醇，没有什么区别。事实上，70% - 80% 的乙醇都具有较好的洗涤能力，同时也不会导致片段比较大的核酸的丢失，所以，配制时就不要为了准确而左勾右兑的。关于现用现配，从质量控制角度看，不是一个好的办法;这也是你永远发现不了75% 可能会有问题的基础。75% 乙醇也不可以高温高压灭菌，原因同无水乙醇。 保存 首先，要使用新的试剂;试剂架上别人使用过并写有标记的，一定要找当事人确定，以防已被用于其它用途而标记未改。其次，分成相对小一点的包装 (50ml – 100ml);500ml 的瓶子取液是非常不方便的，移液器的杆子往往都进入了瓶口里，非常容易造成污染。第三，塑料瓶子密闭性好，装醇类试剂是非常好的选择;但氯仿绝对不要使用塑料瓶子。第四，盖紧瓶盖，作好标记，再在瓶子上盖上一个透明塑料袋防尘。第五，保存于室温。 将有机试剂保存于冰箱的人不在少数，但这么做却是令人奇怪的。首先，任何挥发性的东西都不保存在冰箱 (除非万不得已，如 DEPC)，这应该成为一个良好的习惯。其次，与外面相比，冰箱除了灰尘少一点外，什么都会比外面多的。第三，在室温打开低温的瓶子，将导致空气大量进入瓶子，增加了污染的风险。 使用 非常幸运的是，有机试剂对菌污染和酶污染似乎有我们想象不到的抑制和灭活作用，所以，使用这些试剂没有特殊的要求，按正常抽提 RNA 的要求就完全可以了。吸取有机试剂时，最好使用比要吸取的体积大的移液器，因为有机试剂有越吸越多的现象，试剂容易接触到移液器的杆头 – 污染不说，氯仿会腐蚀杆头的。75% 乙醇使用一次性的吸管移取，一次可以吸数 ml，既快又方便。如果舍不得丢弃，用完后放入塑料自封袋中保存，是非常安全的。

人 (8-OHdG)Elisa试剂盒说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 48T 3ng/L -100 ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量。 实验原理 人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)Elisa试剂盒说明书本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。用纯化的人8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)，再与HRP 标记的8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)抗体结合，形成抗体- 抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成 蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶 2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（200 ng/L） 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

(1)平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择： 贴壁细胞一般用平底培养板。悬浮型细胞的培养一般用V型。 U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 。V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。 不同型状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用﹐但当细胞数目较少﹐如做克隆时﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等实验时﹐无论贴壁和悬浮细胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面﹐当做两种不同淋巴细胞混合培养时﹐需要二者相互接触以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V型板的用途更少﹐一般用于细胞杀伤实验时﹐为了使效靶细胞紧密接触﹐常使用V型板﹐但这种试验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心)如果是养细胞的话，通常是选用平底的， 另外要特别注意材质， 标示"Tissue Culture (TC) Treated"就是养细胞用的。 圆底的好像没听说过拿来养细胞。 圆底的通常是拿来做分析， 化学反应， 或是保存样品用的， 因为圆底比较好将液体吸得干净，如果用平底的就不好吸了。 不过， 如果你是要测吸光值的话， 一定要买平底的才行。大部分细胞培养都用平底培养板，便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致，还便于MTT检测。圆底培养板主要用于同位素掺入的实验，需要用细胞收集仪收集细胞的培养，如“混合淋巴细胞培养”等。

大鼠去甲肾上腺素（NA）酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中去甲肾上腺素（NA）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠去甲肾上腺素（NA）水平。用纯化的大鼠去甲肾上腺素（NA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入去甲肾上腺素（NA）再与HRP标记的去甲肾上腺素（NA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的去甲肾上腺素（NA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠去甲肾上腺素（NA）浓度。 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

中文名称 β-谷甾醇 英文名称 β-Sitosterol CAS 83-46-5 分子式 C29H50O 分子量 414.71 溶解度甲醇 性状白色结晶粉末 干燥失重≤2.0% 含量99.56% 贮存 密封保存，置阴凉干燥处 （0-10℃） 有效期 2年 检测标准 C18色谱柱：流动相：甲醇：乙醇=1:1 检测波长：210nm 结构式：

鸢尾黄素质量分析报告（Certificate Of Analysis） 中文名称 鸢尾黄素 英文名称 Tectorigenin CAS 548-77-6 分子式 C16H12O6 分子量300.26 溶解度 甲醇 性状 黄色结晶粉末 干燥失重≤2.0% 含量 98.66% 贮 存 密封保存，置阴凉干燥处 （0-10℃） 有效期 2年 结构式：

人白细胞介素-4（IL-4）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，组织及相关液体样本中白细胞介素4（IL-4）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-4（IL-4）水平。用纯化的人白细胞介素-4（IL-4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-4（IL-4），再与HRP标记的IL-4抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-4（IL-4）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-4（IL-4）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：450ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

鸡白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2（IL-2））水平。用纯化的鸡白细胞介素-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入鸡白细胞介素-2（IL-2），再与HRP标记的IL-2抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素-2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2（IL-2）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：360ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗体（HTLV 1+2）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗体（HTLV 1+2）水平。 实验原理： 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗体（HTLV 1+2）。用纯化的人T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗体（HTLV 1+2）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人T淋巴细胞白血病1+2型病毒抗体（HTLV 1+2）存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存

犬一氧化氮合成酶(NOS)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定犬血清，血浆及相关液体样本中一氧化氮合成酶(NOS)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬一氧化氮合成酶(NOS)水平。用纯化的犬一氧化氮合成酶(NOS) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS)，再与HRP标记的一氧化氮合成酶(NOS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中犬一氧化氮合成酶(NOS)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：54μmol/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

质量分析报告（Certificate Of Analysis） 中文名称 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 英文名称 Cyanidin-3-O-glucoside CAS 7084-24-4 分子式 C21H21ClO11 分子量 484.84 溶解度甲醇 性状黑色无定形粉末 干燥失重≤2.0% 含量99% 检测标准RP-HPLC:0.4%磷酸水：乙腈=88:12 钨灯λ：535nm（仅供参考） 工艺流程 矢车菊地上部分-醇提-氯仿萃取-硅胶柱层析--制备色谱精制-结晶-纯品 贮 存 密封保存，置阴凉干燥处 （0-10℃） 有效期 2年 结构式： 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 HPLC图谱 RT15.573 15.573 0.47620 Ch1 535nm 1 1580 91 0.000000 SV 15.488 15.989 0.4762 RT22.208 22.208 99.52380 Ch1 535nm 2 330229 8900 0.000000 SV 21.269 23.573 99.5238

金黄色葡萄球菌测试片使用说明书 产品规格： 20片/包 ，100片/盒 产品用途：金黄色葡萄球菌检测 1、原理及适用范围 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 简称金葡菌)是人类最常见的致病菌之一，其侵袭力很强，能产生多种致病物质如：肠毒素、凝固酶等；可引起化脓性炎症、毒素性疾病及葡萄球菌性肠炎。金葡菌所引起的中毒事件已成为世界性的公共卫生问题，我国每年由金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道。金黄色葡萄球菌测试片(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有选择性培养基和专一性的酶显色剂，运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品，一步培养15～24h就可确认是否有病原菌的存在，大大地简化了检测程序。本产品适用于各类生、熟食制品，饮料，糕点类，调味品，奶制品等的快速检测。执行标准：食品安全国家标准食品微生物检验黄色葡萄球菌检验（GB/T 4789.10-2010）。 2、操作方法 2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，调节样品匀液pH至6.0～8.0。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液，以此类推，每次换一支吸管。 2.2、接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，将金黄色葡萄球菌测试片（BT206）置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s左右，使培养基凝固，每个稀释度接种两片。做一片空白阴性对照。 2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。 3、结果判读 培养后，测试片上紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌；呈蓝色的菌落为其他大肠菌群。出现阳性菌落的样本，最好用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的至少要再取样重复检验一次。

中文名称（Chinese Name）紫檀芪 英文名称（English Name ）Pterostilbene 分子式（molecular formula）C16H16O3 分子量（MW）256.3 CAS号码（CAS NO）537-42-8 性状（Appearance 白色结晶粉末 溶解度（Solubility） 溶于甲醇 干燥失重（Loss on drying）≤0.2% 含量(Assay by HPLC) 100% 检测条件：ACN:1.6%HAC (75:25) 检测波长（Wavelength）：319nm 结构： 贮存（Storage） 密封保存，置阴凉干燥处Store in a cool and dry area, sealed and keep from direct light. 有效期 （Shelf Life）2年2 years

小鼠抗核抗体（ANA)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆,细胞上清及相关液体样本中小鼠抗核抗体（ANA)含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗核抗体（ANA)水平。用纯化的小鼠ANA抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入抗核抗体（ANA)，再与HRP标记的ANA抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗核抗体（ANA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠抗核抗体（ANA)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：27ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

瑞氏染色液试剂盒使用说明（规格一、二） 一、用途 本产品主要用于血液、骨髓涂片的细胞染色，亦可用于痰液、尿沉渣、阴、尿道分泌物、浆膜腔积液、脑脊液、创面分泌物及培养物等细胞染色。 二、原理 瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料，通过物理吸附作用和化学亲和作用可使细胞着色，便于辨认细胞种类。 三、试剂盒组成 1、瑞氏染色液（Ⅰ液）　　　　　 1×100ml（规格一）; 　1×250ml（规格二） 2、瑞氏缓冲液（Ⅱ液）　　　　 　 1×100ml（规格一）; 　1×250ml（规格二） 四、染色方法 ⒈　血涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距保持10mm以上的距离，滴加瑞氏染色液（Ⅰ液）3--5滴于血膜上，染1分钟（20-25℃）。 ⒉　滴加瑞氏缓冲液（Ⅱ液）3--5滴于染液中，用洗耳球轻轻吹匀，染4--6分钟（20-25℃）。 ⒊　流水自玻片一端轻轻冲去染色液，沥去标本上剩余的水，干后镜检。 注意：1、血片干透后方可固定染色。 　　　2、瑞氏染色液不可过少，以免染料结晶于血片上。 　　　3、玻片应化学清洁，否则影响染色效果。 五、结果 红细胞染成红色，淋巴细胞胞浆染成蓝色。 六、贮存、有效期 本试剂盒应置2℃－25℃避光保存, 瑞氏染色液（Ⅰ液）长期有效,瑞氏缓冲液（Ⅱ液）有效期一年。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

小鼠17-羟皮质类固醇（17-OHCS）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中17-羟皮质类固醇（17-OHCS）的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠17-羟皮质类固醇（17-OHCS）水平。用纯化的小鼠17-羟皮质类固醇（17-OHCS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入17-羟皮质类固醇（17-OHCS），再与HRP标记的17-OHCS抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的17-羟皮质类固醇（17-OHCS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠17-羟皮质类固醇（17-OHCS）浓度。 操作步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24μg/L，16μg/L ，8μg/L，4μg/L，2μg/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中流行性腹泻病毒抗体（PEDV）水平。 实验原理： 本试剂盒采用双抗原夹心法测定血清或血浆中猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV）。用纯化的猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV）抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中流行性腹泻病毒抗体（PEDV）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的流行性腹泻病毒抗体（PEDV）抗原结合，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猪流行性腹泻病毒抗体（PEDV）的存在与否。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 阴性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 阳性对照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中抗狂犬病毒抗体(anti-RV)。 实验原理： 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)。用纯化的人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中抗狂犬病毒抗体(anti-RV)相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗狂犬病毒抗体(anti-RV)抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)的存在与否。

中文名称（Chinese Name） 草酸单铵 英文名称（English Name ）Glycyrrhizic acid monoammonium salt 分子式（molecular formula）C42H65NO16 分子量（MW）839.96 CAS号码（CAS NO）53956-04-0 性状（Appearance ）白色结晶粉末 溶解度（Solubility） 溶于甲醇 干燥失重（Loss on drying）≤2.0% 含量(Assay by HPLC) ≥98%

(一)为什么要进行抗原修复? 组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。 在免疫组化染色后的镜下观察中，有发现这样的结果，阳性物反应不强，时隐时现，表达不均匀，有时可出现假阴性，这是因为： 1.组织在用甲醛固定的过程中所形成的醛键可封闭抗原的决定族。甲醛与组织蛋白质类的反应是多样而复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键8。这也是甲醛的一个作用，因为它是一种聚合固定剂，因而能在相邻的蛋白质键间形成桥键的作用。 2. 甲醛在保存进程中会形成羟甲基，也可封闭抗原决定族。据French和Edsall的研究认为，最常遇到的甲醇反应，就是加到一个含反应性氢原子的化合物中，形成一个羟甲基化合物。 3.在组织固定过程中，甲醛与蛋白质发生交联，形成醛交联蛋白，这种化合物封闭了抗原，使之无法表达出来。 为了解决上述存在的问题，更好地暴露出抗原，将其很好地显示出来，目前世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。 (二) 用什么方法进行抗原修复? 至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的最佳状态。 (1)物理化学试剂抗原修复法。 1. 真空负压抗原修复法： ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，真空负压干燥箱预先调至95℃，真空负压处理10分钟。 ⑤待修复注降至室温的一，PBS洗3次，随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。 2.微波辐射抗原修复法： ①切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④ 0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，于微波炉内微波辐射10分钟，如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。 ⑤待修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色。 3.高压抗原修复法： ①切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④切片放入抗原修复液中，边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后持续1-4分钟。 ⑤待修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。 4.隔水热抗原修复法： ①切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④切片放入0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中，边同容器一起放入水溶锅中加热，其间应不断用温度计测其温度，待抗原修复液的温度达到有效温度后(92℃↑)。即开始计时，持续40分钟。 ⑤待抗原修复液恢复至室温后，PBS洗3次，随后按选定好的免疫组化染色方法进行染色。 5.电炉加热抗原修复法： ①切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④ 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热，不时用温度计测量温度，当达92℃后，即可拔离电源，当温度低于92℃时，再插上电源，如此反复持续至10分钟左右。 ⑤待抗原修复液降至室温后，PBS洗3次，随后按选定的免疫组化染色方法进行染色。 对各种抗原修复方法的评价。

本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中人流行性脑脊髓膜炎抗体IgM(ECM IgM)。用纯化的人流行性脑脊髓膜炎抗体IgM(ECM IgM)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中流行性脑脊髓膜炎抗体IgM(ECM IgM)相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的流行性脑脊髓膜炎抗体IgM(ECM IgM)抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人流行性脑脊髓膜炎抗体IgM(ECM IgM)的存在与否