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人淋巴细胞操作方法

2016-08-11 09:53

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人淋巴细胞分离液将人血液中的淋巴细胞分离出来,是由于各种机体的血细胞比重不同制备出不同比 重的分离液,它是一种体外应用的生化试剂,主要成分聚蔗糖(Ficoll)或葡聚糖与泛影酸葡甲胺或泛影酸钠, 适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞。 二、 试剂盒组份 组份 Cat: KGA830 保存条件 人淋巴细胞分离液 200ml 2-8℃,12months 三、 试剂盒以外自备仪器和试剂 Hank's 液、离心机 四、 使用注意事项 1. 启封后应置 4℃保存。 2. 细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,混匀后使用。 3. 整个分离过程中,温度应控制在 18-28℃,否则会影响分离质量。 五、操作方法 1. 取抗凝血 1ml,与 Hank’s 液 1:1 混匀后,小心加于 2ml 的细胞分离液之液面上,以 2000 转/分离心 (半径 15cm 水平转子)15 分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层(第一层为血浆或组织匀浆液层, 第二层为环状乳白色淋巴细胞或单核细胞,第三层为透明分离液层,第四层为红细胞层,红细胞层表面 有悬起的部分白细胞层,收集此界面上的细胞) 2. 将收集的细胞,放入含 Hank’s 液 4-5 毫升的试管中,充分混匀后,以 1500-2000 转/分离心 10 分钟, 收集第二层细胞,沉淀经反复洗 2 次即得所需细胞。

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