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如何测量高浓度溶液的荧光光谱？
1. 前言
荧光分析法可用于物质的定量和定性分析，而且灵敏度高，对于稀溶液来说，荧光强度和样品浓度成线性关系。那么如何准确测量高浓度的溶液样品呢？
图1和图2分别是使用10mm矩形样品池+标准样品池支架和10mm矩形样品池+固体样品支架的测定示意图。
图1 10mm矩形样品池+标准样品池支架
图2 10mm矩形样品池+固体样品支架
从图中可以看出，使用图1的方式测量高浓度样品时，激发光无法到达样品内部，并且在液体表面更容易产生荧光，这种现象被称为自吸收。由于样品本身对荧光的吸收，造成更短波长处的荧光消失。如果稀释样品不合适，则需要选用图2的方式测量高浓度样品，通过使用固体样品支架，捕捉样品表面的荧光。
2. 应用实例-橄榄油的三维荧光光谱
在此实验中，我们测量了市售橄榄油和初榨橄榄油的三维荧光光谱，并比较了荧光强度。
样品：不同浓度的橄榄油
测量附件：固体样品支架
测量结果：四种样品的三维荧光光谱
图3 品牌A橄榄油的三维荧光光谱
图4 品牌A初榨橄榄油的三维荧光光谱
图5 品牌B橄榄油的三维荧光光谱
图6 品牌B初榨橄榄油的三维荧光光谱
使用日立荧光分光光度计F-7100以60000nm/min的扫描速度，获得了多个样品的高信噪比光谱。在所有测试的橄榄油三维荧光光谱中，在两个区域(i)、（ii）处观察到荧光，计算（ii）/(i)的荧光强度比，可以看出，两个品牌的初榨橄榄油与橄榄油相比，初榨橄榄油的强度比更高。
3. 总结
使用荧光分光光度计测量高浓度样品溶液时，注意样品自吸收对荧光光谱产生的影响。日立荧光分光光度计搭配固体样品支架，以高通量测量了高浓度橄榄油的三维荧光光谱，测量结果准确。
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