REBEL：一种可以快速分析细胞培养基氨基酸和维生素成分的生化分析仪

工艺开发和生产中，生物反应器或其他细胞培养工具中重要的培养基营养成分和细胞代谢物需要在一些关键时间点进行监测。REBEL是一个高度集成的分析仪，它能够以很小的样本量、快速的分析时间，帮助加快工艺开发策略的优化。REBEL仅需对样品进行离心或过滤后稀释，这比传统LC或LC-MS方法要简单得多，分析时间也更短。

一、CHO细胞培养基分析

CHO细胞CDM培养基通常有两种形式：液体和干粉。当决定使用哪种培养基类型时，研究人员必须了解项目所需的培养基数量。液体培养基可以直接用于小型生物反应器、摇瓶和微孔板。而干粉必须经过配制，但干粉的运输和储存通常更容易也更便宜，所以干粉培养基通常用于更大的培养体积。许多公司都有专门的培养基配制人员和实验室来配制干粉培养基，以简化细胞培养和上游流程开发的工作流程。在补料之前快速地分析新鲜培养基的成分，可以确保培养基成分在放大或配制前后的培养基成分的一致性。

以上报告的浓度来自于对干粉和液体的CDM培养基配方的分析（两种培养基混合物都没有谷氨酰胺）。对于干粉，按照制造商的说明来制备。样品都用REBEL稀释剂稀释10倍，报告的浓度为5次重复试验的平均值。

二、含血清和其他添加剂的培养基分析

CDM培养基的成分分析可能会因为血清（FBS）和其他添加剂的存在而变得复杂。图中，CDM培养基中的成分浓度不受胎牛血清存在的影响（0-25 %，图左）。在第二个实验中（图右），CDM培养基中报告的成分浓度同样不受其他几种不同添加剂的影响。而这样的结果，对于REBEL而言，只需用稀释液将样品离心或过滤后稀释100倍，不需要额外的任何样品准备工作。

三、T细胞培养基分析

随着更多的无动物源、商业培养基的引入，了解T细胞培养过程中需要补料哪些组分很重要，可以更容易地确保生产工艺的一致性。采用REBEL检测RPMI +血清、有无添加血清的combo (基础及细胞扩增版本)、单独的基础培养基和单独的细胞扩增培养基的必需氨基酸含量。

四、HEK293 CDM培养基分析

对来自四家供应商的HEK293培养基进行了测试，以确定针对同种细胞的不同培养基配方之间的差异。分析前将培养基稀释100倍（n = 5）。总的来说，来自供应商3的培养基中几种成分的浓度最高。

五、间充质干细胞培养基分析

测试了两种不同的间充质干细胞培养基与补液。分析前将培养基稀释10倍（n = 5）。当添加补液时，培养基1的氨基酸水平没有差异，但在培养基2中，Gly、Ile、Phe、Pro、Ser、 Thr,、Trp和Val的浓度大幅增加。

使用方法和样品处理：

你所看到的就是你所得到的。

REBEL侧面不需要外部计算机、压缩气瓶、废物或者试剂瓶。

您需要做的只是，取品(1)后离心或过滤以除去细胞，并用REBEL稀释液(2)稀释。然后将样品载入设备(3)，按“start”(4)。所有的校准剂和试剂都放在REBEL仪器内部，数据将被自动处理成报告（CSV或PDF），可用U盘导出(5)。

研究人员不仅需要确保他们所使用的细胞培养基适合他们的应用，同时也应考虑在运输过程、在储存期间和培养过程中频繁分析其中成分浓度的变化，以确保细胞生长和生产方面的任何变化都不是由细胞培养基配方/成分浓度的未知变化而产生的。而REBEL将会是做这些的得力助手。