动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类检测

前言

喹诺酮类和四环素类药物是一类广谱抗生素，其中大多数是人畜共用药物，如四环素、环丙沙星等。磺胺类药物同样是一类抗生素和抗原虫药物，对牲畜的生长及改善饲料转化率方面效果显著，均具有性质稳定、抗菌谱广、疗效强、价廉等优点而被广泛应用。磺胺类、喹诺酮类、四环素类药物在动物体内代谢缓慢，容易产生蓄积和残留，人体过量食用还会产生潜在的“三致”（致癌、致畸、致突变）作用，特别是机体对抗生素的耐药性。

本文参考GB 31658.17-2021《动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，使用液相色谱质谱联用仪进行可食动物肌肉中四环素类、磺胺类和喹诺酮类等药物分析，通过检出限、精密度和准确度等指标评估仪器性能，证明LC-TQ 5200满足可食动物肌肉中兽药残留检测的需要。

实验部分

样品前处理

取畜禽水产样品2 g，于50 mL塑料离心管，加入酸化乙腈（含0.5%甲酸）10 mL，加入无水硫酸钠2 g，涡旋混合5 min，8000 r/min离心5 min，取上清液于10 mL玻璃试管，35℃氮吹近干，加入50%乙腈水2 mL溶解残留物，涡旋10 s，取上清液过0.22 μm有机滤膜，待测。

仪器条件

表1.  仪器方法参数

结果与讨论      

1、标准谱图和物质信息

8种目标物总离子流图见图1。加标浓度为50 μg/kg。8种目标物的定性、定量离子对以及具体质谱参数见表2。

图1  8种目标物（50 μg/kg）总离子流图

表2.  8种目标物的定性、定量离子对和保留时间、碰撞能量条件

2、标准曲线

平行取若干份2 g畜禽水产样品，添加混合标准工作溶液，进行前处理后得到目标物浓度分别为1 μg/kg、2 μg/kg、5 μg/kg、10 μg/kg、25 μg/kg、250 μg/kg、500 μg/kg的添加样品提取液，并进行分析。8种目标物的线性相关系数R2结果见下表3，均大于0.990，满足标准的要求。

表3.  8种目标物的标准曲线线性相关系数

3、动物肌肉加标回收实验

3.1 精密度

取2 g畜禽水产样品，对8种目标物分别进行三个浓度（10 μg/kg、25 μg/kg、250 μg/kg）加标实验，每个样品测量6次，对精密度进行评估，目标物加标浓度为10 μg/kg、25 μg/kg、250 μg/kg时的相对标准偏差RSD分别为0.69%~9.25%、2.87%~11.93%和2.19%~8.16%。精密度RSD满足标准要求（RSD≤15%）。

3.2 准确度

对2 g畜禽水产样品（目标物浓度均为10 μg/kg、25 μg/kg、250 μg/kg）的回收率进行评估，结果详见下表4。加标浓度为10 μg/kg、25 μg/kg、250 μg/kg动物肌肉基质的回收率分别为88.2%~101.4%、81.1%~100.4%和82.0%~102.3%，回收率结果满足标准要求（60%~110%）。

表4. 8种目标物动物肌肉加标回收率

3.3 检出限

比较了采用LC-TQ 5200实测的方法检出限与标准方法检出限。从下表5可知，实测方法检出限范围0.2 μg/kg ~1.1 μg/kg，所有目标物检出限均低于GB 31658.17-2021标准要求。

表5. 8种目标物方法检出限与标准限值信息表