整体解决方案丨2020版《中国药典》2341 金银花中33种禁用农药及其单体残留量的测定

本文参照2020版《中国药典》四部通则《2341农药残留量测定法》新增第五法《药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法》中的固相萃取法，使用乙腈对金银花试样进行均质提取，经盐析和离心后，GC-MS/MS组化合物采用GCB/NH2柱净化，LC-MS/MS组化合物采用HLB柱净化，最后上机检测。

本方法采用睿科AH-50全自动均质器进行批量提取，提取液经MPE高通量真空平行浓缩仪进行浓缩，然后用Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪对提取液进行净化，最后再用MPE高通量真空平行浓缩仪对洗脱液进行浓缩，实现了金银花制备过程全流程自动化。在40μg/kg的加标水平下GC-MS/MS法中33种化合物的回收率在71.5-118.8%之间，RSD值小于10%；在20μg/kg的加标水平下LC-MS/MS法中30种化合物的回收率在72.1-120.5%之间，RSD值小于10%，满足实验要求。

仪器与耗材

1.仪器

睿科AH-50全自动均质器

睿科MPE高通量真空平行浓缩仪

睿科Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪

Agilent 1290+6470高效液相色谱/质谱联用仪

Agilent 8890+7000D气相色谱/质谱联用仪

2.耗材

样品制备

GC-MS/MS法

量取上述溶液 2mL至15mL上样管中，以石墨化碳氨基复合固相萃取小柱（货号：RC-204-13822）为净化柱，先用10 mL乙腈-甲苯（3:1）活化小柱，弃去流出液，之后以1 mL/min的速度上样，再用2×3 mL的乙腈-甲苯（3:1）清洗样品瓶并过柱，最后用14 mL的乙腈-甲苯（3:1）洗脱，收集以上流出液，具体的固相萃取条件如图3所示。用MPE将洗脱液浓缩至近干，用乙腈转移并稀释至2 mL，混匀。精确移取1 mL上述定容液，精密加入0.3 mL磷酸三苯酯内标溶液，过0.22 μm滤膜后上气相色谱/串联质谱仪测定。

图1 Fotector Plus对金银花中多农残的固相萃取条件

LC-MS/MS法

量取直接提取法制备的溶液3mL，通过HLB柱（货号：RC-204-36476）净化，收集全部流出液，混匀。精确移取1 mL上述净化液，精密加入0.3 mL水后过0.22 μm滤膜，上高效液相色谱/串联质谱仪测定。

样品测试

基质加标回收实验

在金银花样品中添加浓度为40μg/kg的33种农药（GC-MS/MS）和20μg/kg的30种农药（LC-MS/MS）进行加标回收验证，使用上述样品制备方法，最后分别经GC-MS/MS和LC-MS/MS检测，平均回收率和RSD结果，如下表所示：

表-1 GC-MS/MS法33种化合物的平均回收率和相对标准偏差(n=3)

表-2 LC-MS/MS法30种化合物的平均回收率和相对标准偏差(n=3)

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