Tissue Cytometry助力中山大学附属第一医院揭示ILC3s在LN中的致病作用

狼疮性肾炎是系统性红斑狼疮（通常称为狼疮）的常见并发症。狼疮是一种自身免疫病，会导致免疫系统产生自身抗体蛋白质，这些蛋白质会攻击自身的组织和器官，包括肾脏。当狼疮自身抗体影响肾脏滤除废物的结构时，就会出现狼疮性肾炎。

早期的一项研究发现了ILC2s在狼疮性肾炎（LN）中可能具有保护作用，但到目前为止，关于这个领域的研究进展还相对较少。为了针对性开发新的治疗策略，探索其作为新治疗靶点的潜力，中山大学附属第一医院作者在Advanced Science杂志上发表了文章《Group 3 innate lymphoid cells exacerbate lupus nephritis by promoting B cell activation in kidney ectopic lymphoid structures》，揭示了ILC3s在LN中的致病作用，为LN的治疗提供了新的靶点。

实验部分

文章作者首先发现，ILC3s 在狼疮肾炎患者和小鼠的外周血和肾脏中显著增加，并与疾病活动度和肾脏损伤程度呈正相关。继而通过流式细胞术与TissueCytometry技术对ILC3s的来源进行探索发现， 肠道来源 ILC3s 的是肾脏中出现的 ILC3s 的重要来源，并加速自身免疫病和肾炎发展的全身表现。

以上部分是该研究的必要基础，为了客观明确阐述实验的前提，文章作者采用经典的科研思路，直观的通过Tissue Cytometry技术进行组织原位切片成像及量化分析，结合流式细胞术、与测序技术等间接手段，获得了全面坚实的数据结果。

Figure1：比较各组每mm2肾组织内ILC3s的数量(n=7~10)。

为了研究ILC3 对 MRL/lpr 小鼠肾脏中 B 细胞的增殖和分化以及 ELS 的形成的作用，及其对B细胞的作用途径，作者更进一步大量使用了Tissue Cytometry多重免疫荧光定量分析技术。Panel如下：DAPI（灰色）、RORγt（红色）、CD127（黄色）、CD3（蓝色）和 CD20（绿色）。

Figure 5：ILC3s促进MRL/lpr小鼠肾脏B细胞增殖、分化和ELS形成。

(A)肾脏ELS和非ELS区域的ILC3s定量(CD3−CD127+ROR𝛾t +)(每组n=10)

(B) T细胞和B细胞到ILC3s的空间距离分布(每组n=35)。