抗生素残留检测方法 食品安全是管理出来的，检测是管理的主要手段。目前应用于抗生素残留的检测方法很多，根据检测原理不同，主要有微生物方法、理化分析方法和免疫学方法，具体见表1。          微生物方法 理化分析方法 免疫学方法 检测 原理 根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用，来定性或定量确定样品中的抗生素残留。 利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应或性质来测定其含量。 以抗原抗体的特异性、可逆性结合为基本特征而设计。 代表 方法 稀释法、浊度法、扩散法、TTC法、微生物受体检测法。 高效液相色谱法、荧光法、毛细管电泳法、气相色谱质谱法、联用技术等。 酶联免疫分析（ELISA）、胶体金免疫法、发光免疫分析、荧光免疫分析、生物传感器等。 优点 应用较为广泛，检测成本较低。 能进行定性、定量和药物鉴定，敏感性较高。 操作简单、速度快、分析成本低，高选择性，高灵敏度，可实现具体分析某种抗生素。 缺点 灵敏度和特异性相对较低、耗时长、耐药菌的存在会导致误检，不能区分具体的抗生素药物。 检测程序较复杂、检测费用较高、耗时太长。 有假阳性的可能。 适用 范围 实验室少量样品的检测和样品初筛。。 实验室样品的定性、定量确证测定。 大规模检测、临时抽检及企业日常监控。

                                                                                                                              一、背景介绍    抗生素（antibiotics）是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类物质。现抗生素的种类已达几千种。在临床上常用的亦有几百种。其主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成、半合成方法制造。抗生素残留是指给动物使用抗生素药物后积蓄或贮存在动物细胞、组织或器官中的药物原形、代谢产物和药物杂质。抗生素残留危害巨大，已经引起了世界各国政府的高度重视。    1929年英国细菌学家弗莱明发现青霉素，并在临床应用中取得惊人的效果，这标志着抗生素时代的到来，由此人类的平均寿命得以延长。可是由于抗生素的使用会导致耐药细菌的出现，短短几十年后，到２０世纪末，过分依赖和滥用抗生素就使人类陷于将“无药可救”的噩梦。为此，许多国家都对抗生素使用实施严格限制措施。动物使用抗生素主要是在养殖业中将抗生素作为饲料添加剂，这不仅可以使动物生长速度更快，喂食量降低，动物抗病能力也会非常高，养殖户获利增加。但是，动物广泛使用抗菌素会导致“耐药菌株”的出现，使得原有的抗生素失去作用，导致动物细菌疾病难以控制。而且这些“耐药菌”极可能通过食物或动物与人的接触传播给人，进而使人产生耐药性。    1957年日本最早报道了病原菌耐药性问题，当年一些病原菌有一种抗生素以上的耐药性，到了1964年，40%的流行病株有四重或更多的耐药性。1972年墨西哥的抗氯霉素伤寒杆菌造成了1400多人死亡。据美国《新闻周刊》报道，仅1992年美国就有13300名患者死于抗生素耐药性细菌感染。1999年2月，路透社报道了美国科学家在肉鸡饲料中发现超级细菌，这种肠球菌对目前所有的抗生素具有耐药性。《发现》杂志称抗生素这种神奇的药物已走向穷途末路。    2002年初，欧盟从中国进口的虾、对虾中发现强力抗生素的药物残留，认为对人体健康构成潜在威胁，导致欧洲部分地区陷入食品恐慌。    2010年，据法新社和英国《卫报》8月11日综合报道，英国和印度研究人员发表报告称，一些赴印度接受手术等治疗的患者感染了一种新型超级细菌。这种几乎对所有抗生素具有抗药性的细菌正在从南亚传向英国，可能在全世界蔓延。    2011年，世界卫生组织将“控制抗菌素耐药性”作为2011年世界卫生日的主题，并提出“抵御耐药性：今天不采取行动，明天就无药可用”。二、 抗生素残留产生的原因    1. 抗生素饲料添加剂的使用    抗生素饲料添加剂的长期使用；一些添加抗生素的饲料不在标签上标识，或标识与实际不符而造成养殖企业重复用药；以治疗量当作预防量添加等因素都会造成抗生素的残留。    2. 不遵守休药期、停药期的规定    一些养殖企业不遵守休药期、停药期的规定，从而使药物残留量超过国家标准。如 《乳与乳制品卫生管理办法》第4条规定：应用抗生素期间和停药期内的乳汁不得供食用。    3. 未正确使用抗生素         给动物使用抗生素时，在给药剂量、给药途径、用药时间和用药部位等方面不符合用药规定， 造成抗生素残留在体内并使残留时间延长。如对泌乳牛用药不当或不注意安全时间给药是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎时，更易造成牛乳中抗生素残留。    4. 作为保鲜剂使用         一些不法交奶户在夏季高温季节为防止牛奶的酸败，往往向牛奶中添加抗生素作为保鲜剂使用，造成牛奶中抗生素的残留。     5. 使用违禁药物或 国家标准规定不许使用的药物               一些养殖企业不遵守国家规定，在饲料或饮水中直接添加违禁药物或淘汰药物，导致畜产品中抗生素残留。  三、抗生素残留的危害                                   1. 产生毒性作用    人们长期食用含有抗生素残留的动物性食品，抗生素可在体内蓄积，危害人体健康。如四环素类（土霉素、金霉素、四环素）经口服可直接刺激机体引起人体不舒服，出现恶心、呕吐、腹部不适、食欲减退等症状，四环素类还能影响骨和牙齿的生长，抑制婴儿的骨髓生长。               2. 产生细菌耐药性    抗生素对不同病原微生物的抗菌效力并不一致，这主要是由于微生物在药物敏感性方面存在差异。根据这种差异，将不同菌种对同一抗生素的敏感性分为高度敏感、中度敏感、轻度敏感和耐药等4种情况。细菌是通过药物靶酶的改变、代谢途径的改变、通透性屏障和产生灭活酶或修饰酶等机制产生耐药性的。            3. 使菌群失调        正常条件下，人体肠道寄生着对人体有益的微生物菌群，它们与人体相互适应，维持着微生物菌群的平衡，某些菌群还能合成维生素供机体使用。长期食用有抗生素残留的动物性食品，会造成一些非致病菌的死亡，使菌群失调，同时使肠道内产生B族维生素和维生素K 的细菌受到抑制，从而引起维生素缺乏。由于抗生素抑制了有益菌的生长，为一些耐药的致病菌提供了生存空间，甚至造成“二重感染”，危害人体健康 。      4. 发生过敏反应       经常食用含有青霉素、四环素、磺胺类药物以及某些氨基糖昔类抗生素等残留的动物性食品，能引起易感个体出现过敏反应，严重者可引起皮疹、呼吸困难、休克等症状，甚至危及生命。    5. 产生致畸、致癌、致突变作用      某些抗生素具有致畸、致癌、致突变的作用，人通过摄食肉、奶等动物性食品而引起病变，如氯霉素可引起各种可逆性血细胞减少，极少数可引起不可逆的再生障碍性贫血，容易引起早产儿及新生儿的循环障碍，称为“灰婴综合症”。四、世界各国禁止抗生素的制度    面对耐药性这一全球性的难题，世界卫生组织向科学家们发出倡议，寻求对策。1981年，WHO专门成立了慎用抗生素联盟，成员国包括90多个国家，各成员国都承诺采取严厉措施限制抗生素使用。1986年，瑞典全面禁止在畜禽饲料中使用抗生素。1996年由美国FDA、疾病控制和预防中心、农业部协作成立了国家抗生素抗药性检控体系。一旦发现耐药菌产生，便启动相应法律，包括收回药物使用许可证。2010年6月28日，FDA公布一份抗生素限令草案，旨在降低“动物滥用抗生素对人类健康构成的明显风险”。2012年1月4日，美国FDA针对使用广泛的头孢类抗生素发布部门规定：从2012年4月5日开始，禁止给牛、猪、火鸡使用头孢类抗生素。1997年，在柏林召开的世界卫生组织会议倡议在动物饲料中谨慎使用抗生素，以减少病原菌抗药性的扩散。同年三月，国际粮农组织在巴黎召开会议，会议确定通过“风险分析、风险处理、慎用抗生素和抗药性检测”来控制饲料中使用抗生素对公众健康的威胁。1998年12月于哥本哈根召开的抗生素和生长促进剂的工作会议上，与会者的意见表明，在未来的10年里将逐渐淘汰抗生素添加剂。1998年底，欧盟委员会颁布了杆菌肽锌、螺旋霉素、维吉尼亚霉素和泰乐菌素4种抗生素在畜禽饲料中作为生长促进剂使用的禁令，禁令自1999年7月1日起生效。1998年2月，丹麦牛肉与鸡肉行业宣布，自愿停止使用一切抗生素饲料；4月，猪肉行业宣布35公斤以上生猪，自愿停止使用一切抗生素饲料；同年，丹麦政府开始对使用抗生素的猪肉收税（每头猪2美元）。2000年，丹麦政府下令，所有动物，不论大小，一律禁用一切抗生素饲料。2006年1月1日，欧盟就已全面禁止在饲料中使用生长素、抗生素作为饲料生长添加剂。韩国从1991年起对肉类产品进行抗生素残留检测，从2005年起就开始逐渐减少允许使用的抗生素药物数量与种类。2011年的7月1日起，韩国全面禁止动物饲料中添加抗生素。    早在2000年，我国国家质量监督检验检疫局就颁布了8项无公害农产品国家标准，出台了49项绿色食品标准，73项无公害食品行业标准等，其中部分标准对少数几种抗生素的残留做出了规定。1994年农业部还专门发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》标准，此后又相继修订，但至今滥用抗生素造成残留超标事件仍时有发生。面对抗生素存在滥用风险的局面，中国农业部出台了一系列公告，农业部第168号公告——《饲料药物添加剂使用规范》 ，规定了部分兽用原料药可在制成预混剂后使用，包括土霉素钙预混剂、金霉素预混剂等抗生素预混剂在内的33种兽药预混剂名列其中；农业部第193号公告规定“氯霉素、及其盐、酯(包括琥珀氯霉素)及制剂，禁做所有用途，所有食品动物禁用”，“硝基咪唑类：甲硝唑、地美硝唑及其盐、酯及制剂，禁做促生长用，所有食品动物禁用”；农业部第560号公告也明确规定万古霉素及其盐、酯及制剂为禁用兽药。

 第五届中国北京国际食品安全高峰论坛于3月27日在北京国家会议中心召开。作为大会白金赞助商，北京勤邦生物技术有限公司成功参展。公司董事长何方洋博士和公司研发实验室主任陶光灿博士分别在主题论坛和分论坛上作了报告，中国农业大学原副校长现勤邦生物总裁马寅生在大会开幕式上致辞。                                     北京勤邦生物技术有限公司展台                              中国农业大学原副校长现勤邦生物总裁 马寅生先生     中国农业大学原副校长马寅生先生在开幕式致辞中，说到：“去年10月份，受到勤邦生物技术有限公司董事长何方洋博士的邀请，也正是勤邦生物公司的现状和发展前景吸引了我，是以何方洋博士为首的这支年轻团队的真诚感动了我，是食品安全快速检测行业所肩负的历史使命激励了我，我毅然放弃了在高等教育继续工作发展的机会，加入到食品安全领域，工作将近5个多月，深感责任重大。” 　　马先生表示随着社会的发展，食品营养和食品安全越来越受到大家的重视，说明食品质量与安全问题非常突出，但从事食品安全领域工作的人才和社会需求相比是严重滞后的。我国在2003年，才开始设立食品质量与安全专业，尽管目前我国已有70多所院校设立了该专业，但是专业人才的数量与社会的需求是不相匹配的。在食品安全领域的人才培养上，也对各大高等院校提出了更高的要求。                                  北京勤邦生物技术有限公司董事长 何方洋博士      北京勤邦生物技术有限公司董事长何方洋博士为大家带来了题为《食品安全风险控制》的报告。 　　 国内外食品安全风险控制的现状 　　 何博士在报告中介绍了国内外食品安全风险控制的现状，国际上1963年，联合国粮食和农业组织（FAO）和联合国世界卫生组织（WHO）共同创建了食品法典委员会（CAC）。该委员会的宗旨在于保护消费者健康，保证开展公正的食品贸易和协调所有食品标准的制定工作。出口国现在监控的项目包括有欧盟食品法典、欧盟食品中农兽药残留限量标准、日本肯定列表制度、美国食品安全现代化法案等。 　　 中国现在监控的项目包括《中华人民共和国食品安全法》、中华人民共和国农业部公告235号、《动物性食品中兽药最高残留限量》、《食品中百草枯等54种农药最大残留限量》。我国食品安全检验检测体系框架已经基本形成国家、省、地、县、乡镇各级政府检测机构；食材生产和食品加工品控制测实验室；第三方检验机构。      食品安全检测行业的发展趋势 　　何博士谈到食品安全检测行业的发展趋势：（1）在保证检测精度的前提下，检测时间越短越好；（2）检测灵敏度更高，接近或达到分析仪器的水平；（3）检测仪器微 型化、自动化；（4）检测方法集成化，依稀检测可同时测定多种成分的技术；（5）检测产品国际化，加快开发我国自主生产的快检产品，并供应给其他食品贸易 大国；（6）检测方法标准化，组织国内有关专家共同研究建立国家标准和相关规范，进而推动我国食品安全检测技术的发展。 　　食品安全控制 　　食品安全控制的两条线路：（1）终点控制，即终产品标准控制，思路是按标准验收而不论来源。例如终产品个营养成分和辅助成分的定制定量标准；有害物的限量或禁止标准。（2）路径控制，即溯源控制，对食材、加工各环节过程进行控制，例如有机食品和绿色食品是按溯源来定义的。 　　还应建立食品安全风险数据库，根据不同的检测方法，建立相应的数据库；对重点危险物质，采取批批检测方式；对其它危险物质，进行抽样检测；普检抽检相结合，保障食品安全。                                          北京勤邦生物技术有限公司研发实验室主任 陶光灿博士      陶博士从食品安全的背景出发，引出食品安全受到国家高度重视。针对食品安全检测行业的发展趋势，陶博士讲到以下几点： 　　1、在保证检测精度的前提下，检测时间越短越好； 　　2、检测灵敏度更高，要求快检方法的灵敏度接近或达到分析仪器的水平，满足超痕量值指标检测的需求； 　　3、检测仪器微型化、自动化。 　　4、检测方法集成化，要求通过一次检测可同时测定多种成分的技术； 　　5、检测产品国际化，研究生产具有我国自主知识产权的食品安全快检产品，同时需加快我国开发快检产品供应其他食品贸易大国，目前主要趋向于东南亚及亚洲等； 　　6、检测方法标准化，组织国内有关科研院所、大专院校和企业的专家共同研究建立国家标准和相关规范，进而推动我国食品安全检测技术的发展。 　　陶博士在报告中重点介绍了用于食品检测的发光免疫分析。该技术是将灵敏的发光分析和特异的免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术，该技术利用化学反应释放的自由能激发中间体，使其从激发态回到基态，释放出等能级的光子，经化学发光免疫分析仪对光子的测定，可以精确定量被测物含量。 　　勤邦生物结合公司试剂研发平台，在国内率先将化学发光免疫(CLIA)技术应用到食品安全检测领域，开发出“高通量自动化食品安全快速检测设备”。接下来博士列举了沙丁胺醇检测实例，并同酶联免疫（ELISA）检测方法、LC-MS检测方法作了对比。证明化学发光免疫(CLIA)技术能有效弥补目前快检技术不能定量，仪器检测过程复杂，成本高等技术缺陷，预言其将成为食品安全检测行业的新兴领域。 关于北京勤邦生物技术有限公司 　　　　勤邦生物专注于食品安全事业，为农业系统、质检体系、工商抽检、企业自检等用户提供专业的咨询服务、先进的技术支撑和高效的行业整体解决方案。公司秉承“至诚、至善、至勤、至精”企业文化，着重以市场为导向、产业化为目标，依靠自主创新和卓越品质，推进食品安全检测事业的快速发展，为保障百姓食品安全与健康全力以赴。

                                                                                              2011年度“中关村十大系列评选活动”自2011年9月20日启动，本次评选活动经中关村管委会同意，由品牌中国产业联盟主办，活动得到了中关村各园委员会、产业联盟、行业协会的大力支持和积极推荐，得到了中关村示范区企业的广泛关注和热情参与。经过三个多月的紧张评选。历经项目征集、专家初评、公众投票、专家复审等环节，最终确定了评选榜单。北京勤邦生物技术有限公司从中关村科技园15000多家企业中脱颖而出，荣获“2011中关村新锐企业百强”。